Caratteristiche cliniche della polmonite interstiziale con caratteristiche autoimmuni (IPAF) - uno studio prospettico multicentrico

Saranno studiati i seguenti gruppi di pazienti:

1. Gruppo di studio - IPAF.

2. Gruppi di controllo:

   1. Pazienti con malattia del tessuto connettivo associata a malattia polmonare interstiziale (CTD-ILD): .rheumatoid artrite - RA, sclerosi sistemica - SSc, polimiosite - PM, dermatomiosite - DM, (sindrome anti-sintetasi - AS, sindrome di Sjoegren - SjS, malattia mista del tessuto connettivo - MCTD, lupus eritematoso sistemico - LES, diagnosticata secondo criteri diagnostici emessi da European League Against Rheumatism (EULAR) e/o American College of Rheumatology (ACR)

   2. Gruppo polmonite interstiziale idiopatica: fibrosi polmonare idiopatica - IPF, polmonite interstiziale aspecifica - NSIP, polmonite organizzativa criptogenetica - COP, polmonite interstiziale acuta - AIP; bronchiolite respiratoria associata a malattia polmonare interstiziale - RB-ILD, polmonite interstiziale desquamativa - DIP, polmonite interstiziale linfocitica - LIP).

      Metodi I pazienti saranno valutati da uno pneumologo e reumatologo. Saranno soddisfatti i questionari riguardanti i sintomi clinici, le malattie concomitanti e il loro trattamento, l'attività della malattia.

      La maggior parte dei test e delle procedure diagnostiche viene eseguita di routine durante l'assistenza clinica.

      Lo studio si articolerà in 2 fasi:

      1. Fase 1 - visita 1
      2. Fase 2 - osservazione dei soggetti selezionati dalla visita 1 alla 5

      Fase 1:

      30 pazienti che soddisfano i criteri di ammissibilità, inclusi individui con una lunga storia medica e attualmente sottoposti a trattamento per malattia polmonare interstiziale/disturbo autoimmune, verranno reclutati per lo studio in ogni centro clinico, per un totale di:

      • 210 pazienti nel gruppo IPAF
      • 210 pazienti nel gruppo CTD-ILD
      • 210 pazienti nel gruppo IIP

      Fase 2 Solo i pazienti di nuova diagnosi (individui a cui non è stata precedentemente diagnosticata una malattia polmonare interstiziale e tale diagnosi è stata stabilita durante la fase 1 dello studio) saranno reclutati in questa fase. A causa della rara incidenza, la fase di reclutamento può richiedere fino a 36 mesi.

      Il numero totale di pazienti sarà

      • 70 nel gruppo IPAF
      • 70 nel gruppo CTD-ILD (RA, SSc, PM, DM)
      • 70 nel gruppo IIP (35 con IPF e 35 con NSIP, COP e LIP)

      Visita 1:

      • Verranno eseguiti i seguenti test e procedure:

      • Anamnesi dettagliata ottenuta tramite il "questionario visita 1" [procedura non di routine]
      • Test di funzionalità polmonare (spirometria con test di reversibilità, pletismografia, capacità polmonare di diffusione del monossido di carbonio) [procedura di routine]. Verranno valutati il ​​valore assoluto e la % del valore di riferimento.

      FEV1 - Volume espiratorio forzato in 1 secondo FVC - Capacità vitale forzata VC - Capacità vitale FEV1/VC, rapporto TLC - Capacità polmonare totale, DLCO SB - La capacità di diffusione del monossido di carbonio (metodo del respiro singolo) ITGV - volume di gas intratoracico RV/TLC - Rapporto volume residuo/capacità polmonare totale

      • metodi convalidati di valutazione della tosse [procedura di routine]: questionario sulla tosse di Chung e scala analogica visiva (VAS).
      • metodi convalidati di valutazione della dispnea [procedura di routine]: questionario Likert sulla dispnea e scala di Borg modificata.

      Analisi del sangue. In totale verranno prelevati 30 ml di sangue (15 ml di sangue in una microprovetta semplice senza anticoagulante e 15 ml di sangue in una microprovetta per anticoagulanti). Descrizione dettagliata di seguito:

      NT-proBNP, test di laboratorio eseguiti durante il processo diagnostico delle malattie reumatologiche e potenziali marcatori IPAF [procedura di routine]. Verranno prelevati 15 ml di sangue venoso e divisi in 2 microprovette (10 ml e 5 ml) senza anticoagulante. La microprovetta da 10 ml verrà spedita a un laboratorio locale per misurare i livelli plasmatici di NT-proBNP e il seguente titolo di autoanticorpi:

      • fattore reumatoide (RF),
      • Anticorpi proteici anti-citrullinati (ACPA; anti-CCP),

