Probiootit NAFLD:n hoidossa

Suunnittelu Tutkimus on yhden keskuksen kaksoissokkoutettu, lumekontrolloitu rinnakkaisryhmätutkimus. Potilaat satunnaistettiin saamaan joko probioottista lisäravintoa (1,109 Lactobacillus acidophilus ATCC SD5221 ja 1,109 Bifidobacterium lactis HN019) tai lumelääkettä kuuden kuukauden ajan. Kaikki osallistujat saavat yksilöllisiä ruokavalioneuvontaa ravitsemusterapeutin kanssa.

Satunnaistaminen Satunnaistaminen suoritettiin verkkosivustolla www.randomization.com. Jakojärjestys pysyi piilossa koko tutkimuksen ajan. Tutkijat, tulosten arvioijat ja potilaat olivat sokeutuneet saamasta hoidosta.

Tutkimus rekisteröitiin osoitteessa www.clinicaltrials.gov. (numero NCT02764047)

Interventio Potilaat saavat probioottia tai lumelääkettä identtisissä lääkepulloissa sokeuden ylläpitämiseksi. Kapseleiden anto-ohje on ottaa 1 kapseli päivässä ennen nukkumaanmenoa 1 kupillisen vettä kera. Potilaita kehotetaan myös pitämään lääkkeet käytössä vaihtamatta tutkimuksen loppuun asti ja ilmoittamaan tutkijoille, jos he käyttivät antibiootteja.

Kysely - Fibroosin ja NASH:n profiili ja riskitekijät NASH-potilaiden profiili analysoidaan kerättyjen muuttujien mukaan (ikä, sukupuoli, tupakointi, diabetes, verenpainetauti, korkea verenpaine, syke, paino, pituus, BMI, vyötärö). ympärysmitta, ASAT, ALT, kokonaisbilirubiini, albumiini, kokonaiskolesteroli, HDL-kolesteroli, LDL-kolesteroli, triglyseridit, glukoosi, insuliini, C-reaktiivinen proteiini, verihiutaleet) sekä mahdolliset riskitekijät taudin kehittymiselle. Ruokavalion, suoliston mikrobiotan ja geneettisen taustan välisen vuorovaikutuksen uskotaan olevan tärkein NAFLD:n kehittymisessä ja etenemisessä.

Osallistujia pyydetään tuomaan tutkimuskeskukseen kaikki käyttämänsä lääkkeet tai luettelo apteekista. Lääkehaastattelussa koulutettu henkilökunta rekisteröi yleisnimen, annoksen ja tiheyden.

Ravitsemus- ja fyysinen arviointi Pituus mitataan lähtötilanteessa painoindeksin vahvistamiseksi. Asennossa 0 (perustaso) 3 ja 6 kuukauden ruumiinpaino mitataan käyttämällä kalibroitua tasapainoa, vyötärön ympärysmittaa, systolista verenpainetta, diastolista verenpainetta ja sykettä. Kehon koostumus arvioidaan lähtötilanteessa ja 6 kuukauden vaihekulman biosähköisen impedanssianalyysin (BIA) menetelmällä, käden otteen vahvuudella.

Biopsia, Fibromax- ja NAFLD-pisteet Maksavaurion paraneminen määritellään fibroosin, steatoosin ja tulehduksen vähenemisenä maksan biopsiassa ja noninvasiivisissa testeissä Fibromax-testi ja NAFLD-pistemäärä vaihtelevalla asteella. NAFLD-pisteet ja FibroMax ™ -testi (Biopredictive, Pariisi, Ranska), joka arvioi fibroosin, tulehduksen ja maksan rasvakudoksen. Herkkyys, spesifisyys, positiiviset ja negatiiviset ennustavat arvot arvioidaan verrattaessa näitä ei-invasiivisia fibroosin arviointimenetelmiä maksabiopsiaan. Myös maksan transaminaasit (AST, ALT) arvioidaan.

Biokemialliset markkerit - Yleislaboratorio- ja sytokiininäyte Lähtötilanteessa 3 ja 6 kuukauden kuluttua otetaan paastoverinäyte plasman laboratoriotestien (AST, ALT, kokonaisbilirubiini, albumiini, kokonaiskolesteroli, HDL-kolesteroli, LDL-kolesteroli, triglyseridit, glukoosi) mittaamista varten. , insuliini, C-reaktiivinen proteiini, verihiutale), seerumin -1 leptiini ja MCP kvantifioidaan. Seerumin leptiini- ja MCP-1-tasojen määrittämiseksi otettiin 15 ml:n laskimoverinäytteet kyynärpäälaskimosta ja siirrettiin putkiin ilman antikoagulanttia (4 ml). Verinäytteet kerättiin klo 9.00 ja 11.00 välillä lähtötilanteessa (PRE), 3 kuukauden ja 6 kuukauden kuluttua. Putkia ilman antikoagulanttia sentrifugoitiin 1048 g:ssä 10 minuuttia. Seeruminäytteet jaettiin sitten useisiin eriin ja säilytettiin -20 °C:ssa lisäanalyysiä varten. Seerumin leptiini- ja MCP-1-tasot määritettiin käyttämällä entsyymikytkentäistä immunosorbenttimääritystä (ELISA) käyttämällä spesifistä pakkausta (Peprotech, EUA) noudattaen valmistajan ohjeita. Kaikki näytteet mitattiin kahtena kappaleena mikrolevylukijalla SpectraMax M2e (Molecular Devices, EUA). Testin sisäiset variaatiokertoimet olivat aina <5,0 %, 3,8 % BDNF:lle ja kortisolille, vastaavasti.

Suoliston mikrobiota - Ulostenäyte Potilaat keräävät ulostenäytteet omaan pulloonsa ja toimittavat ne ravitsemusklinikalle Santa Clara Santa Casa -sairaalakompleksissa. Näytteet kuljetetaan immunologian laboratorioon. Näytteet jaetaan 4 näytteeseen, pakastetaan ja säilytetään -20 ja -80 asteen pakastimissa. Keräyksen lopussa DNA uutetaan (MoBio PowerFecal® DNA Isolation Kit). DNA-näytteet lähetetään Quebec Lavalin yliopiston kardiologian ja pneumologian tutkimuskeskukseen. Näytteiden mikroflooran geneettinen sekvensointi suoritetaan. Tulokset analysoidaan ja korreloidaan kliinisten tulosten kanssa.

Ruokatietue Soveltuville potilaille lähetetään ruoka-arviointi käyttämällä maksasairauksien varalta validoitua ruokatiheyskyselyä ja 24 tunnin palautuskyselyä, jota käytetään mahdollisiin vertailuihin ruokatiheyskyselyyn. Potilashaastattelussa käytetään monivaiheista suoritusmenetelmää, jolla pyritään parantamaan keräystarkkuutta ja vähentämään muistin harhaa.