Klinische Merkmale der interstitiellen Pneumonie mit Autoimmunmerkmalen (IPAF) – eine multizentrische prospektive Studie

Folgende Patientengruppen werden untersucht:

1. Studiengruppe - IPAF.

2. Kontrollgruppen:

   1. Patienten mit interstitieller Lungenerkrankung (CTD-ILD), assoziiert mit Bindegewebserkrankungen: .rheumatoid Arthritis – RA, systemische Sklerose – SSc, Polymyositis – PM, Dermatomyositis – DM, (Anti-Synthetase-Syndrom – AS, Sjögren-Syndrom – SjS, Mischkollagenosen – MCTD, systemischer Lupus erythematodes – SLE, diagnostiziert nach diagnostischen Kriterien herausgegeben von Europäische Liga gegen Rheumatismus (EULAR) und/oder American College of Rheumatology (ACR)

   2. Gruppe der idiopathischen interstitiellen Pneumonie: idiopathische Lungenfibrose - IPF, unspezifische interstitielle Pneumonie - NSIP, kryptogene organisierende Pneumonie - COP, akute interstitielle Pneumonie - AIP; respiratorische Bronchiolitis assoziierte interstitielle Lungenerkrankung – RB-ILD, desquamative interstitielle Pneumonie – DIP, lymphozytäre interstitielle Pneumonie – LIP).

      Methoden Die Patienten werden von einem Pneumologen und Rheumatologen untersucht. Fragebögen zu klinischen Symptomen, Begleiterkrankungen und deren Behandlung, Krankheitsaktivität werden erfüllt.

      Die meisten diagnostischen Tests und Verfahren werden routinemäßig während der klinischen Behandlung durchgeführt.

      Die Studie wird in 2 Phasen unterteilt:

      1. Phase 1 - Besuch 1
      2. Phase 2 - Beobachtung ausgewählter Probanden von Besuch 1 bis 5

      Phase 1:

      30 Patienten, die die Zulassungskriterien erfüllen, einschließlich Personen mit langer Krankengeschichte und derzeit in Behandlung wegen interstitieller Lungenerkrankung/Autoimmunerkrankung, werden in jedem klinischen Zentrum für die Studie rekrutiert, insgesamt bis zu:

      • 210 Patienten in der IPAF-Gruppe
      • 210 Patienten in der CTD-ILD-Gruppe
      • 210 Patienten in der IIP-Gruppe

      Phase 2 Nur neu diagnostizierte Patienten (Personen, bei denen zuvor noch keine interstitielle Lungenerkrankung diagnostiziert wurde und bei denen eine solche Diagnose in Phase 1 der Studie gestellt wurde) werden für diese Phase rekrutiert. Aufgrund des seltenen Auftretens kann die Rekrutierungsphase bis zu 36 Monate dauern.

      Die Gesamtzahl der Patienten wird

      • 70 in der IPAF-Gruppe
      • 70 in der CTD-ILD-Gruppe (RA, SSc, PM, DM)
      • 70 in der IIP-Gruppe (35 mit IPF und 35 mit NSIP, COP und LIP)

      Besuch 1:

      • Die folgenden Tests und Verfahren werden durchgeführt:

      • Ausführliche Anamneseerhebung durch „Besuch 1 Fragebogen“ [Nicht-Routineverfahren]
      • Lungenfunktionstests (Spirometrie mit Reversibilitätstest, Plethysmographie, Diffusionslungenkapazität für Kohlenmonoxid) [Routineverfahren]. Absolutwert und % des Referenzwerts werden bewertet.

      FEV1 – forciertes Exspirationsvolumen in 1 Sekunde FVC – forcierte Vitalkapazität VC – Vitalkapazität FEV1/VC, Verhältnis TLC – Gesamtlungenkapazität, DLCO SB – Kohlenmonoxid-Diffusionskapazität (Einzelatemzug-Methode) ITGV – intrathorakales Gasvolumen RV/TLC – Verhältnis Residualvolumen/ Gesamtlungenkapazität

      • validierte Methoden zur Hustenbeurteilung [Routineverfahren]: Chung-Hustenfragebogen und Visuelle Analogskala (VAS).
      • validierte Methoden zur Dyspnoe-Beurteilung [Routineverfahren]: Likert-Dyspnoe-Fragebogen und modifizierte Borg-Skala.

