Probiotika til behandling af NAFLD

Design Studiet er et enkeltcenter dobbeltblindt, placebokontrolleret, parallelgruppestudie. Patienterne blev randomiseret til at modtage enten det probiotiske supplement (1.109 Lactobacillus acidophilus ATCC SD5221 og 1.109 Bifidobacterium lactis HN019) eller placebo i 6 måneder. Alle deltagere får individuelle kostrådgivningssessioner med en ernæringsekspert.

Randomisering Randomisering blev udført ved hjælp af hjemmesiden www.randomization.com. Tildelingssekvensen forblev skjult under hele undersøgelsen. Forskere, resultatbedømmere og patienter blev blindet for den modtagne behandling.

Forsøget blev registreret på www.clinicaltrials.gov. (nummer NCT02764047)

Intervention Patienter modtager probiotika eller placebo-tilskud i identiske medicinflasker for at opretholde blinding. Instruktionen til administration af kapslerne er at tage 1 kapsel om dagen før sengetid med 1 kop vand. Patienter rådes også til at holde medicin i brug uden ændringer indtil slutningen af ​​undersøgelsen og at kommunikere efterforskerne, hvis de brugte antibiotika.

Spørgeskema - Profil og risikofaktorer for fibrose og NASH Profilen af ​​patienter med NASH vil blive analyseret i henhold til de indsamlede variabler (alder, køn, rygning, diabetes, hypertension, højt blodtryk, hjertefrekvens, vægt, højde, BMI, talje omkreds, AST, ALT, total bilirubin, albumin, total kolesterol, HDL kolesterol, LDL kolesterol, triglycerider, glucose, insulin, C-reaktivt protein, blodplader), samt de mulige risikofaktorer for udviklingen af ​​sygdommen. Det menes, at interaktionen mellem kost, tarmmikrobiota og genetisk baggrund er den vigtigste i udviklingen og progressionen af ​​NAFLD.

Deltagerne bedes medbringe al medicin, de bruger, eller en liste fra deres farmaceuter til forskningscentret. Under en medicinsamtale registreres generisk navn, dosis og hyppighed af uddannet personale.

Ernæringsmæssig og fysisk vurdering Højden måles ved baseline for at bekræfte BMI. Ved 0 (basislinje) måles 3 og 6 måneders kropsvægt ved hjælp af en kalibreret balance, taljeomkreds, systolisk blodtryk, diastolisk blodtryk, puls. Kropssammensætning vurderes ved baseline og 6 måneders fasevinkel af bioelektrisk impedansanalyse (BIA) metode, håndgrebsstyrke.

Biopsi-, Fibromax- og NAFLD-score Forbedring af leverskade vil blive defineret ved reduktion af fibrose, steatose og inflammation i leverbiopsier og ikke-invasive tests Fibromax-test og NAFLD-score af varierende grad. NAFLD-score og FibroMax™-testen (Biopredictive, Paris, Frankrig), som evaluerer fibrose, inflammation og hepatisk steatose. Sensitivitet, specificitet, positive og negative prædiktive værdier vil blive vurderet til sammenligning af disse ikke-invasive fibrosevurderingsmetoder med leverbiopsi. Levertransaminaser (AST, ALT) vil også blive vurderet.

Biokemiske markører - Generelle laboratorier og cytokinprøver Ved baseline, 3 og 6 måneder, tages en fastende blodprøve til måling af plasmalaboratorietest (AST, ALT, total bilirubin, albumin, total kolesterol, HDL kolesterol, LDL kolesterol, triglycerider, glukose , insulin, C-reaktivt protein, blodplader), serum-1 leptin og MCP vil blive kvantificeret. For at bestemme niveauer af serumleptin og MCP-1 blev 15 mL venøse blodprøver taget fra den antecubitale vene og overført til rør uden antikoagulant (4 mL). Blodprøver blev indsamlet mellem kl. 9.00 og 11.00 ved baseline (PRE), efter 3 måneder og efter 6 måneder. Rør uden antikoagulant blev centrifugeret ved 1048 g i 10 min. Serumprøver blev derefter opdelt i flere alikvoter og opbevaret ved -20 °C til yderligere analyse. Serumleptin- og MCP-1-niveauer blev bestemt ved anvendelse af den enzymbundne immunosorbent-assay (ELISA)-metoden under anvendelse af det specifikke kit (Peprotech, EUA) efter producentens instruktioner. Alle prøver blev målt i to eksemplarer af mikropladelæser SpectraMax M2e (Molecular Devices, EUA). Intra-assay variationskoefficienter var altid <5,0%, 3,8% for henholdsvis BDNF og cortisol.

Tarmmikrobiota - Afføringsprøve Fækale prøver opsamles af patienter i deres egen flaske og leveres til ernæringsklinikken på Hepatologisk Hospital Santa Clara Santa Casa Hospital Complex. Prøverne transporteres til Immunologisk Laboratorium. Prøver fordeles i 4 prøver, fryses og opbevares i -20 og -80 graders frysere. Ved afslutningen af ​​samlingerne vil DNA blive ekstraheret (MoBio PowerFecal® DNA Isolation Kit). DNA-prøver vil blive sendt til University Institute Research Center of Cardiology and Pneumology ved University of Quebec Laval. Genetisk sekventering af mikrofloraen i prøverne vil blive udført. Resultater vil blive analyseret og korreleret med kliniske resultater.

Fødevareregistrering Kvalificerede patienter vil blive sendt til fødevarevurdering ved hjælp af et fødevarehyppighedsspørgeskema, der er valideret for leversygdomme, og en 24-timers tilbagekaldelsesundersøgelse, der bruges til mulige sammenligninger med fødevarehyppighedsspørgeskemaet. Flertrinsmetoden til udførelse anvendes under patientinterviewet med det formål at forbedre indsamlingsnøjagtigheden og reducere hukommelsesbias.