Innovativa biomarkörer vid Alzheimers sjukdom och frontotemporal demens (FTD): förebyggande och personligt anpassad

Bedömning av biomarkörer vid Alzheimers sjukdom och frontotemporal demens

1. Specifika mål

   För att förbättra fältet för igenkänning av biomarkörer och underlätta förebyggande och personlig medicin ställer vi nu följande fråga, har den israeliska patientpopulationen liknande plasmaproteinprofil som beskrivits tidigare för andra populationer (Marksteiner et al., 2011).

   Studier kommer att utföras genom kvantifiering av RNA-transkript, kvantitativ polymeraskedjereaktion i realtid (blodceller och CSF) och immunokemisk detektion på proteinnivå (CSF och serum).

2. Metoder:

Lymfocyter:

Humana lymfocyter isoleras från 10 ml venöst blod med Ficoll Paque-metoden (de Rock och Taylor 1977; McCauley och Hartmann, 1982), för RNA-extraktion och bestämningar ska vi följa upp metoderna som beskrivs i våra manuskript (Dresner et al. , 2011).

Blodplasma och serum kommer att beredas enligt beskrivningen på www.peoimmune.com. Proteinkvantifiering kommer att utföras med hjälp av Tri-reagenset (Sigma) som möjliggör samtidig beredning av RNA, DNA och protein- och plasmaimmunutarmning och albuminutarmningskit från Sigma.

Proteinkvantifiering: detta kommer att utföras på cellulära proteiner och även på plasmaproteiner genom SDS-polyakrylamidgelelektrofores, följt av westernanalys.

CSF-prover kommer att samlas in genom en ryggradsnål som sätts in i L4-L5- eller L3-L4-kotutrymmet med patienten i lateral decubitusposition. En ml CSF från varje patient kommer omedelbart att sänkas ner i is, med efterföljande underhåll vid -70 grader C (eller i torris under transport) fram till analystillfället. Halva ml av varje CSF-prov kommer att koncentreras genom lyofilisering i en Speed-Vac (Holten, Gydevang, Danmark) till cirka 0,1 ml. CSF-proteinimmunblotting kommer att utföras med användning av en liknande metod som beskrivs ovan [och se även (Kozlovsky et al., 2004)]. Proteinuttryck kommer att analyseras med western blots (Shiryaev et al., 2010).

Antal patienter:

Vi uppskattar att cirka 30 patienter med Alzheimers sjukdom, 20 patienter med frontotemporal demens och 20 kontroller kommer att inkluderas.

Professor Aharon-Peretz kommer att utvärdera patienter med misstänkt Alzheimers sjukdom och frontotemporal demens och inkludera patienter i olika sjukdomsstadier på ett stratifierat sätt (lindrig, måttlig och svår). Alla patienter kommer att ha undertecknat ett informerat samtycke, enligt Helsingfors riktlinjer. Klinisk utvärdering kommer att omfatta: fysisk och neurologisk utvärdering. Alla patienter kommer att bli ombedda att donera 50 ml blod och utvalda patienter kommer att genomgå timmerpunktion. Timmerpunktionen kommer att utföras med det neurologiska arbetet uppe. Professor Gozes kommer att samordna den vetenskapliga aspekten av studien.

Studiekoordinatorer:

Vetenskaplig: Professor Illana Gozes, PhD, The Lily och Avraham Gildor ordförande för undersökning av tillväxtfaktorer; Direktör, Adams Super Center for Brain Studies, Tel Aviv University: igozes@post.tau.ac.il Kliniskt material: Professor Judith Aharon-Peretz, MD, chef för "Cognitive Neurology Unit" Rambam Rambam-Health Care Campus, Haifa, Israel