      • Anticorpi Antinucleari (ANA) (test ANA 1 eseguito come screening); in caso di presenza di ANA e ulteriore identificazione del pattern di colorazione (ad es. omogeneo, maculato, periferico, nucleolare, centromerico), verranno eseguiti ulteriori test (ANA 2 e ANA 3):

        • anti-dsDNA,
        • anti-Sm,
        • anti-SS-A (Ro),
        • anti-SS-B (La),
        • anti-Scl-70,
        • anti-RNP,
        • anti-Jo-1 e anti-PL-7, anti-PL12,
        • anti-Mi-2,
        • anti-PM-Scl,
        • anti-MDA5. Dalla seconda microprovetta da 5 ml, dopo la formazione del coagulo, verranno prelevati con una pipetta circa 2,5 ml di siero; il siero verrà successivamente suddiviso in 5 microprovette tipo Eppendorf (0,5 ml ciascuna). Queste microprovette devono essere etichettate secondo quanto segue: prima lettera del nome del paziente- prima lettera del cognome del paziente/ sesso F o M/data di nascita GG-MM-AA/data di prelievo del campione GG-MM-AA, ad es. AL/K/12.05.45/01.02.18. I campioni saranno conservati a -70 °C. I campioni saranno raccolti da un corriere e trasportati al centro clinico responsabile di questa parte dello studio. Questo campione verrà utilizzato per testare potenziali marcatori IPAF, ad es. chemochina C-C motivo ligando 18 (CXCL18), Surfactant Protein A- (SP-A), Surfactant Protein D (SP-D), Krebs von den Lungen-6 protein (KL-6) e chitotrisidase 1 (CHIT1) [non di routine procedura].

      Prelievo di campioni di sangue [procedura non eseguita di routine durante l'assistenza clinica]. Verranno prelevati 15 ml di sangue venoso intero e poi suddivisi in 10 provette Eppendorf da 1,5 ml ciascuna. I tubi saranno etichettati come descritto sopra. I campioni saranno conservati a -70 °C. I campioni saranno trasportati al centro clinico responsabile di questa parte dello studio.

      Facoltativamente, test aggiuntivi (test per biomarcatori proteomici e metabolomici) saranno eseguiti su campioni di materiale biologico raccolti in precedenza (BALF, siero, urina [procedura non di routine].

      o Broncofiberoscopia con lavaggio bronchalveolare (BF + BAL), effettuando la biopsia della mucosa bronchiale: BF + BAL [procedura di routine]: prima di iniziare l'allattamento al seno, verrà eseguita anestesia regionale e sedazione con uso di lidocaina e midazolam, secondo i protocolli di anestesia applicati in rispettive unità di endoscopia. La cannula endovenosa verrà inserita prima del BF. Durante l'endoscopia, il paziente sarà monitorato secondo i protocolli di sicurezza applicati nelle rispettive unità di endoscopia.

      Il lavaggio broncoalveolare verrà eseguito nel bronco dal mantello medio del polmone destro o dalla lingula del polmone sinistro (B4, B5). La localizzazione sarà scelta in base ai risultati HRCT e sarà registrata nell'anamnesi del paziente. Verrà instillata una soluzione sterile di NaCl allo 0,9%. Verranno applicati 200 ml di fluido con una siringa in porzioni da 25 ml o 50 ml. Si raccomanda di recuperare almeno il 60% del fluido di lavaggio.

      Test del fluido di lavaggio broncoalveolare (BALF). La preparazione dei vetrini microscopici, l'analisi dei componenti cellulari del campione (tipo di cellule più abbondanti recuperate, durata delle cellule) saranno eseguite secondo una procedura standard di laboratorio (linee guida della Polish Respiratory Society). Il conteggio totale delle cellule insieme alla durata delle cellule sarà misurato in un campione prelevato dal filtrato o dal materiale dopo la prima rotazione. Cytospin (di routine 10 min a 1200-2000 rpm) verrà utilizzato per preparare il materiale. La colorazione May-Grunewald-Giemsa verrà utilizzata per preparare i vetrini microscopici.

      I campioni BALF saranno protetti e conservati per testare potenziali marcatori IPAF. 15 ml di BALF saranno divisi in microtubi Eppendorf da 1,5 ml e poi conservati a -70 C. I campioni saranno controllati per la concentrazione di proteina S1009A, chemochina (motivo C-C) ligando 2 e chitotrisidasi 1 (CHIT 1).

      Campioni di mucosa bronchiale prelevati durante BF [procedura non eseguita di routine durante l'assistenza clinica]. 5 campioni di mucosa saranno prelevati dal segmento iniziale del bronco del lobo medio, posti in microtubi Eppendorf e conservati a -80 C. I campioni saranno inviati per la valutazione istopatologica.

