Innovative biomarkører i Alzheimers sykdom og frontotemporal demens (FTD): Forebyggende og personlig tilpasset

Vurdering av biomarkører ved Alzheimers sykdom og frontotemporal demens

1. Spesifikke mål

   For å forbedre feltet for biomarkørgjenkjenning og legge til rette for forebyggende og personlig medisin, stiller vi nå følgende spørsmål, viser den israelske pasientpopulasjonen lignende plasmaproteinprofil som beskrevet tidligere for andre populasjoner (Marksteiner et al., 2011).

   Studier vil bli utført ved RNA-transkript kvantifisering, kvantitativ sanntids polymerasekjedereaksjon (blodceller og CSF) og immunkjemisk påvisning på proteinnivå (CSF og serum).

2. Metoder:

Lymfocytter:

Humane lymfocytter isoleres fra 10 ml venøst ​​blod ved å bruke Ficoll Paque-metoden (de Rock og Taylor 1977; McCauley og Hartmann, 1982), for RNA-ekstraksjon og -bestemmelser skal vi følge opp metodene beskrevet i våre manuskripter (Dresner et al. , 2011).

Blodplasma og serum vil bli tilberedt som beskrevet på www.peoimmune.com. Proteinkvantifisering vil bli utført ved å bruke Tri-reagenset (Sigma) som muliggjør samtidig fremstilling av RNA, DNA og protein- og plasmaimmundeplesjon og albumindeplesjonssett fra Sigma.

Proteinkvantifisering: dette vil bli utført på cellulære proteiner og også på plasmaproteiner ved SDS-polyakrylamidgelelektroforese, etterfulgt av westernanalyse.

CSF-prøver vil bli samlet inn gjennom en spinalnål satt inn i L4-L5 eller L3-L4 vertebralrommet med forsøkspersonen i lateral decubitusposisjon. Én ml CSF avledet fra hver pasient vil umiddelbart nedsenkes i is, med påfølgende vedlikehold ved -70 grader C (eller i tørris under frakt) frem til tidspunktet for analysen. Halv ml av hver CSF-prøve vil bli konsentrert ved lyofilisering i en Speed-Vac (Holten, Gydevang, Danmark) til ca. 0,1 ml. CSF-proteinimmunoblotting vil bli utført ved å bruke en lignende metodikk som beskrevet ovenfor [og se også (Kozlovsky et al., 2004)]. Proteinuttrykk vil bli analysert med western blots (Shiryaev et al., 2010).

Antall pasienter:

Vi anslår at ca 30 pasienter med Alzheimers sykdom, 20 pasienter med frontotemporal demens og 20 kontroller vil bli inkludert.

Professor Aharon-Peretz vil evaluere pasienter med mistanke om Alzheimers sykdom og frontotemporal demens og inkludere pasienter på ulike sykdomsstadier på en stratifisert måte (mild, moderat og alvorlig). Alle pasienter vil ha signert et informert samtykkeskjema, i henhold til Helsingfors retningslinjer. Klinisk evaluering vil omfatte: fysisk og nevrologisk evaluering. Alle pasienter vil bli bedt om å donere 50 ml blod og utvalgte pasienter vil gjennomgå trelast. Trelastpunkteringen vil bli utført med det nevrologiske arbeidet oppe. Professor Gozes vil koordinere det vitenskapelige aspektet av studien.

Studiekoordinatorer:

Vitenskapelig: Professor Illana Gozes, PhD, The Lily and Avraham Gildor Chair for Investigation of Growth Factors; Direktør, Adams Super Center for Brain Studies, Tel Aviv University: igozes@post.tau.ac.il Klinisk materiale: Professor Judith Aharon-Peretz, MD, leder for "Cognitive Neurology Unit" Rambam Rambam-Health Care Campus, Haifa, Israel