Az anti-glomeruláris alapmembrán antitestek (Anti-GBM) kimutatása: ígéretes biomarker a lupus nephritis (LN) számára? (GOODLUPUS)

Bevezetés és kontextus:

Glomerulonephritis és autoimmun betegségek gyakran társulnak. A lupus nephritis (LN) a szisztémás lupus erythematosus (SLE) egyik fő klinikai megnyilvánulása, amely súlyosan befolyásolja a prognózist. Ez a szövődmény valódi kihívást jelent a klinikusok számára, mert alattomosan kezdődik, és nincsenek kiszámítható visszaesések. A biomarkerek használata ezért elengedhetetlen, de a hagyományos biomarkerek, mint például a proteinuria, a glomeruláris filtrációs ráta, a vizelet üledékek, az anti-dsDNS antitestek és a komplementszintek gyenge érzékenységgel és alacsony specifitásúak az LN előfordulásának előrejelzésében, valamint az új, megbízhatóbb biomarkerek (például genetikai, epigenetikai) vagy fehérje biomarkerek) nehezen használhatók a napi orvosi gyakorlatban, .

Az anti-glomeruláris membrán alapbetegség (anti-GBM betegség) egy ritka (0,5-1/millió lakos, ) és súlyos betegség, amelyet gyorsan progresszív glomerulonephritis, tüdővérzés és anti-GBM antitestek jelenléte jellemez. érzékelhető (100%) és specifikus (92-100%).

Belgyógyászati ​​osztályunkon egy aktív SLE-vel összefüggő Goodpasture glomerulonephritis esetet jelentettek, és az irodalmi adatok után kutatva a következő tanulmányokat jegyezzük fel:

• néhány hasonló esetről számoltak be, például tüdővérzésről és pozitív anti-GBM-ről SLE-ben, vagy anti-GBM betegségről és tüdő-vese szindrómában jelentkező LN-ről.
• 2006-ban egy kínai kohorsz vizsgálat rámutatott az anti-GBM antitestek megnövekedett prevalenciájára az SLE-ben szenvedő betegek szérummintáiban (14 pozitív/157 beteg (8,9%) ELISA módszerrel). Ezenkívül minden pozitív anti-GMB antitesttel rendelkező betegnek volt LN és súlyosabb SLE-je (több vérszegénységgel, tüdővérzéssel). Fontosabb vesebetegségben is szenvedtek. Valójában a szövettani kritériumok szerint 10/14-nél nekrotizáló félholdas glomerulonephritis léziók, 14-ből pedig Goodpasture-kór valódi diagnózisa volt.

• Azt is megjegyezzük, hogy egyes szerzők már tanulmányozták ennek az összefüggésnek a patogenezisét (akár immunológiai magyarázatokat, genetikai kapcsolatokat, ).

  3. Fő hipotézis: Ezen eredmények alapján azt gyanítjuk, hogy a pozitív keringő anti-GBM antitestek kimutatása gyakrabban lehet pozitív az SLE-vel követett betegekben (mint az általános populációban), és érdekes szűrési biomarker lehet az LN-re.

  4. Célkitűzések Első célkitűzés: 2 SLE-s betegcsoport (egyik lupus nephritisben, egy másik anélkül) alapján szeretnénk összehasonlítani a pozitív anti-GBM antitestek arányát az egyes csoportokban, magasabb arányt várva az LN-ben szenvedő SLE-s betegekben.

Második cél: pozitív anti-GBM betegek vizsgálata klinikai vonatkozásukban, szerológiai jellemzőikben és vese jellemzőikben ebben az SLE populációban.

5. Anyagok és módszerek Retrospektív analitikus transzverzális kontrollált vizsgálatot javasolunk, amely a Felső-Rajnai Lupus Biobank (LBBR projekt) szérummintáin és egészséges önkéntes véradók szérummintáin (kontrollcsoport) alapul.

Az LBBR Lupus Biobank használatát illetően projektünket a tudományos bizottság már elfogadta.

A csoportos randomizálást követően a Cryo-konzervált SLE szérummintákat speciális transzporterszolgálattal továbbítják a Strasbourg Biobankból a Reims Egyetemi Kórház központjában található immunológiai laboratóriumi osztályra, ahol anti-GBM teszteket végeznek.

Az egészséges szérumminta toborzásával kapcsolatban a Reims-i Regionális Vérközpont szisztematikusan javasolni fogja az önkéntes véradók részvételét. Ha beleegyeznek, kibővített tájékoztatást kapnak a vizsgálatról, majd írásos beleegyezést követően csőmintát vesznek.

6. Populáció A statisztikai számítások alapján 200 SLE szérumra volt szükség (100 beteg minden csoportban). Így 100 lupus nephritisben nem szenvedő lupus biobank LBBR-beteg szérummintáját, valamint szisztémás lupus erythematosusban és lupus nephritisben szenvedő betegek 100 szérummintáját fogjuk használni.

Az önkéntes véradók 100 szérummintáját is felhasználjuk.

7. Kísérleti projekt Az anti-GBM antitestek kimutatása a szérumokban automatizált kemilumineszcens módszerrel, kereskedelmi forgalomban kapható tesztkészlettel történik. Pozitivitás esetén ugyanazt a szérumot másodszor is tesztelik az eredmény megerősítésére, majd egy másik módszerrel, indirekt immunfluoreszcenciával (IIF) ellenőrzik a főemlős vese fagyasztott metszeteiben, lefedve egy BIOCHIP tárgylemez reakcióterületeit (referencia módszer).

Immunológiai laboratóriumunk szerint betegenként 600μl szérumra van szükségünk ahhoz, hogy minden vizsgálatot elvégezhessünk. A gyártó utasítása szerint a kemilumineszcenciás módszerben a pozitivitás optimális határértéke 20 CU/mL lesz.

8. Adatelemzés Elsődleges végpont: a pozitív anti-MBG antitestek aránya minden csoportban (lupus nephritisszel és anélkül) Chi-2 teszttel vagy Fisher pontos teszttel (a teszt érvényességi feltételeitől függően) megbecsülésre kerül.

Másodlagos végpont: az anti-GBM-pozitív betegek klinikai, szerológiai és vese jellemzőit a negatívakkal kell összehasonlítani, az egyes változók eloszlásához igazított tesztek segítségével.

9. Várható eredmények és jövőbeli kilátások

• Arra számítunk, hogy az LN-ben szenvedő betegeknél magasabb a keringő pozitív anti-GBM antitestek gyakorisága, mint az SLE kontrollcsoportban és az egészséges kontrollcsoportban.
• Függetlenül attól, hogy ez a kutatás pozitív volt, egy másik nagyobb tanulmány kimutathatja az anti-GBM antitestek érdeklődését az LN prediktív biomarkereként és az SLE prognosztikai biomarkereként.