Klinické charakteristiky intersticiální pneumonie s autoimunitními rysy (IPAF) – multicentrická prospektivní studie

Budou studovány následující skupiny pacientů:

1. Studijní skupina - IPAF.

2. Kontrolní skupiny:

   1. Pacienti s intersticiální plicní nemocí spojenou s onemocněním pojivové tkáně (CTD-ILD): .revmatoidní artritida - RA, systémová skleróza - SSc, polymyozitida - PM, dermatomyozitida - DM, (antisyntetázový syndrom - AS, Sjoegrenův syndrom - SjS, smíšené onemocnění pojiva - MCTD, systémový lupus erythematodes - SLE, diagnostikováno dle diagnostických kritérií vydaných Evropská liga proti revmatismu (EULAR) a/nebo American College of Rheumatology (ACR)

   2. Skupina idiopatických intersticiálních pneumonií: idiopatická plicní fibróza - IPF, nespecifická intersticiální pneumonie - NSIP, kryptogenní organizující se pneumonie - COP, akutní intersticiální pneumonie - AIP; respirační bronchiolitida přidružená intersticiální plicní choroba - RB-ILD, deskvamativní intersticiální pneumonie - DIP, lymfocytární intersticiální pneumonie - LIP).

      Metody Pacienti budou vyšetřeni pneumologem a revmatologem. Budou splněny dotazníky týkající se klinických příznaků, doprovodných onemocnění a jejich léčby, aktivity onemocnění.

      Většina diagnostických testů a postupů se běžně provádí během klinické péče.

      Studie bude rozdělena do 2 fází:

      1. Fáze 1 – návštěva 1
      2. Fáze 2 - pozorování vybraných subjektů od návštěvy 1 až 5

      Fáze 1:

      V každém klinickém centru bude do studie přijato 30 pacientů splňujících kritéria způsobilosti, včetně jedinců s dlouhou lékařskou anamnézou a aktuálně podstupujících léčbu intersticiálního plicního onemocnění/autoimunitní poruchy, celkem až:

      • 210 pacientů ve skupině IPAF
      • 210 pacientů ve skupině CTD-ILD
      • 210 pacientů ve skupině IIP

      Fáze 2 Do této fáze budou zařazeni pouze nově diagnostikovaní pacienti (jedinci, u kterých nebyla dříve diagnostikována intersticiální plicní choroba a taková diagnóza byla stanovena během fáze 1 studie). Kvůli vzácnému výskytu může fáze náboru trvat až 36 měsíců.

      Celkový počet pacientů bude

      • 70 ve skupině IPAF
      • 70 ve skupině CTD-ILD (RA, SSc, PM, DM)
      • 70 ve skupině IIP (35 s IPF a 35 s NSIP, COP a LIP)

      Návštěva 1:

      • Budou provedeny následující testy a postupy:

      • Podrobná anamnéza získaná prostřednictvím „dotazníku návštěvy 1“ [nerutinní postup]
      • Funkční testy plic (spirometrie s testováním reverzibility, pletysmografie, difúzní kapacita plic pro oxid uhelnatý) [rutinní postup]. Posuzuje se absolutní hodnota a % referenční hodnoty.

      FEV1 - Objem usilovně vydechovaného za 1 sekundu FVC - Vynucená vitální kapacita VC - Vitální kapacita FEV1/VC, poměr TLC - Celková kapacita plic, DLCO SB - Kapacita difúze oxidu uhelnatého (metoda jednoho dechu) ITGV - nitrohrudní objem plynu RV/TLC - Poměr zbytkový objem/celková kapacita plic

      • validované metody hodnocení kašle [rutinní postup]: Chungův dotazník ke kašli a vizuální analogová škála (VAS).
      • validované metody hodnocení dušnosti [rutinní postup]: Likertův dotazník pro dušnost a modifikovaná Borgova škála.

      Krevní testy. Celkem bude odebráno 30 ml krve (15 ml krve do obyčejné mikrozkumavky bez antikoagulantu a 15 ml krve do antikoagulační mikrozkumavky). Podrobný popis níže:

      NT-proBNP, laboratorní testy prováděné během diagnostického procesu revmatologických onemocnění a potenciální markery IPAF [rutinní postup]. Bude odebráno 15 ml žilní krve a rozděleno do 2 mikrozkumavek (10 ml a 5 ml) bez antikoagulantu 10 ml mikrozkumavka bude expedována do místní laboratoře za účelem měření plazmatických hladin NT-proBNP a titru následujících autoprotilátek:

      • revmatoidní faktor (RF),
      • Anti-Citrulinated Protein Antibodies (ACPA; anti-CCP),

