Innovative biomarkører i Alzheimers sygdom og frontotemporal demens (FTD): forebyggende og personligt tilpasset

Vurdering af biomarkører i Alzheimers sygdom og frontotemporal demens

1. Specifikke mål

   For at forbedre feltet for biomarkørgenkendelse og lette forebyggende og personlig medicin, stiller vi nu følgende spørgsmål, om den israelske patientpopulation har lignende plasmaproteinprofil som beskrevet før for andre populationer (Marksteiner et al., 2011).

   Undersøgelser vil blive udført ved RNA-transkript kvantificering, kvantitativ realtids polymerasekædereaktion (blodceller og CSF) og immunkemisk påvisning på proteinniveau (CSF og serum).

2. Metoder:

Lymfocytter:

Humane lymfocytter isoleres fra 10 ml veneblod ved hjælp af Ficoll Paque-metoden (de Rock og Taylor 1977; McCauley og Hartmann, 1982), til RNA-ekstraktion og -bestemmelser skal vi følge op på metoderne beskrevet i vores manuskripter (Dresner et al. , 2011).

Blodplasma og serum vil blive klargjort som beskrevet på www.peoimmune.com. Proteinkvantificering vil blive udført ved hjælp af Tri-reagenset (Sigma), som muliggør samtidig fremstilling af RNA, DNA og protein- og plasmaimmundepletering og albumindepleteringskit fra Sigma.

Proteinkvantificering: dette vil blive udført på cellulære proteiner og også på plasmaproteiner ved SDS-polyacrylamidgelelektroforese, efterfulgt af westernanalyse.

CSF-prøver vil blive opsamlet gennem en spinal nål indsat i L4-L5- eller L3-L4-hvirvelrummet med forsøgspersonen i den laterale decubitusposition. En ml CSF afledt fra hver patient vil straks blive nedsænket i is med efterfølgende vedligeholdelse ved -70 grader C (eller i tøris under forsendelse) indtil tidspunktet for analysen. Halv ml af hver CSF-prøve vil blive koncentreret ved lyofilisering i en Speed-Vac (Holten, Gydevang, Danmark) til ca. 0,1 ml. CSF-proteinimmunoblotting vil blive udført under anvendelse af en lignende metode som beskrevet ovenfor [og se også (Kozlovsky et al., 2004)]. Proteinekspression vil blive analyseret med western blots (Shiryaev et al., 2010).

Antal patienter:

Vi vurderer, at omkring 30 patienter med Alzheimers sygdom, 20 patienter med frontotemporal demens og 20 kontroller vil blive inkluderet.

Professor Aharon-Peretz vil evaluere patienter med mistanke om Alzheimers sygdom og frontotemporal demens og inkludere patienter på forskellige sygdomsstadier på en stratificeret måde (mild, moderat og svær). Alle patienter vil have underskrevet en informeret samtykkeerklæring i henhold til Helsinki-retningslinjerne. Klinisk evaluering vil omfatte: fysisk og neurologisk evaluering. Alle patienter vil blive bedt om at donere 50 ml blod, og udvalgte patienter vil gennemgå tømmerpunktur. Tømmerpunkteringen vil blive udført med det neurologiske arbejde oppe. Professor Gozes vil koordinere det videnskabelige aspekt af undersøgelsen.

Studiekoordinatorer:

Videnskabeligt: ​​Professor Illana Gozes, PhD, The Lily og Avraham Gildor-stolen for undersøgelse af vækstfaktorer; Direktør, Adams Super Center for Brain Studies, Tel Aviv University: igozes@post.tau.ac.il Klinisk materiale: Professor Judith Aharon-Peretz, MD, leder af "Cognitive Neurology Unit" Rambam Rambam-Health Care Campus, Haifa, Israel