Nachweis von Anti-glomerulären Basalmembran-Antikörpern (Anti-GBM): ein vielversprechender Biomarker für Lupusnephritis (LN)? (GOODLUPUS)

Einleitung und Kontext:

Glomerulonephritis und Autoimmunerkrankungen sind oft assoziiert. Lupusnephritis (LN) ist eine der wichtigsten klinischen Manifestationen des systemischen Lupus erythematodes (SLE), die einen schwerwiegenden Einfluss auf die Prognose hat. Diese Komplikation ist eine echte Herausforderung für Kliniker, da sie schleichend auftritt und keine vorhersehbaren Rückfälle auftreten. Die Verwendung von Biomarkern ist daher unerlässlich, aber herkömmliche Biomarker wie Proteinurie, glomeruläre Filtrationsrate, Urinsedimente, Anti-dsDNA-Antikörper und Komplementspiegel haben eine schlechte Sensitivität und geringe Spezifität, um das Auftreten von LN vorherzusagen, und neue, zuverlässigere Biomarker (wie genetische, epigenetische oder Proteinbiomarker) sind in der täglichen medizinischen Praxis nur schwer anwendbar , .

Die Antiglomerulummembran-Krankheit (Anti-GBM-Erkrankung) ist eine seltene (0,5 bis 1/Million Einwohner , ) und schwere Erkrankung , , gekennzeichnet durch eine schnell fortschreitende Glomerulonephritis, Lungenblutungen und das Vorhandensein von Anti-GBM-Antikörpern, die stark ausgeprägt sind sensibel (100 %) und spezifisch (92-100 %) dieser Bedingung .

In unserer Abteilung für Innere Medizin wurde ein Fall von Goodpasture-Glomerulonephritis in Verbindung mit einem aktiven SLE gemeldet, und nach der Suche nach Daten in der Literatur stellen wir die folgenden Studien fest:

• einige ähnliche Fälle wurden berichtet, wie z. B. ein Fall von Lungenblutung und positivem Anti-GBM bei SLE oder ein Fall von Anti-GBM-Erkrankung und LN, die sich als pulmonal-renales Syndrom präsentierte.
• Im Jahr 2006 hob eine chinesische Kohortenstudie eine erhöhte Prävalenz von Anti-GBM-Antikörpern in Serumproben von Patienten mit SLE hervor (14 Positive/157 Patienten (8,9 %) mit ELISA-Methode). Darüber hinaus hatte jeder Patient mit positiven Anti-GMB-Antikörpern LN und einen schwereren SLE (mit mehr Anämien, Lungenblutungen). Sie litten auch an einer schwereren Nierenerkrankung. Tatsächlich hatten nach histologischen Kriterien 10 von 14 nekrotisierende halbmondförmige Glomerulonephritis-Läsionen und 5 von 14 hatten eine echte Diagnose der Goodpasture-Krankheit.

• Wir weisen auch darauf hin, dass einige Autoren bereits die Pathogenese dieser Assoziation untersucht haben (ob immunologische Erklärungen , genetische Verbindungen , ).

  3. Haupthypothese: Basierend auf diesen Befunden vermuten wir, dass der Nachweis positiver zirkulierender Anti-GBM-Antikörper bei SLE-beobachteten Patienten (als in der Allgemeinbevölkerung) häufiger positiv sein könnte und dass dies ein interessanter Screening-Biomarker für LN sein könnte.

  4. Ziele Erstes Ziel: Basierend auf 2 SLE-Patientengruppen (eine mit Lupusnephritis und eine ohne Lupusnephritis) möchten wir das Verhältnis positiver Anti-GBM-Antikörper in jeder Gruppe vergleichen, wobei wir eine höhere Rate bei SLE-Patienten mit LN erwarten.

Zweites Ziel: Untersuchung positiver Anti-GBM-Patienten hinsichtlich ihrer klinischen Aspekte, serologischen Merkmale und Nierenmerkmale in dieser SLE-Population.

5. Material und Methoden Wir schlagen eine retrospektive analytische transversale kontrollierte Studie vor, basierend auf Serumproben der Lupus Biobank Oberrhein (LBBR-Projekt) und auf Serumproben von gesunden freiwilligen Blutspendern (Kontrollgruppe).

In Bezug auf die Nutzung der LBBR Lupus Biobank wurde unser Projekt bereits vom wissenschaftlichen Komitee akzeptiert.

Nach der Randomisierung der Gruppe werden kryokonservierte SLE-Serumproben von einem spezialisierten Transportdienst von der Straßburger Biobank zur Laborabteilung für Immunologie im Zentrum der Universitätsklinik von Reims transportiert, um Anti-GBM-Tests durchzuführen.

In Bezug auf die Rekrutierung gesunder Serumproben wird das regionale Blutzentrum von Reims freiwilligen Blutspendern systematisch die Teilnahme vorschlagen. Wenn sie einverstanden sind, erhalten sie eine ausführliche Information über die Studie und nach schriftlicher Zustimmung wird eine Röhrchenprobe entnommen.

6. Population Die statistische Berechnung führte zu einem Bedarf von 200 SLE-Seren (100 Patienten in jeder Gruppe). Daher werden wir verwenden: 100 Serumproben von Lupus-Biobank-LBBR-Patienten ohne Lupusnephritis und 100 Serumproben von Patienten mit systemischem Lupus erythematodes und Lupusnephritis.

Wir werden auch 100 Serumproben von freiwilligen Blutspendern verwenden.

7. Experimentelles Projekt Der Nachweis von Anti-GBM-Antikörpern in Seren wird durch ein automatisiertes Chemilumineszenzverfahren unter Verwendung eines kommerziellen Testkits durchgeführt. Im Falle einer Positivität wird dasselbe Serum ein zweites Mal getestet, um das Ergebnis zu bestätigen, und dann durch eine andere Methode unter Verwendung von indirekter Immunfluoreszenz (IIF) in Gefrierschnitten von Primatennieren kontrolliert, die die Reaktionsbereiche eines BIOCHIP-Objektträgers abdecken (Referenzmethode).

Laut unserer immunologischen Laborabteilung benötigen wir 600 μl Serum pro Patient, um alle Tests durchführen zu können. Gemäß den Anweisungen des Herstellers wird der optimale Cut-off-Wert für Positivität bei der Chemilumineszenzmethode auf 20 CU/ml festgelegt.

8. Datenanalyse Primärer Endpunkt: Anteil positiver Anti-MBG-Antikörper, wird in jeder Gruppe (mit und ohne Lupusnephritis) durch einen Chi-2-Test oder einen exakten Fisher-Test (je nach Gültigkeitsbedingungen des Tests) geschätzt.

Sekundärer Endpunkt: klinische, serologische und renale Merkmale von Anti-GBM-positiven Patienten werden mit negativen verglichen, wobei Tests verwendet werden, die an die Verteilung jeder Variablen angepasst sind.

9. Erwartete Ergebnisse und Zukunftsaussichten

• Wir erwarten eine höhere Häufigkeit positiver zirkulierender Anti-GBM-Antikörper bei Patienten mit LN im Vergleich zur SLE-Kontrollgruppe und zur gesunden Kontrollgruppe.
• Unabhängig davon, ob diese Forschung positiv war, könnte eine weitere größere Studie das Interesse von Anti-GBM-Antikörpern als prädiktiver Biomarker für LN und als prognostischer Biomarker für SLE zeigen.