      • 6 minute walking test - (6MWT) eseguito secondo un protocollo applicato nei rispettivi centri clinici [procedura di routine]. Devono essere registrati i seguenti dati:

        • Se il paziente ha completato il test. Se il 6MWT è stato interrotto, il motivo dovrebbe essere registrato (ad es. dispnea, ipertensione, aritmia cardiaca, claudicatio intermittens, altro)

        • Distanza in metri

        • Pulsossimetria misurata prima e subito dopo il test
        • Misurazione della dispnea - Scala di Borg
      • Tomografia computerizzata ad alta risoluzione (HRCT) [procedura di routine]. Saranno ammissibili la tomografia corrente, eseguita secondo il protocollo applicato nei rispettivi centri clinici o TC 6 mesi prima dello studio. Verranno utilizzati i risultati del test (salvati su CD) e la descrizione radiologica. Il CD verrà etichettato nel modo sopra descritto. Il software OsiriX Lite verrà utilizzato per valutare le scansioni. Verranno misurati i seguenti valori densitometrici: attenuazione polmonare media (MLA), curtosi, asimmetria e deviazione standard della radiodensità polmonare (SD I.R). L'analisi dei dati sarà effettuata con il software STATISTICA. I dati saranno presentati come intervalli mediani e interquartili (IQR). I dati quantitativi saranno analizzati con i test post hoc di Kruskal-Willis e Dunn
      • Pulsossimetria (SpO2) [procedura di routine]. Se la SpO2 misurata è < 92% o se ci sono indicazioni per l'ossigenoterapia, verrà eseguita l'emogasanalisi.
      • Ecocardiografia transtoracica (TTE) [procedura di routine] con valutazione dettagliata del cuore destro:

      Diametro dell'arteria polmonare Tempo di accelerazione (Act) e rigurgito polmonare Velocità sistolica dell'anulus tricuspidale Velocità di rigurgito tricuspidale. Escursione sistolica del piatto anulare della tricuspide, (TAPSE) Diametro basale del ventricolo destro (RV), diametro medio del RV e dimensione base-apice Dimensione del tratto di afflusso del ventricolo destro Dimensione del tratto di efflusso del ventricolo destro Diametro del ventricolo destro misurato a livello della valvola polmonare Volume atriale destro Vena superiore dimensione cava Dimensione della vena cava inferiore Spessore della parete del ventricolo destro (RVWT) o Consultazione reumatologica di ogni paziente nei gruppi IPAF e malattie autoimmuni [procedura eseguita di routine durante l'assistenza clinica].

      Qualifica per la visita 2-5 - solo pazienti qualificati per la fase 2 dello studio

      Visita 2:

      • 6 +/- 3 mesi dalla visita 1:

      • Questionario visita 1-5 [procedura non di routine]
      • Test di funzionalità polmonare [procedura di routine]
      • 6MWT [procedura di routine]
      • Pulsossimetria [procedura di routine]

      Visita 3:

      • 12 +/- 3 mesi dalla visita 1:

      • Questionario visita 1-5 [procedura non di routine]
      • Test di funzionalità polmonare [procedura di routine]
      • 6MWT [procedura di routine]
      • HRCT [procedura di routine]
      • Analisi del sangue (test di laboratorio di base [procedura di routine], screening per autoanticorpi e concentrazione di citochine [procedura non di routine]
      • BF + BAL [facoltativamente; procedura di routine]
      • Emogasanalisi capillare arteriosa [procedura di routine]
      • TTE con valutazione dettagliata del cuore destro [procedura di routine]
      • Consultazione reumatologica [procedura di routine]

      Visita 4:

      • 24 +/- 3 mesi dalla visita 1:

      • Questionario visita 1-5 [procedura non di routine]
      • Test di funzionalità polmonare [procedura di routine]
      • 6MWT [procedura di routine]
      • HRCT [procedura di routine]
      • Analisi del sangue (test di laboratorio di base [procedura di routine], screening per autoanticorpi e concentrazione di citochine [procedura non di routine]
      • BF + BAL (opzionale; procedura di routine]
      • Emogasanalisi capillare arteriosa [procedura di routine]

      Visita 5

      • 60 +/- 3 mesi dalla visita 1

      o Questionario visita 1-5 [procedura non di routine]

      o Test di funzionalità polmonare [procedura di routine]

      o 6MWT [procedura di routine]

      • HRCT [procedura di routine]
      • Analisi del sangue (test di laboratorio di base [procedura di routine], screening per autoanticorpi e concentrazione di citochine [procedura non di routine]
      • BF + BAL (opzionale; procedura di routine)
      • Emogasanalisi capillare arterializzata [procedura di routine]
      • TTE con valutazione dettagliata del cuore destro [procedura di routine]
      • Consultazione reumatologica [procedura di routine]
      • Facoltativamente, in caso di progressione clinica e/o radiologica, peggioramento dei risultati dei test di funzionalità polmonare, criobiopsia. può essere ripetuto dopo aver ottenuto il consenso informato del paziente.