Detección de anticuerpos anti-membrana basal glomerular (Anti-GBM): ¿un biomarcador prometedor para la nefritis lúpica (NL)? (GOODLUPUS)

Introducción y contexto:

A menudo se asocian glomerulonefritis y enfermedades autoinmunes. La nefritis lúpica (NL) es una de las principales manifestaciones clínicas del lupus eritematoso sistémico (LES) que tiene un impacto severo en el pronóstico. Esta complicación es un verdadero desafío para los médicos debido al inicio insidioso y las recaídas no predecibles. Por lo tanto, el uso de biomarcadores es esencial, pero los biomarcadores convencionales, como la proteinuria, la tasa de filtración glomerular, los sedimentos urinarios, los anticuerpos anti-dsDNA y los niveles de complemento, tienen poca sensibilidad y baja especificidad para predecir la aparición de NL, y los nuevos biomarcadores más confiables (como los genéticos, epigenéticos o biomarcadores proteicos) son de difícil aplicación en la práctica médica diaria , .

La enfermedad anti-membrana basal glomerular (enfermedad anti-GBM) es una enfermedad rara (0,5 a 1/millones de habitantes) y grave, caracterizada por glomerulonefritis rápidamente progresiva, hemorragia pulmonar y la presencia de anticuerpos anti-GBM, que son altamente sensible (100%) y específico (92-100%) de esta condición.

En nuestro servicio de medicina interna se ha comunicado un caso de glomerulonefritis de Goodpasture asociada a LES activo, y tras buscar datos en la literatura, destacamos los siguientes estudios:

• se informaron algunos casos similares, como un caso de hemorragia pulmonar y anti-GBM positivo en LES, o un caso de enfermedad anti-GBM y NL que se presentó como síndrome pulmonar-renal.
• En 2006, un estudio de cohorte chino destacó una prevalencia elevada de anticuerpos anti-GBM en muestras de suero de pacientes con LES (14 positivos/157 pacientes (8,9%) con el método ELISA). Además, todos los pacientes con anticuerpos anti-GMB positivos tenían NL y LES más severo (con más anemias, hemorragia pulmonar). También padecían una enfermedad renal más importante. De hecho, en los criterios histológicos, 10/14 tenían lesiones de glomerulonefritis semilunar necrotizante y 5/14 tenían un diagnóstico real de enfermedad de Goodpasture.

• También notamos que algunos autores ya han estudiado la patogenia de esta asociación (ya sean explicaciones inmunológicas, vínculos genéticos, etc.).

  3. Hipótesis principal: en base a estos hallazgos, sospechamos que la detección de anticuerpos anti-GBM circulantes positivos puede ser más frecuentemente positiva en pacientes con LES seguidos (que en la población general) y que podría ser un biomarcador de detección interesante para NL.

  4. Objetivos Primer objetivo: en base a 2 grupos de pacientes con LES (uno con nefritis lúpica y otro sin ella) nos gustaría comparar la proporción de anticuerpos anti-GBM positivos en cada grupo, esperando una tasa mayor en pacientes con LES con NL.

Segundo objetivo: estudiar a los pacientes anti-GBM positivos en sus aspectos clínicos, características serológicas y características renales, en esta población de LES.

5. Materiales y métodos Sugerimos un estudio controlado transversal analítico retrospectivo, basado en muestras de suero del Lupus Biobank of Upper Rhine (proyecto LBBR), y en muestras de suero de donantes de sangre voluntarios sanos (grupo control).

En cuanto al uso de LBBR Lupus Biobank, nuestro proyecto ya ha sido aceptado por el comité científico.

Después de la aleatorización grupal, las muestras de suero de LES crioconservadas serán transferidas por un servicio de transporte especializado, desde el biobanco de Estrasburgo, al departamento de laboratorio de inmunología en el centro del Hospital Universitario de Reims, para realizar pruebas anti-GBM.

Con respecto al reclutamiento de muestras de suero saludable, el centro regional de sangre de Reims sugerirá sistemáticamente a los donantes de sangre voluntarios que participen. Si están de acuerdo, recibirán información ampliada sobre el estudio y, después del consentimiento por escrito, se recolectará una muestra del tubo.

6. Población El cálculo estadístico llevó a la necesidad de 200 sueros LES (100 pacientes en cada grupo). Así, utilizaremos: 100 muestras de suero provenientes de pacientes LBBR del biobanco de lupus sin nefritis lúpica, y 100 muestras de suero de pacientes con lupus eritematoso sistémico y nefritis lúpica.

También utilizaremos 100 muestras de suero de donantes voluntarios de sangre.

7. Proyecto experimental La detección de anticuerpos anti-GBM en sueros se realizará mediante un método quimioluminiscente automatizado, utilizando un kit de prueba comercial. En caso de positividad, se analizará el mismo suero por segunda vez para confirmar el resultado, y luego se controlará por otro método usando inmunofluorescencia indirecta (IIF) en secciones congeladas de riñón de primate, cubriendo las áreas de reacción de un portaobjetos BIOCHIP (método de referencia).

Según nuestro departamento de laboratorio de inmunología, necesitamos 600μl de suero por paciente para poder realizar todas las pruebas. De acuerdo con las instrucciones del fabricante, el valor de corte óptimo para la positividad en el método de quimioluminiscencia se establecerá en 20 CU/mL.

8. Análisis de datos Variable principal: proporción de anticuerpos anti-MBG positivos, se estimará en cada grupo (con y sin nefritis lúpica) mediante una prueba de Chi-2 o una prueba exacta de Fisher (dependiendo de las condiciones de validez de la prueba).

Punto final secundario: las características clínicas, serológicas y renales de los pacientes positivos para anti-GBM se compararán con los negativos, utilizando pruebas adaptadas a la distribución de cada variable.

9. Resultados esperados y perspectivas de futuro

• Esperamos una mayor frecuencia de anticuerpos anti-GBM circulantes positivos en pacientes con NL en comparación con el grupo de control con LES y el grupo de control sano.
• Si esta investigación fue positiva, otro estudio más grande podría mostrar el interés de los anticuerpos anti-GBM como biomarcador predictivo de NL y como biomarcador pronóstico de LES.