Påvisning av anti-glomerulære kjellermembranantistoffer (Anti-GBM): en lovende biomarkør for lupus nefritis (LN)? (GOODLUPUS)

Introduksjon og kontekst:

Glomerulonefritt og autoimmune sykdommer er ofte assosiert. Lupus nefritis (LN) er en av de viktigste kliniske manifestasjonene av systemisk lupus erythematosus (SLE) som har en alvorlig innvirkning på prognosen. Denne komplikasjonen er en reell utfordring for klinikere på grunn av snikende utbrudd og ingen forutsigbare tilbakefall. Biomarkørbruk er derfor viktig, men konvensjonelle biomarkører som proteinuri, glomerulær filtrasjonshastighet, urinsedimenter, anti-dsDNA-antistoffer og komplementnivåer, har dårlig sensitivitet og lav spesifisitet for å forutsi LN-forekomst, og nye mer pålitelige biomarkører (som genetiske, epigenetiske). eller proteinbiomarkører) er vanskelige å bruke for daglig medisinsk praksis.

Anti-glomerulær membranbasal sykdom (anti-GBM-sykdom) er en sjelden (0,5 til 1/millioner av innbyggere) og alvorlig sykdom, kjennetegnet ved raskt progressiv glomerulonefritt, lungeblødning og tilstedeværelsen av anti-GBM-antistoffer, som er sterkt progressive. fornuftig (100%) og spesifikk (92-100%) av denne tilstanden.

I vår avdeling for indremedisin er det rapportert ett tilfelle av Goodpasture glomerulonephritis assosiert med en aktiv SLE, og etter å ha søkt data i litteratur, noterer vi oss følgende studier:

• noen lignende tilfeller ble rapportert, for eksempel et tilfelle av lungeblødning og positiv anti-GBM i SLE, eller et tilfelle av anti-GBM-sykdom og LN som viser seg som pulmonal-nyresyndrom.
• I 2006 fremhevet en kinesisk kohortstudie en forhøyet prevalens av anti-GBM-antistoffer, i serumprøver fra pasienter med SLE (14 positive/157 pasienter (8,9%) med ELISA-metoden). Dessuten hadde hver pasient med positive anti-GMB-antistoffer LN og en alvorligere SLE (med flere anemier, lungeblødninger). De led også av viktigere nyresykdom. Faktisk, i histologiske kriterier, hadde 10/14 nekrotiserende halvmåne glomerulonefritt lesjoner og 5/14 hadde en reell diagnose av Goodpasture sykdom.

• Vi legger også merke til at noen forfattere allerede har studert patogenesen til denne assosiasjonen (enten immunologiske forklaringer, genetikkkoblinger, ).

  3. Hovedhypotese: Basert på disse funnene mistenker vi at påvisning av positive sirkulerende anti-GBM-antistoffer kan være hyppigere positive hos pasienter som følges av SLE (enn i den generelle befolkningen), og at det kan være en interessant screeningbiomarkør for LN.

  4. Mål Første mål: basert på 2 SLE-pasientgrupper (en med lupus nefritis og en annen uten) ønsker vi å sammenligne forholdet mellom positive anti-GBM-antistoffer i hver gruppe, og forventer en høyere rate hos SLE-pasienter med LN.

Andre mål: å studere positive anti-GBM-pasienter i deres kliniske aspekter, serologiske egenskaper og nyrekarakteristikker, i denne SLE-populasjonen.

5. Materialer og metoder Vi foreslår en retrospektiv analytisk transversal kontrollert studie, basert på serumprøver fra Lupus Biobank of Upper Rhine (LBBR-prosjektet), og på serumprøver fra friske frivillige blodgivere (kontrollgruppe).

Når det gjelder bruken av LBBR Lupus Biobank, har prosjektet vårt allerede blitt akseptert av vitenskapelig komité.

Etter grupperandomisering vil Cryo-konserverte SLE-serumprøver overføres av spesialisert transportørtjeneste, fra Strasbourg biobank, til immunologisk laboratorieavdeling i Reims Universitetssykehussenter, for å utføre anti-GBM-tester.

Når det gjelder rekruttering av friske serumprøver, vil det regionale blodsenteret i Reims systematisk foreslå frivillige blodgivere å delta. Hvis de samtykker, vil de motta en utvidet informasjon om studien, og etter skriftlig samtykke vil det bli tatt en rørprøve.

6. Populasjon Den statistiske beregningen førte til behov for 200 SLE-sera (100 pasienter i hver gruppe). Dermed vil vi bruke: 100 serumprøver fra lupus biobank LBBR pasienter uten lupus nefritis, og 100 serumprøver av pasienter med systemisk lupus erythematosus og lupus nefritis.

Vi vil også bruke 100 serumprøver av frivillige blodgivere.

7. Eksperimentelt prosjekt Påvisning av anti-GBM antistoffer i serum vil bli utført ved hjelp av en automatisert kjemiluminescerende metode, ved bruk av et kommersielt testsett. I tilfelle positivitet vil samme serum bli testet andre gang for å bekrefte resultatet, og deretter kontrolleres med en annen metode ved bruk av indirekte immunfluorescens (IIF) i frosne deler av primatenyre, som dekker reaksjonsområdene til et BIOCHIP-objektglass (referansemetode).

I følge vår immunologiske laboratorieavdeling trenger vi 600μl serum per pasient for å kunne utføre alle testene. I henhold til produsentens instruksjoner vil den optimale grenseverdien for positivitet i kjemiluminescensmetoden settes til 20CU/ml.

8. Dataanalyse Primært endepunkt: andel positive anti-MBG-antistoffer, vil bli estimert i hver gruppe (med og uten lupus nefritis) ved en Chi-2-test eller en eksakt test av Fisher (avhengig av testvaliditetsforhold).

Sekundært endepunkt: kliniske, serologiske og renale trekk hos anti-GBM-positive pasienter, vil bli sammenlignet med negative, ved bruk av tester tilpasset fordelingen av hver variabel.

9. Forventede resultater og fremtidsutsikter

• Vi forventer en høyere frekvens av positive sirkulerende anti-GBM-antistoffer hos pasienter med LN sammenlignet med SLE-kontrollgruppen og frisk kontrollgruppe.
• Hvorvidt denne forskningen var positiv, kan en annen større studie vise interessen til anti-GBM-antistoffer som en prediktiv biomarkør for LN, og som en prognostisk biomarkør for SLE.