      Bluttest. Insgesamt werden 30 ml Blut entnommen (15 ml Blut in ein einfaches Mikroröhrchen ohne Antikoagulans und 15 ml Blut in ein Antikoagulations-Mikroröhrchen). Detaillierte Beschreibung unten:

      NT-proBNP, Labortests, die während des Diagnoseprozesses rheumatologischer Erkrankungen und potenzieller IPAF-Marker durchgeführt werden [Routineverfahren]. 15 ml venöses Blut werden abgenommen und in 2 Mikroröhrchen (10 ml und 5 ml) ohne Antikoagulans aufgeteilt. 10 ml Mikroröhrchen werden an ein örtliches Labor geschickt, um die Plasmaspiegel von NT-proBNP und den Titer der folgenden Autoantikörper zu messen:

      • Rheumafaktor (RF),
      • Anti-Citrullinierte Protein-Antikörper (ACPA; Anti-CCP),

      • Antinukleäre Antikörper (ANA) (ANA 1-Test als Screening durchgeführt); bei Vorhandensein von ANA und weitere Identifizierung des Färbemusters (z. homogen, gesprenkelt, peripher, nukleolär, Zentromer), werden weitere Tests durchgeführt (ANA 2 und ANA 3):

        • Anti-dsDNA,
        • Anti-SM,
        • Anti-SS-A (Ro),
        • Anti-SS-B (La),
        • Anti-Scl-70,
        • Anti-RNP,
        • Anti-Jo-1 und Anti-PL-7, Anti-PL12,
        • Anti-Mi-2,
        • Anti-PM-Scl,
        • Anti-MDA5. Aus dem zweiten 5-ml-Mikroröhrchen werden nach Bildung des Gerinnsels ca. 2,5 ml Serum mit einer Pipette entnommen; Serum wird später in 5 Mikroröhrchen vom Eppendorf-Typ (je 0,5 ml) aufgeteilt. Diese Mikroröhrchen sind wie folgt zu beschriften: Anfangsbuchstabe des Patientennamens Anfangsbuchstabe des Nachnamens des Patienten/Geschlecht F oder M/Geburtsdatum TT-MM-JJ/Datum der Probenentnahme TT-MM-JJ, z. AL/K/12.05.45/01.02.18. Die Proben werden bei -70 °C gelagert. Die Proben werden von einem Kurier abgeholt und zu dem für diesen Teil der Studie zuständigen klinischen Zentrum transportiert. Diese Probe wird verwendet, um auf potenzielle IPAF-Marker zu testen, z. Chemokin C-C-Motiv-Ligand 18 (CXCL18), Surfactant Protein A- (SP-A), Surfactant Protein D (SP-D), Krebs von den Lungen-6-Protein (KL-6) und Chitotrisidase 1 (CHIT1) [Nicht-Routine Verfahren].

      Blutprobenentnahme [Verfahren, das nicht routinemäßig während der klinischen Behandlung durchgeführt wird]. 15 ml venöses Vollblut werden entnommen und anschließend in 10 Eppendorf-Röhrchen à 1,5 ml aufgeteilt. Die Röhrchen werden wie oben beschrieben beschriftet. Die Proben werden bei -70 °C gelagert. Die Proben werden zu dem für diesen Teil der Studie zuständigen klinischen Zentrum transportiert.

      Optional werden zusätzliche Tests (Testung auf proteomische und metabolomische Biomarker) in Proben von zuvor gesammeltem biologischem Material (BALF, Serum, Urin [nicht routinemäßiges Verfahren]) durchgeführt.

      o Bronchofiberoskopie mit bronchalveolärer Lavage (BF + BAL), Durchführung einer Biopsie der Bronchialschleimhaut: BF + BAL [Routineverfahren]: Vor Beginn der BF wird eine Regionalanästhesie und Sedierung mit Lidocain und Midazolam gemäß den in angewendeten Anästhesieprotokollen durchgeführt jeweiligen Endoskopieeinheiten. Eine intravenöse Kanüle wird vor BF eingeführt. Während der Endoskopie wird der Patient gemäß den in den jeweiligen Endoskopieeinheiten angewandten Sicherheitsprotokollen überwacht.

