Innovatieve biomarkers bij de ziekte van Alzheimer en frontotemporale dementie (FTD): preventief en gepersonaliseerd

Beoordeling van biomarkers bij de ziekte van Alzheimer en frontotemporale dementie

1. Specifieke doelen

   Om het gebied van biomarkerherkenning te verbeteren en preventieve en gepersonaliseerde geneeskunde te vergemakkelijken, stellen we nu de volgende vraag: vertoont de Israëlische patiëntenpopulatie een vergelijkbaar plasma-eiwitprofiel als eerder beschreven voor andere populaties (Marksteiner et al., 2011).

   Studies zullen worden uitgevoerd door middel van kwantificatie van RNA-transcripten, kwantitatieve real-time polymerasekettingreactie (bloedcellen en CSF) en immunochemische detectie op eiwitniveau (CSF en serum).

2. methoden:

Lymfocyten:

Menselijke lymfocyten worden geïsoleerd uit 10 ml veneus bloed met behulp van de Ficoll Paque-methode (de Rock en Taylor 1977; McCauley en Hartmann, 1982), voor RNA-extractie en bepalingen zullen we de methoden volgen die beschreven zijn in onze manuscripten (Dresner et al. , 2011).

Bloedplasma en -serum worden bereid zoals beschreven op www.peoimmune.com. Eiwitkwantificering zal worden uitgevoerd met behulp van het Tri-reagens (Sigma), dat gelijktijdige bereiding van RNA, DNA en eiwit en plasma-immunodepletie- en albumine-depletiekits van Sigma mogelijk maakt.

Eiwitkwantificering: dit zal worden uitgevoerd op cellulaire eiwitten en ook op plasma-eiwitten door middel van SDS-polyacrylamidegelelektroforese, gevolgd door Western-analyse.

CSF-monsters worden verzameld via een spinale naald die in de L4-L5- of L3-L4-wervelruimte wordt ingebracht met de patiënt in de laterale decubituspositie. Eén ml CSF afkomstig van elke patiënt wordt onmiddellijk ondergedompeld in ijs, met daaropvolgend onderhoud bij -70 ° C (of in droogijs tijdens verzending) tot het moment van de test. Een halve ml van elk CSF-monster zal worden geconcentreerd door vriesdrogen in een Speed-Vac (Holten, Gydevang, Denemarken) tot ongeveer 0,1 ml. CSF-eiwitimmunoblotting zal worden uitgevoerd met behulp van een vergelijkbare methodologie als hierboven beschreven [en zie ook (Kozlovsky et al., 2004)]. Eiwitexpressie zal worden geanalyseerd met western blots (Shiryaev et al., 2010).

Aantal patiënten:

We schatten dat ongeveer 30 patiënten met de ziekte van Alzheimer, 20 patiënten met frontotemporale dementie en 20 controles zullen worden geïncludeerd.

Professor Aharon-Peretz zal patiënten met verdenking op de ziekte van Alzheimer en frontotemporale dementie evalueren en patiënten in verschillende stadia van de ziekte op een gestratificeerde manier (licht, matig en ernstig) opnemen. Alle patiënten hebben een formulier voor geïnformeerde toestemming ondertekend, volgens de richtlijnen van Helsinki. Klinische evaluatie omvat: fysieke en neurologische evaluatie. Alle patiënten wordt gevraagd 50 ml bloed te doneren en geselecteerde patiënten ondergaan een houtpunctie. De houtpunctie zal worden uitgevoerd met het neurologische werk omhoog. Professor Gozes zal het wetenschappelijke aspect van de studie coördineren.

Studiecoördinatoren:

Wetenschappelijk: Professor Illana Gozes, PhD, The Lily and Avraham Gildor Chair for the Investigation of Growth Factors; Directeur, The Adams Super Center for Brain Studies, Universiteit van Tel Aviv: igozes@post.tau.ac.il Klinisch materiaal: Professor Judith Aharon-Peretz, MD, hoofd van "Cognitive Neurology Unit" Rambam Rambam-Health Care Campus, Haifa, Israël