Forholdet mellem subklinisk hypothyroidisme og resultatet af graviditeten (GravThyr)

Målet er at vurdere sammenhængen mellem SH og spontan abort og/eller obstetriske komplikationer på grund af mitokondriel dysfunktion.

1. Et prospektivt studie, hvor data fra General Suburban Population Study i Næstved vil blive analyseret for at måle hyppigheden af ​​subklinisk hypothyroidisme (SH) og TPOab. SH er defineret som forhøjede serumkoncentrationer af TSH > 3,4 mU/l og normale niveauer af frit T4 og T3. Der anvendes en cut-off på 60 mU/l for TPOab.
2. At estimere sammenhængen mellem SH eller TPOab og tidlig spontan abort og graviditetsudfald. Inklusion af kvinder, der har oplevet minimum én tidlig spontan abort og mellem 20 og 50 år: 50 kvinder, der har SU og/eller TPOab-positive og 50 kvinder, som har normale niveauer af TSH og TPOab-negative. Det basale iltforbrug vil blive målt, og mitokondriefunktioner vil blive bestemt ved flowcytometri.
3. At estimere forekomsten af ​​svangerskabshypertension og præeklampsi blandt gravide kvinder med subklinisk hypothyroidisme og estimere mitokondriefunktionen. Minimum 100 gravide kvinder uden skjoldbruskkirtelsygdom eller diabetes vil blive inkluderet.

Tidlig spontan abort er defineret som abort før 12 ugers graviditet. Obstetriske komplikationer er defineret som præeklampsi (proteinuri, ødem, hypertension), graviditetsinduceret hypertension, placenta-insufficiens (IUGR) og abruption, præmatur fødsel og dødfødsel. Disse komplikationer vil blive analyseret ud fra data fra de obstetriske journaler.

Måling af iltforbrug:

Åndedrætsgasanalyse og volumenmålinger blev udført med en baldakin forbundet med en tredobbelt V (flow/gassensor) til et Oxycon-apparat (Jaeger Oxycon Champion, Breda, Holland). Udstyret blev kalibreret før hver test for at kompensere for omgivende forhold såsom lufttryk, temperatur og fugtighed. Basal VO2 blev målt efter mindst 6 timers faste. Før testen blev den individuelle hvilepuls etableret, og deltagerne hvilede i ca. 30 minutter i en stol. Testrummet var stille, og belysningen var dæmpet. Forsøgspersonerne fik tilstrækkelig tid til at blive fortrolige med udstyret og procedurerne, og testen blev påbegyndt, når hvilepulsen var opnået. Iltforbruget blev målt, når optagelsen pr. minut forblev konstant. Målinger blev udført i gentagne perioder på 30 sekunder i 20 minutter. Metoden til registrering af iltoptagelse havde en variation inden for dagen på 0,8 % og en dag-til-dag variation på 5,8 %.

Måling af mitokondriel masse (MM) og mitokondriel membranpotentiale (MMP) ved flowcytometri:

Venøst ​​blod blev udtaget fra patienten i EDTA Vacutainer-rør. Fra hver patient blev 2 prøver på 100 µl blod behandlet. Et ufarvet kontrolrør og et farvet blev analyseret.

Prøverne, der skulle farves, blev tilsat 1 µl Pacific Blue Mouse Anti-Human anti-CD14 (BD Biosciences, Danmark) og blandet. Rørene blev inkuberet i 30 minutter ved stuetemperatur beskyttet mod direkte lys og efterfølgende vasket.

De farvede celler blev resuspenderet i 890 µl PBS og tilsat 10 µl 1 µM MTG (MitoTracker Green FM, Invitrogen A/S, Danmark) og 100 µl 1 µM TMRM (Tetramethylrhodamin-methylester, Invitrogen A/S, Danmark). Alle stamopløsninger blev opløst i DMSO (dimethylsulfoxid), og arbejdsopløsninger blev fortyndet i PBS. Efter blanding blev prøver inkuberet i 30 minutter ved stuetemperatur i mørke.