Probiotika in der Behandlung von NAFLD

Design Die Studie ist eine doppelblinde, placebokontrollierte Parallelgruppenstudie mit einem Zentrum. Die Patienten wurden randomisiert und erhielten sechs Monate lang entweder das probiotische Nahrungsergänzungsmittel (1.109 Lactobacillus acidophilus ATCC SD5221 und 1.109 Bifidobacterium lactis HN019) oder ein Placebo. Alle Teilnehmer erhalten eine individuelle Ernährungsberatung durch eine Ernährungsberaterin.

Randomisierung Die Randomisierung wurde unter Verwendung der Website www.randomization.com durchgeführt. Die Zuordnungsreihenfolge blieb während der gesamten Studie verborgen. Forscher, Ergebnisbewerter und Patienten waren gegenüber der erhaltenen Behandlung verblindet.

Die Studie wurde unter www.clinicaltrials.gov registriert. (Nummer NCT02764047)

Interventionspatienten erhalten das Probiotikum oder das Placebo in identischen Medikamentenfläschchen, um die Verblindung aufrechtzuerhalten. Die Anweisung zur Einnahme der Kapseln lautet, 1 Kapsel pro Tag vor dem Schlafengehen mit 1 Tasse Wasser einzunehmen. Den Patienten wird außerdem empfohlen, die Medikamente bis zum Ende der Studie unverändert einzunehmen und die Prüfärzte zu informieren, wenn sie Antibiotika verwendet haben.

Fragebogen – Profil und Risikofaktoren für Fibrose und NASH Das Profil von Patienten mit NASH wird anhand der erhobenen Variablen (Alter, Geschlecht, Rauchen, Diabetes, Bluthochdruck, Bluthochdruck, Herzfrequenz, Gewicht, Größe, BMI, Taille) analysiert Umfang, AST, ALT, Gesamtbilirubin, Albumin, Gesamtcholesterin, HDL-Cholesterin, LDL-Cholesterin, Triglyzeride, Glukose, Insulin, C-reaktives Protein, Blutplättchen) sowie die möglichen Risikofaktoren für die Entstehung der Erkrankung. Es wird angenommen, dass die Wechselwirkung zwischen Ernährung, Darmmikrobiota und genetischem Hintergrund bei der Entwicklung und dem Fortschreiten von NAFLD am wichtigsten ist.

Die Teilnehmer werden gebeten, alle von ihnen verwendeten Medikamente oder eine Liste ihrer Apotheker zum Forschungszentrum mitzubringen. Während eines Medikationsgesprächs werden generischer Name, Dosis und Häufigkeit von geschultem Personal registriert.

Ernährungs- und körperliche Beurteilung Die Körpergröße wird zu Beginn gemessen, um den BMI zu bestätigen. Bei 0 (Basislinie), 3 und 6 Monaten wird das Körpergewicht unter Verwendung einer geeichten Waage, Taillenumfang, systolischer Blutdruck, diastolischer Blutdruck, Herzfrequenz gemessen. Die Körperzusammensetzung wird zu Beginn und nach 6 Monaten im Phasenwinkel der bioelektrischen Impedanzanalyse (BIA)-Methode, Handgriffstärke bewertet.

Biopsie, Fibromax- und NAFLD-Score Die Verbesserung der Leberschädigung wird durch die Verringerung von Fibrose, Steatose und Entzündung in Leberbiopsie und nichtinvasiven Tests Fibromax-Test und NAFLD-Score in unterschiedlichem Ausmaß definiert. NAFLD-Score und der FibroMax ™ -Test (Biopredictive, Paris, Frankreich), der Fibrose, Entzündung und hepatische Steatose bewertet. Sensitivität, Spezifität, positive und negative Vorhersagewerte werden für den Vergleich dieser nicht-invasiven Fibrose-Bewertungsmethoden mit Leberbiopsien bewertet. Lebertransaminasen (AST, ALT) werden ebenfalls bewertet.

Biochemische Marker – Allgemeine Labor- und Zytokinproben Zu Studienbeginn, nach 3 und 6 Monaten wird eine nüchterne Blutprobe zur Messung von Plasmalabortests (AST, ALT, Gesamtbilirubin, Albumin, Gesamtcholesterin, HDL-Cholesterin, LDL-Cholesterin, Triglyceride, Glukose) entnommen , Insulin, C-reaktives Protein, Blutplättchen), Serum-1-Leptin und MCP werden quantifiziert. Um die Spiegel von Serum-Leptin und MCP-1 zu bestimmen, wurden 15 ml venöse Blutproben aus der antecubitalen Vene entnommen und in Röhrchen ohne Antikoagulans (4 ml) überführt. Blutproben wurden zwischen 9:00 Uhr und 11:00 Uhr zu Studienbeginn (PRE), nach 3 Monaten und nach 6 Monaten entnommen. Röhrchen ohne Antikoagulans wurden 10 min bei 1048 g zentrifugiert. Die Serumproben wurden dann in mehrere Aliquots aufgeteilt und zur weiteren Analyse bei –20 °C gelagert. Serum-Leptin- und MCP-1-Spiegel wurden unter Verwendung des Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA)-Verfahrens unter Verwendung des spezifischen Kits (Peprotech, EUA) gemäß den Anweisungen des Herstellers bestimmt. Alle Proben wurden mit dem Mikroplatten-Lesegerät SpectraMax M2e (Molecular Devices, EUA) doppelt gemessen. Die Intra-Assay-Variationskoeffizienten waren immer <5,0 %, 3,8 % für BDNF bzw. Cortisol.

Darmmikrobiota - Stuhlprobe Kotproben werden von den Patienten in ihrer eigenen Flasche gesammelt und an die Ernährungsklinik im Hepatologischen Krankenhaus Santa Clara Santa Casa Hospital Complex geliefert. Die Proben werden zum Labor für Immunologie transportiert. Die Proben werden in 4 Proben aliquotiert, eingefroren und in –20 und –80 Grad Gefrierschränken gelagert. Am Ende der Entnahmen wird DNA extrahiert (MoBio PowerFecal® DNA Isolation Kit). DNA-Proben werden an das Forschungszentrum für Kardiologie und Pneumologie des Universitätsinstituts an der Universität von Quebec Laval geschickt. Es wird eine genetische Sequenzierung der Mikroflora in den Proben durchgeführt. Die Ergebnisse werden analysiert und mit klinischen Ergebnissen korreliert.

Ernährungsaufzeichnung Geeignete Patienten werden einer Ernährungsbewertung unter Verwendung eines Fragebogens zur Häufigkeit von Nahrungsmitteln unterzogen, der für Lebererkrankungen validiert ist, und einer 24-Stunden-Erinnerungsumfrage, die für mögliche Vergleiche mit dem Fragebogen zur Häufigkeit von Nahrungsmitteln verwendet wird. Die mehrstufige Methode zur Durchführung wird während des Patienteninterviews angewendet, um die Erfassungsgenauigkeit zu verbessern und Gedächtnisfehler zu reduzieren.