Probiotika vid behandling av NAFLD

Design Studien är en enkelcenter dubbelblind, placebokontrollerad, parallell gruppstudie. Patienterna randomiserades till att få antingen det probiotiska tillägget (1,109 Lactobacillus acidophilus ATCC SD5221 och 1,109 Bifidobacterium lactis HN019) eller placebo under 6 månader. Alla deltagare får individuella kostrådgivningstillfällen med en dietist.

Randomisering Randomisering utfördes med hjälp av webbplatsen www.randomization.com. Tilldelningssekvensen förblev dold under hela studien. Forskare, resultatbedömare och patienter var blinda för den behandling som erhölls.

Rättegången registrerades på www.clinicaltrials.gov. (nummer NCT02764047)

Intervention Patienter får probiotika- eller placebotillskottet i identiska medicinflaskor för att bibehålla bländningen. Instruktionen för administrering av kapslarna är att ta 1 kapsel per dag före sänggåendet med 1 kopp vatten. Patienter rekommenderas också att behålla medicinering utan förändring till slutet av studien och att meddela utredarna om de använde antibiotika.

Frågeformulär - Profil och riskfaktorer för fibros och NASH Profilen för patienter med NASH kommer att analyseras enligt de variabler som samlas in (ålder, kön, rökning, diabetes, högt blodtryck, högt blodtryck, hjärtfrekvens, vikt, längd, BMI, midja omkrets, AST, ALT, totalt bilirubin, albumin, totalkolesterol, HDL-kolesterol, LDL-kolesterol, triglycerider, glukos, insulin, C-reaktivt protein, blodplättar), samt de möjliga riskfaktorerna för utvecklingen av sjukdomen. Man tror att interaktionen mellan kost, tarmmikrobiota och genetisk bakgrund är den viktigaste i utvecklingen och progressionen av NAFLD.

Deltagarna uppmanas att ta med all medicin de använder eller en lista från sina farmaceuter till forskningscentret. Under en läkemedelsintervju registreras generiskt namn, dos och frekvens av utbildad personal.

Näringsmässig och fysisk bedömning Längden mäts vid baslinjen för att bekräfta BMI. Vid 0 (baslinje), 3 och 6 månaders kroppsvikt mäts med hjälp av en kalibrerad balans, midjemått, systoliskt blodtryck, diastoliskt blodtryck, hjärtfrekvens. Kroppssammansättningen bedöms vid baslinjen och 6 månaders fasvinkel för bioelektrisk impedansanalys (BIA) metod, handgreppsstyrka.

Biopsi, Fibromax och NAFLD poäng Förbättring av leverskada kommer att definieras av minskning av fibros, steatos och inflammation i leverbiopsi och icke-invasiva tester Fibromax test och NAFLD poäng av varierande grad. NAFLD-poäng och FibroMax™-testet (Biopredictive, Paris, Frankrike), som utvärderar fibros, inflammation och leversteatos. Sensitivitet, specificitet, positiva och negativa prediktiva värden kommer att bedömas för jämförelse av dessa icke-invasiva fibrosbedömningsmetoder med leverbiopsi. Levertransaminaser (AST, ALAT) kommer också att bedömas.

Biokemiska markörer - Allmänna laboratorier och cytokinprov Vid baslinjen, 3 och 6 månader, tas ett fastande blodprov för mätning av plasmalaboratorietester (AST, ALT, total bilirubin, albumin, totalkolesterol, HDL-kolesterol, LDL-kolesterol, triglycerider, glukos , insulin, C-reaktivt protein, trombocyter), serum-1 leptin och MCP kommer att kvantifieras. För att bestämma nivåerna av serumleptin och MCP-1 togs 15 mL venöst blodprov från den antecubital venen och överfördes till rör utan antikoagulant (4 mL). Blodprover togs mellan 9:00 och 11:00, vid baslinjen (PRE), efter 3 månader och efter 6 månader. Rör utan antikoagulant centrifugerades vid 1048 g under 10 min. Serumprover delades sedan upp i flera alikvoter och lagrades vid -20 °C för vidare analys. Serumleptin- och MCP-1-nivåer bestämdes med användning av den enzymkopplade immunosorbentanalysmetoden (ELISA), med användning av det specifika kitet (Peprotech, EUA) enligt tillverkarens instruktioner. Alla prover mättes i duplikat med mikroplattläsare SpectraMax M2e (Molecular Devices, EUA). Variationskoefficienter inom analysen var alltid <5,0 %, 3,8 % för BDNF respektive kortisol.

Tarmmikrobiota - Avföringsprov Avföringsprover samlas av patienter i sin egen flaska och levereras till Nutrition Clinic på Hepatology Hospital Santa Clara Santa Casa Hospital Complex. Proverna transporteras till Immunologiska laboratoriet. Prover delas upp i 4 prover, frysas och förvaras i -20 och -80 graders frysar. I slutet av samlingarna kommer DNA att extraheras (MoBio PowerFecal® DNA Isolation Kit). DNA-prover kommer att skickas till University Institute Research Center of Cardiology and Pneumology vid University of Quebec Laval. Genetisk sekvensering av mikrofloran i proverna kommer att utföras. Resultaten kommer att analyseras och korreleras med kliniska resultat.

Matregister Kvalificerade patienter kommer att skickas till matbedömning med hjälp av ett frågeformulär för matfrekvens som är validerat för leversjukdomar och en 24-timmars återkallelseundersökning som används för möjliga jämförelser med frågeformuläret för matfrekvens. Flerstegsmetoden för utförande tillämpas under patientintervjun, i syfte att förbättra insamlingsnoggrannheten och minska minnesbias.