      • Antinukleární protilátky (ANA) (test ANA 1 prováděný jako screening); v případě přítomnosti ANA a další identifikace vzoru barvení (např. homogenní, skvrnitý, periferní, nukleolární, centromerový), budou provedeny další testy (ANA 2 a ANA 3):

        • anti-dsDNA,
        • anti-Sm,
        • anti-SS-A (Ro),
        • anti-SS-B (La),
        • anti-Scl-70,
        • anti-RNP,
        • anti-Jo-1 a anti-PL-7, anti-PL12,
        • anti-Mi-2,
        • anti-PM-Scl,
        • anti-MDA5. Z druhé 5ml mikrozkumavky se po vytvoření sraženiny odebere pipetou cca 2,5ml séra; sérum bude později rozděleno do 5 mikrozkumavek typu Eppendorf (0,5 ml každá). Tyto mikrozkumavky by měly být označeny následovně: první písmeno jména pacienta- první písmeno příjmení pacienta/ pohlaví F nebo M/datum narození DD-MM-RR/datum odběru vzorku DD-MM-RR, např. AL/K/12.05.45/01.02.18. Vzorky budou skladovány při -70 °C. Vzorky budou odebrány kurýrem a převezeny do klinického centra odpovědného za tuto část studie. Tento vzorek bude použit k testování potenciálních markerů IPAF, např. chemokin C-C motiv ligand 18 (CXCL18), povrchově aktivní protein A- (SP-A), povrchově aktivní protein D (SP-D), Krebs von den Lungen-6 protein (KL-6) a chitotrisidáza 1 (CHIT1) [nerutinní postup].

      Odběr vzorku krve [postup, který se během klinické péče běžně neprovádí]. Odebere se 15 ml plné žilní krve a poté se rozdělí do 10 zkumavek Eppendorf po 1,5 ml. Zkumavky budou označeny tak, jak je popsáno výše. Vzorky budou skladovány při -70 °C. Vzorky budou dopraveny do klinického centra odpovědného za tuto část studie.

      Volitelně budou provedeny dodatečné testy (testování proteomických a metabolomických biomarkerů) ve vzorcích předem odebraného biologického materiálu (BALF, sérum, moč [nerutinní postup].

      o Bronchofiberoskopie s bronchalveolární laváží (BF + BAL), provedení biopsie sliznice bronchů: BF + BAL [rutinní postup]: před zahájením kojení bude provedena regionální anestezie a sedace s použitím lidokainu a midazolamu, dle anesteziologických protokolů aplikovaných v příslušné endoskopické jednotky. Intravenózní kanyla bude zavedena před kojením. Během endoskopie bude pacient sledován podle bezpečnostních protokolů aplikovaných na příslušných endoskopických jednotkách.

      Bronchoalveolární laváž bude provedena v bronchu ze středního pláště pravé plíce nebo linguly levé plíce (B4, B5). Lokalizace bude zvolena na základě výsledků HRCT a bude zaznamenána v anamnéze pacienta. Bude nakapán sterilní roztok 0,9% NaCl. 200 ml tekutiny bude aplikováno injekční stříkačkou v dávkách po 25 ml nebo 50 ml. Doporučuje se odebrat minimálně 60 % lavážní tekutiny.

      Vyšetření tekutiny z bronchoalveolární laváže (BALF). Příprava mikroskopických preparátů, analýza buněčných složek vzorku (druh nejhojnějších získaných buněk, trvanlivost buněk) bude provedena podle standardního laboratorního postupu (směrnice Polské respirační společnosti). Celkový počet buněk spolu s trvanlivostí buněk bude měřen ve vzorku odebraném z filtrátu nebo materiálu po prvním odstřeďování. K přípravě materiálu bude použit cytospin (běžně 10 min 1200-2000 ot./min.). K přípravě mikroskopických preparátů bude použito barvivo May-Grunewald-Giemsa.

      Vzorky BALF budou zajištěny a uloženy za účelem testování potenciálních markerů IPAF. 15 ml BALF bude rozděleno do Eppendorfových 1,5 ml mikrozkumavek a poté skladováno při -70 C. Vzorky budou kontrolovány na koncentraci proteinu S1009A, chemokinu (C-C motiv) ligandu 2 a chitotrisidázy 1 (CHIT 1).

      Vzorky bronchiální sliznice odebrané během kojení [postup se během klinické péče běžně neprovádí]. Z počátečního segmentu bronchu středního laloku bude odebráno 5 vzorků sliznice, umístěno do Eppendorfových mikrozkumavek a skladováno při -80 C. Vzorek bude odeslán k histopatologickému posouzení.