      Bronchoalveoläre Lavage wird im Bronchus von der mittleren Robe der rechten Lunge oder der Lingula der linken Lunge (B4, B5) durchgeführt. Die Lokalisierung wird basierend auf den HRCT-Ergebnissen ausgewählt und in der Krankengeschichte des Patienten aufgezeichnet. Sterile Lösung von 0,9% NaCl wird eingeträufelt. 200 ml Flüssigkeit werden mit einer Spritze in Portionen von 25 ml oder 50 ml aufgetragen. Es wird empfohlen, mindestens 60 % der Lavageflüssigkeit wiederzugewinnen.

      Bronchoalveoläre Lavage-Flüssigkeitstest (BALF). Die Anfertigung von mikroskopischen Objektträgern, die Analyse der Zellbestandteile der Probe (Art der am häufigsten entnommenen Zellen, Haltbarkeit der Zellen) wird gemäß einem Standardlaborverfahren (Richtlinien der Polnischen Gesellschaft für Atemwegserkrankungen) durchgeführt. Die Gesamtzellzahl zusammen mit der Haltbarkeit der Zellen wird in einer Probe gemessen, die dem Filtrat oder Material nach dem ersten Zentrifugieren entnommen wird. Cytospin (routinemäßig 10 min bei 1200–2000 U/min) wird verwendet, um das Material vorzubereiten. May-Grunewald-Giemsa-Färbung wird verwendet, um die Objektträger vorzubereiten.

      BALF-Proben werden gesichert und gelagert, um auf potenzielle IPAF-Marker zu testen. 15 ml BALF werden in Eppendorf 1,5 ml Mikroröhrchen aufgeteilt und dann bei -70 C gelagert. Die Proben werden auf die Konzentration von S1009A-Protein, Chemokin (C-C-Motiv), Ligand 2 und Chitotrisidase 1 (CHIT 1) überprüft.

      Proben der Bronchialschleimhaut, die während BF entnommen wurden [Verfahren, das nicht routinemäßig während der klinischen Behandlung durchgeführt wird]. 5 Schleimhautproben werden aus dem Anfangssegment des Mittellappenbronchus entnommen, in Eppendorf-Mikroröhrchen gegeben und bei -80 °C gelagert. Die Probe wird zur histopathologischen Beurteilung eingeschickt.

      • 6-Minuten-Gehtest – (6 MWT), durchgeführt gemäß einem Protokoll, das in den jeweiligen klinischen Zentren angewendet wird [Routineverfahren]. Folgende Daten sollten erfasst werden:

        • Ob der Patient den Test abgeschlossen hat. Wenn 6MWT unterbrochen wurde, sollte der Grund aufgezeichnet werden (z. B. Dyspnoe, Bluthochdruck, Herzrhythmusstörungen, Schaufensterkrankheit, andere)

        • Entfernung in Metern

        • Pulsoximetrie gemessen vor und direkt nach dem Test
        • Dyspnoe-Messung – Borg-Skala
      • Hochauflösende Computertomographie (HRCT) [Routineverfahren]. Aktuelle Tomographie, die gemäß dem in den jeweiligen klinischen Zentren angewendeten Protokoll durchgeführt wird, oder CT 6 Monate vor der Studie sind förderfähig. Es werden Testergebnisse (auf CD gespeichert) und eine radiologische Beschreibung verwendet. Die CD wird wie oben beschrieben beschriftet. Zur Auswertung der Scans wird die Software OsiriX Lite verwendet. Die folgenden densitometrischen Werte werden gemessen: mittlere Lungenschwächung (MLA), Kurtosis, Schiefe und Standardabweichung der Röntgendichte der Lunge (SD I.R). Die Datenanalyse wird mit der Statistica-Software durchgeführt. Die Daten werden als Median- und Interquartilbereiche (IQR) dargestellt. Quantitative Daten werden mit den Post-hoc-Tests von Kruskal-Willis und Dunn analysiert
      • Pulsoximetrie (SpO2) [Routineverfahren]. Wird ein SpO2 < 92 % gemessen oder besteht eine Indikation zur Sauerstofftherapie, wird eine arterielle Blutgasentnahme durchgeführt.
      • Transthorakale Echokardiographie (TTE) [Routineverfahren] mit detaillierter Rechtsherzbeurteilung:

