Détection des anticorps anti-membrane basale glomérulaire (Anti-GBM) : un biomarqueur prometteur pour la néphrite lupique (LN) ? (GOODLUPUS)

Présentation et contexte :

Glomérulonéphrite et maladies auto-immunes sont souvent associées. La néphrite lupique (LN) est l'une des principales manifestations cliniques du lupus érythémateux disséminé (LES) qui a un impact sévère sur le pronostic. Cette complication est un véritable défi pour les cliniciens en raison de son apparition insidieuse et de ses rechutes non prévisibles. L'utilisation de biomarqueurs est donc essentielle, mais les biomarqueurs conventionnels tels que la protéinurie, le taux de filtration glomérulaire, les sédiments urinaires, les anticorps anti-dsDNA et les niveaux de complément, ont une faible sensibilité et une faible spécificité pour prédire l'apparition de LN, et de nouveaux biomarqueurs plus fiables (tels que génétiques, épigénétiques ou biomarqueurs protéiques) sont difficilement utilisables en pratique médicale quotidienne , .

La maladie de la membrane basale anti-glomérulaire (maladie anti-GBM) est une maladie rare (0,5 à 1/million d'habitants , ) et grave , , caractérisée par une glomérulonéphrite rapidement évolutive, une hémorragie pulmonaire et la présence d'anticorps anti-GBM, qui sont hautement sensible (100 %) et spécifique (92-100 %) de cette condition .

Dans notre service de médecine interne, un cas de glomérulonéphrite de Goodpasture associée à un LES actif a été rapporté, et après recherche de données dans la littérature, nous relevons les études suivantes :

• certains cas similaires ont été signalés, comme un cas d'hémorragie pulmonaire et un anti-GBM positif dans le LED , ou un cas de maladie anti-GBM et de LN se présentant comme un syndrome pneumo-rénal .
• En 2006, une étude de cohorte chinoise a mis en évidence une prévalence élevée d'anticorps anti-GBM, dans des échantillons de sérum de patients atteints de LES (14 positifs/157 patients (8,9 %) avec la méthode ELISA). De plus, chaque patient avec des anticorps anti-GMB positifs avait un LN et un LED plus sévère (avec plus d'anémies, d'hémorragies pulmonaires). Ils souffraient également d'une maladie rénale plus importante. En effet, sur les critères histologiques, 10/14 avaient des lésions nécrosantes de glomérulonéphrite à croissants et 5/14 avaient un véritable diagnostic de maladie de Goodpasture.

• Notons également que certains auteurs ont déjà étudié la pathogenèse de cette association (qu'il s'agisse d'explications immunologiques, de liens génétiques, ).

  3. Hypothèse principale : Sur la base de ces résultats, nous soupçonnons que la détection d'anticorps anti-GBM circulants positifs pourrait être plus fréquemment positive chez les patients suivis par le LES (que dans la population générale) et qu'il pourrait s'agir d'un biomarqueur de dépistage intéressant pour la LN.

  4. Objectifs Premier objectif : sur la base de 2 groupes de patients lupiques (l'un ayant une néphrite lupique et l'autre sans maladie), nous souhaitons comparer le ratio d'anticorps anti-GBM positifs dans chaque groupe, en nous attendant à un taux plus élevé chez les patients lupiques atteints de LN.

Deuxième objectif : étudier les patients anti-GBM positifs dans leurs aspects cliniques, sérologiques et rénaux, dans cette population de LES.

5. Matériels et méthodes Nous proposons une étude rétrospective analytique transversale contrôlée, basée sur des échantillons de sérum de la Biobanque Lupus du Rhin Supérieur (projet LBBR), et sur des échantillons de sérum de donneurs de sang volontaires sains (groupe contrôle).

Concernant l'utilisation de la LBBR Lupus Biobank, notre projet a déjà été accepté par le comité scientifique.

Après randomisation du groupe, les échantillons de sérum de LED cryoconservés seront transférés par un service de transport spécialisé, de la biobanque de Strasbourg, au service de laboratoire d'immunologie du CHU de Reims, pour effectuer des tests anti-GBM.

Concernant le recrutement d'échantillons de sérum sain, la Centrale régionale du sang de Reims proposera systématiquement aux donneurs de sang volontaires de participer. S'ils sont d'accord, ils recevront une information détaillée sur l'étude, et après consentement écrit, un échantillon de tube sera prélevé.

6. Population Le calcul statistique a conduit à la nécessité de 200 sérums LED (100 patients dans chaque groupe). Ainsi, nous utiliserons : 100 échantillons de sérum provenant de patients LBBR de la biobanque lupique sans néphrite lupique, et 100 échantillons de sérum de patients atteints de lupus érythémateux disséminé et de néphrite lupique.

Nous utiliserons également 100 échantillons de sérum de donneurs de sang volontaires.

7. Projet expérimental La détection des anticorps anti-GBM dans les sérums sera réalisée par une méthode automatisée de chimiluminescence, en utilisant un kit de test commercial. En cas de positivité, le même sérum sera testé une deuxième fois pour confirmer le résultat, puis contrôlé par une autre méthode utilisant l'immunofluorescence indirecte (IIF) dans des coupes congelées de rein de primate, couvrant les zones de réaction d'une lame BIOCHIP (méthode de référence).

Selon notre service de laboratoire d'immunologie, nous avons besoin de 600μl de sérum par patient pour pouvoir réaliser tous les tests. Selon les instructions du fabricant, la valeur seuil optimale pour la positivité dans la méthode de chimioluminescence sera fixée à 20 CU/mL.

8. Analyse des données Critère principal : proportion d'anticorps anti-MBG positifs, sera estimée dans chaque groupe (avec et sans néphrite lupique) par un test du Chi-2 ou un test exact de Fisher (selon les conditions de validité du test).

Critère secondaire : les caractéristiques cliniques, sérologiques et rénales des patients positifs aux anti-GBM, seront comparées aux négatifs, à l'aide de tests adaptés à la distribution de chaque variable.

9. Résultats attendus et perspectives d'avenir

• Nous nous attendons à une fréquence plus élevée d'anticorps anti-GBM circulants positifs chez les patients atteints de LN par rapport au groupe témoin LED et au groupe témoin sain.
• Que cette recherche soit positive, une autre étude plus large pourrait montrer l'intérêt des anticorps anti-GBM comme biomarqueur prédictif du LN, et comme biomarqueur pronostique du LES.