      • 6minutový test chůze - (6MWT) prováděný podle protokolu aplikovaného v příslušných klinických centrech [rutinní postup]. Měly by být zaznamenány následující údaje:

        • Zda pacient dokončil test. Pokud bylo 6MWT přerušeno, měl by být zaznamenán důvod (např. dušnost, vysoký krevní tlak, srdeční arytmie, intermitentní klaudikace, jiné)

        • Vzdálenost v metrech

        • Pulzní oxymetrie měřená před a přímo po testu
        • Měření dušnosti – Borgova stupnice
      • Počítačová tomografie s vysokým rozlišením (HRCT) [rutinní postup]. Současná tomografie provedená podle protokolu aplikovaného v příslušných klinických centrech nebo CT 6 měsíců před studií bude způsobilá. Budou použity výsledky testů (uložené na CD) a radiologický popis. CD bude označeno výše popsaným způsobem. K posouzení skenů bude použit software OsiriX Lite. Budou měřeny následující denzitometrické hodnoty: střední útlum plic (MLA), špičatost, šikmost a směrodatná odchylka radiodenzity plic (SD I.R). Analýza dat bude provedena pomocí softwaru Statistica. Data budou prezentována jako medián a interkvartilní rozsahy (IQR). Kvantitativní data budou analyzována pomocí Kruskal-Willisových a Dunnových post hoc testů
      • Pulzní oxymetrie (SpO2) [rutinní postup]. Pokud je naměřeno SpO2 < 92 % nebo pokud existují indikace pro oxygenoterapii, provede se odběr arteriálního krevního plynu.
      • Transtorakální echokardiografie (TTE) [rutinní postup] s podrobným vyšetřením pravého srdce:

      Průměr plicní tepny Doba zrychlení (Act) a plicní regurgitace Systolická rychlost trikuspidálního anulu Rychlost trikuspidální regurgitace. Systolická exkurze trikuspidální prstencové dlahy, (TAPSE) Průměr bazální pravé komory (RV), střední průměr RV a rozměr baze-apex Dimenze přítokového traktu pravé komory Dimenze výtokového traktu pravé komory Průměr pravé komory měřený na úrovni plicní chlopně Objem pravé síně Horní žíla dimenze cava Dimenze dolní duté žíly Tloušťka stěny pravé komory (RVWT) o Revmatologická konzultace každého pacienta ve skupinách IPAF a autoimunitních poruch [postup rutinně prováděný během klinické péče].

      Kvalifikace pro návštěvu 2-5 – pouze pacienti kvalifikovaní do fáze 2 studie

      Návštěva 2:

      • 6 +/- 3 měsíce od návštěvy 1:

      • Navštivte dotazník 1-5 [nerutinní postup]
      • Funkční testy plic [rutinní postup]
      • 6MWT [rutinní postup]
      • Pulzní oxymetrie [rutinní postup]

      Návštěva 3:

      • 12 +/- 3 měsíce od návštěvy 1:

      • Navštivte dotazník 1-5 [nerutinní postup]
      • Funkční testy plic [rutinní postup]
      • 6MWT [rutinní postup]
      • HRCT [rutinní postup]
      • Krevní testy (základní laboratorní testy [rutinní postup], screening na autoprotilátky a koncentraci cytokinů [nerutinní postup]
      • BF + BAL [volitelně; rutinní postup]
      • Arterializovaný kapilární krevní plyn [rutinní postup]
      • TTE s podrobným vyšetřením pravého srdce [rutinní postup]
      • Revmatologická konzultace [rutinní postup]

      Návštěva 4:

      • 24 +/- 3 měsíce od návštěvy 1:

      • Navštivte dotazník 1-5 [nerutinní postup]
      • Funkční testy plic [rutinní postup]
      • 6MWT [rutinní postup]
      • HRCT [rutinní postup]
      • Krevní testy (základní laboratorní testy [rutinní postup], screening na autoprotilátky a koncentraci cytokinů [nerutinní postup]
      • BF + BAL (volitelně; rutinní postup)
      • Arterializovaný kapilární krevní plyn [rutinní postup]

      Návštěva 5

      • 60 +/- 3 měsíce od návštěvy 1

      o Navštivte 1-5 dotazník [nerutinní postup]

      o Funkční testy plic [rutinní postup]

      o 6MWT [rutinní postup]

      • HRCT [rutinní postup]
      • Krevní testy (základní laboratorní testy [rutinní postup], screening na autoprotilátky a koncentraci cytokinů [nerutinní postup]
      • BF + BAL (volitelně; rutinní postup)
      • Vyšetření arterializovaných kapilárních krevních plynů [rutinní postup]
      • TTE s podrobným vyšetřením pravého srdce [rutinní postup]
      • Revmatologická konzultace [rutinní postup]
      • Případně v případě klinické a/nebo radiologické progrese, zhoršení výsledků funkčních plicních testů, kriobiopsie. lze opakovat po obdržení informovaného souhlasu pacienta.