Detectie van anti-glomerulaire basaalmembraan-antilichamen (anti-GBM): een veelbelovende biomarker voor lupus-nefritis (LN)? (GOODLUPUS)

Inleiding en context:

Glomerulonefritis en auto-immuunziekten worden vaak geassocieerd. Lupus nefritis (LN) is een van de belangrijkste klinische manifestaties van systemische lupus erythematosus (SLE) die een ernstige invloed hebben op de prognose. Deze complicatie is een echte uitdaging voor clinici vanwege het sluipende begin en het ontbreken van voorspelbare terugvallen. Het gebruik van biomarkers is daarom essentieel, maar conventionele biomarkers zoals proteïnurie, glomerulaire filtratiesnelheid, urinesedimenten, anti-dsDNA-antilichamen en complementniveaus hebben een slechte gevoeligheid en lage specificiteit om het optreden van LN te voorspellen, en nieuwe, betrouwbaardere biomarkers (zoals genetische, epigenetische of eiwitbiomarkers) moeilijk toepasbaar zijn in de dagelijkse medische praktijk , .

Antiglomerulaire membraanbasaalziekte (anti-GBM-ziekte) is een zeldzame (0,5 tot 1/miljoen inwoners, ) en ernstige ziekte, die wordt gekenmerkt door snel voortschrijdende glomerulonefritis, longbloeding en de aanwezigheid van anti-GBM-antistoffen, die in hoge mate verstandig (100%) en specifiek (92-100%) van deze aandoening.

Op onze afdeling interne geneeskunde is één geval van Goodpasture glomerulonefritis geassocieerd met een actieve SLE gemeld, en na het zoeken naar gegevens in de literatuur, merken we de volgende onderzoeken op:

• enkele vergelijkbare gevallen werden gemeld, zoals een geval van longbloeding en positieve anti-GBM bij SLE, of een geval van anti-GBM-ziekte en LN die zich presenteert als long-renaal syndroom.
• In 2006 wees een Chinese cohortstudie op een verhoogde prevalentie van anti-GBM-antilichamen in serummonsters van patiënten met SLE (14 positieven/157 patiënten (8,9%) met de ELISA-methode). Bovendien had elke patiënt met positieve anti-GMB-antilichamen LN en een ernstigere SLE (met meer bloedarmoede, longbloeding). Ze leden ook aan een belangrijkere nierziekte. Volgens histologische criteria hadden 10/14 zelfs necrotiserende crescentische glomerulonefritis-laesies en 5/14 hadden een echte diagnose van de ziekte van Goodpasture.

• We merken ook op dat sommige auteurs de pathogenese van deze associatie al hebben bestudeerd (of het nu gaat om immunologische verklaringen, genetische links,).

  3. Hoofdhypothese: Op basis van deze bevindingen vermoeden we dat de detectie van positieve circulerende anti-GBM-antilichamen mogelijk vaker positief is bij SLE-gevolgde patiënten (dan bij de algemene bevolking) en dat het een interessante screeningsbiomarker voor LN zou kunnen zijn.

  4. Doelstellingen Eerste doelstelling: op basis van 2 SLE-patiëntengroepen (een met lupus nefritis en een andere zonder lupus nefritis) willen we de verhouding van positieve anti-GBM-antilichamen in elke groep vergelijken, waarbij we een hoger percentage verwachten bij SLE-patiënten met LN.

Tweede doelstelling: het bestuderen van positieve anti-GBM-patiënten in hun klinische aspecten, serologische kenmerken en nierkenmerken, in deze SLE-populatie.

5. Materialen en methoden Wij stellen een retrospectieve analytische transversaal gecontroleerde studie voor, gebaseerd op serummonsters van de Lupus Biobank van de Bovenrijn (LBBR-project) en op serummonsters van gezonde vrijwillige bloeddonoren (controlegroep).

Wat betreft het gebruik van LBBR Lupus Biobank, ons project is al geaccepteerd door de wetenschappelijke commissie.

Na groepsrandomisatie zullen Cryo-geconserveerde SLE-serummonsters door een gespecialiseerde transportdienst van de biobank in Straatsburg worden overgebracht naar de afdeling immunologielaboratorium in het centrum van het Universitair Ziekenhuis van Reims, om anti-GBM-testen uit te voeren.

Wat betreft de rekrutering van gezonde serummonsters, zal het Regionaal bloedcentrum van Reims systematisch voorstellen aan vrijwillige bloeddonoren om deel te nemen. Als ze akkoord gaan, krijgen ze uitgebreide informatie over het onderzoek en wordt er na schriftelijke toestemming een buismonster afgenomen.

6. Populatie De statistische berekening leidde tot de behoefte aan 200 SLE-sera (100 patiënten in elke groep). We zullen dus gebruiken: 100 serummonsters afkomstig van lupus biobank LBBR-patiënten zonder lupus nefritis, en 100 serummonsters van patiënten met systemische lupus erythematosus en lupus nefritis.

We zullen ook 100 serummonsters van vrijwillige bloeddonoren gebruiken.

7. Experimenteel project De detectie van anti-GBM-antilichamen in serums zal gebeuren door middel van een geautomatiseerde chemiluminescentiemethode, gebruikmakend van een commerciële testkit. In geval van positiviteit wordt hetzelfde serum een ​​tweede keer getest om het resultaat te bevestigen, en vervolgens gecontroleerd door een andere methode met behulp van indirecte immunofluorescentie (IIF) in bevroren delen van de nier van primaten, die de reactiegebieden van een BIOCHIP-objectglaasje bedekken (referentiemethode).

Volgens onze laboratoriumafdeling immunologie hebben we 600μl serum per patiënt nodig om alle testen te kunnen uitvoeren. Volgens de instructies van de fabrikant wordt de optimale afkapwaarde voor positiviteit bij de chemiluminescentiemethode vastgesteld op 20CU/mL.

8. Gegevensanalyse Primair eindpunt: percentage positieve anti-MBG-antilichamen, zal in elke groep (met en zonder lupus nefritis) worden geschat door middel van een Chi-2-test of een exacte test van Fisher (afhankelijk van de validiteitsvoorwaarden van de test).

Secundair eindpunt: klinische, serologische en renale kenmerken van anti-GBM-positieve patiënten zullen worden vergeleken met negatieven, met behulp van tests die zijn aangepast aan de verdeling van elke variabele.

9. Verwachte resultaten en toekomstperspectieven

• We verwachten een hogere frequentie van positieve circulerende anti-GBM-antilichamen bij patiënten met LN in vergelijking met de SLE-controlegroep en de gezonde controlegroep.
• Of dit onderzoek positief was, een ander groter onderzoek zou de interesse van anti-GBM-antilichamen kunnen aantonen als een voorspellende biomarker van LN en als een prognostische biomarker van SLE.