Subkliinisen kilpirauhasen vajaatoiminnan ja raskauden lopputuloksen välinen suhde (GravThyr)

Tavoitteena on arvioida SH:n ja spontaanin abortin ja/tai mitokondrioiden toimintahäiriöistä johtuvien synnytyskomplikaatioiden välistä suhdetta.

1. Prospektiivinen tutkimus, jossa Naestvedin yleisen esikaupunkien väestötutkimuksen tiedot analysoidaan subkliinisen kilpirauhasen vajaatoiminnan (SH) ja TPOab:n esiintymisen mittaamiseksi. SH määritellään kohonneiksi seerumin TSH-pitoisuuksiksi > 3,4 mU/l ja normaaleiksi vapaan T4:n ja T3:n tasoiksi. TPOab:n raja-arvo on 60 mU/l.
2. Arvioida SH:n tai TPOabin sekä varhaisen spontaanin abortin ja raskauden lopputuloksen välistä suhdetta. Mukaan otetaan naiset, jotka ovat kokeneet vähintään yhden varhaisen spontaanin abortin ja 20–50-vuotiaat: 50 naista, joilla on SU- ja/tai TPOab-positiivinen ja 50 naista, joilla on normaalit TSH- ja TPOab-negatiiviset tasot. Hapen peruskulutus mitataan ja mitokondrioiden toiminnot määritetään virtaussytometrialla.
3. Arvioida raskausajan hypertension ja pre-eklampsian esiintyvyys raskaana olevilla naisilla, joilla on subkliininen kilpirauhasen vajaatoiminta ja mitokondrioiden toiminta. Mukaan otetaan vähintään 100 raskaana olevaa naista, joilla ei ole kilpirauhasen sairautta tai diabetesta.

Varhainen spontaani abortti määritellään keskenmenoksi ennen 12 raskausviikkoa. Synnytyskomplikaatiot määritellään preeklampsiaksi (proteinuria, turvotus, kohonnut verenpaine), raskauden aiheuttama hypertensio, istukan vajaatoiminta (IUGR) ja irtoaminen, ennenaikainen synnytys ja kuolleena syntymä. Nämä komplikaatiot analysoidaan synnytyslehtien tiedoista.

Hapen kulutuksen mittaus:

Hengityskaasuanalyysi ja tilavuusmittaukset suoritettiin katolla, joka oli yhdistetty kolminkertaisella V:llä (virtauskaasuanturi) Oxycon-laitteeseen (Jaeger Oxycon Champion, Breda, Alankomaat). Laitteet kalibroitiin ennen jokaista testiä ympäristöolosuhteiden, kuten ilmanpaineen, lämpötilan ja kosteuden, kompensoimiseksi. Basaali-VO2 mitattiin vähintään 6 tunnin paaston jälkeen. Ennen testiä laskettiin yksilöllinen lepopulssi ja osallistujat lepäsivät noin 30 minuuttia tuolissa. Koehuoneessa oli hiljaista ja valaistus vaimeaa. Koehenkilöille annettiin riittävästi aikaa tutustua laitteisiin ja toimenpiteisiin ja testi aloitettiin lepopulssin saavutettua. Hapenkulutus mitattiin, kun saanti minuutissa pysyi vakiona. Mittaukset suoritettiin toistuvina 30 sekunnin jaksoina 20 minuutin ajan. Hapenoton kirjaamismenetelmässä vaihtelu päivän sisällä oli 0,8 % ja päivittäinen vaihtelu 5,8 %.

Mitokondriomassan (MM) ja mitokondriaalisen kalvopotentiaalin (MMP) mittaus virtaussytometrialla:

Potilaalta otettiin laskimoveri EDTA Vacutainer -putkiin. Kustakin potilaasta käsiteltiin 2 näytettä 100 ui veristä. Yksi värjäämätön kontrolliputki ja yksi värjätty analysoitiin.

Värjättäviin näytteisiin lisättiin 1 ui Pacific Blue Mouse Anti-Human anti-CD14 (BD Biosciences, Tanska) ja sekoitettiin. Putkia inkuboitiin 30 minuuttia huoneenlämpötilassa suojattuna suoralta valolta ja pestiin sen jälkeen.

Värjätyt solut suspendoitiin uudelleen 890 ul:aan PBS:ää ja lisättiin 10 ui 1 uM MTG:tä (MitoTracker Green FM, Invitrogen A/S, Tanska) ja 100 ui 1 uM TMRM:ää (tetrametyylirodamiinimetyyliesteri, Invitrogen A/Tanska). Kaikki varastoliuokset liuotettiin DMSO:hon (dimetyylisulfoksidi) ja työliuokset laimennettiin PBS:ään. Sekoituksen jälkeen näytteitä inkuboitiin 30 minuuttia huoneenlämpötilassa pimeässä.