      Pulmonalarteriendurchmesser Beschleunigungszeit (Act) und Lungeninsuffizienz Systolische Geschwindigkeit des Trikuspidalrings Trikuspidalinsuffizienzgeschwindigkeit. Systolische Exkursion der Trikuspidalringplatte (TAPSE) Basaler Durchmesser des rechten Ventrikels (RV), mittlerer RV-Durchmesser und Basis-Spitzen-Abmessung Abmessungen des Zuflusstrakts des rechten Ventrikels Abmessungen des Abflusstrakts des rechten Ventrikels Durchmesser des rechten Ventrikels, gemessen auf Höhe der Pulmonalklappe Volumen des rechten Vorhofs Obere Vene Cava-Dimension Untere Hohlvene-Dimension Wandstärke des rechten Ventrikels (RVWT) o Rheumatologische Beratung aller Patienten in IPAF- und Autoimmunerkrankungsgruppen [Verfahren, das routinemäßig während der klinischen Behandlung durchgeführt wird].

      Qualifikation für Besuch 2–5 – nur Patienten, die für Phase 2 der Studie qualifiziert sind

      Besuch 2:

      • 6 +/- 3 Monate ab Besuch 1:

      • Besuch 1-5 Fragebogen [nicht routinemäßiges Verfahren]
      • Lungenfunktionstests [Routineverfahren]
      • 6MWT [Routineverfahren]
      • Pulsoximetrie [Routineverfahren]

      Besuch 3:

      • 12 +/- 3 Monate ab Besuch 1:

      • Besuch 1-5 Fragebogen [nicht routinemäßiges Verfahren]
      • Lungenfunktionstests [Routineverfahren]
      • 6MWT [Routineverfahren]
      • HRCT [Routineverfahren]
      • Blutuntersuchung (Basislaboruntersuchungen [Routineverfahren], Screening auf Autoantikörper und Zytokinkonzentration [Nicht-Routineverfahren]
      • BF + BAL [optional; Routineverfahren]
      • Arterialisiertes kapillares Blutgas [Routineverfahren]
      • TTE mit detaillierter Rechtsherzbeurteilung [Routineverfahren]
      • Rheumatologische Sprechstunde [Routineverfahren]

      Besuch 4:

      • 24 +/- 3 Monate ab Besuch 1:

      • Besuch 1-5 Fragebogen [nicht routinemäßiges Verfahren]
      • Lungenfunktionstests [Routineverfahren]
      • 6MWT [Routineverfahren]
      • HRCT [Routineverfahren]
      • Blutuntersuchung (Basislaboruntersuchungen [Routineverfahren], Screening auf Autoantikörper und Zytokinkonzentration [Nicht-Routineverfahren]
      • BF + BAL (optional; Routineverfahren)
      • Arterialisiertes kapillares Blutgas [Routineverfahren]

      Besuch 5

      • 60 +/- 3 Monate ab Besuch 1

      o Besuch 1-5 Fragebogen [nicht routinemäßiges Verfahren]

      o Lungenfunktionstests [Routineverfahren]

      o 6MWT [Routineverfahren]

      • HRCT [Routineverfahren]
      • Blutuntersuchung (Basislaboruntersuchungen [Routineverfahren], Screening auf Autoantikörper und Zytokinkonzentration [Nicht-Routineverfahren]
      • BF + BAL (optional; Routineverfahren)
      • Arterialisierte kapillare Blutgasuntersuchung [Routineverfahren]
      • TTE mit detaillierter Rechtsherzbeurteilung [Routineverfahren]
      • Rheumatologische Sprechstunde [Routineverfahren]
      • Gegebenenfalls bei klinischer und/oder radiologischer Progression, Verschlechterung der Ergebnisse der Lungenfunktionstests, Criobiopsie. kann nach Einholung der Einwilligung des Patienten wiederholt werden.