Netrin 1 und sein Rezeptor Unc5b als Marker für Parodontalerkrankungen

An der Studie nahmen insgesamt 60 Personen teil, darunter 20 Patienten mit Parodontitis (P-Gruppe), 20 Patienten mit Gingivitis (G-Gruppe) und 20 parodontal gesunde Kontrollpersonen (H-Gruppe). Die Patienten wurden nach dem neuen Klassifikationsschema diagnostiziert. Außerdem wurden Stadium und Ausmaß der Parodontitis bestimmt.

Die klinischen parodontalen Kriterien für die Diagnose der Gruppen waren wie folgt: Die Parodontitis-Gruppe hatte einen interdentalen klinischen Attachmentverlust (CAL) ≥ 5 mm an der Stelle mit dem größten Verlust und eine parodontale Sondierungstiefe (PD) ≥ 6 mm an einer oder mehreren Stellen der 2 nicht benachbarte Zähne in mindestens zwei Quadranten des Mundes. Dementsprechend wurden Patienten mit generalisierter Parodontitis im Stadium III in die Studie eingeschlossen. Bei den Patienten wurde Gingivitis mit Sondierungsblutung von ≥ 50 %, PD ≤ 3 mm und keinem röntgenologischen Knochenverlust oder CAL diagnostiziert. Parodontal gesunde Personen hatten keine Aufzeichnungen über parodontale Probleme, mit PD ≤ 3 mm, keinem röntgenologischen Knochenverlust, guter Mundhygiene, keiner Zahnfleischentzündung.

Die Einschlusskriterien waren wie folgt: (1) Alter > 18 Jahre, (2) mit mindestens 16 natürlichen Zähnen (ausgenommen dritte Molaren), (3) Nichtraucher ohne Rauchergeschichte, (4) ohne diagnostizierte medizinische Krankheit oder Medikamente Einnahme, die den parodontalen Zustand beeinflussen könnte. Die Patienten, die (1) innerhalb der letzten 3 Monate Antibiotika, nichtsteroidale Antirheumatika oder andere Medikamente eingenommen hatten, (2) eine nicht-chirurgische oder chirurgische Parodontalbehandlung erhielten, (3) eine restaurative und endodontische Therapie benötigten, (4) eine herausnehmbare Teilprothese und /oder sich einer kieferorthopädischen Therapie unterziehen, wurden von der Studie ausgeschlossen. Aktuelle Schwangerschaft oder Stillzeit und Serum-C-reaktives Protein (CRP) > 3 mg/l waren ebenfalls Ausschlusskriterien.

Alle Personen wurden zu Studienbeginn und vier Wochen nach der nicht-chirurgischen Parodontalbehandlung untersucht, einschließlich Sondierungstiefe des gesamten Mundes (PD), CAL, Vorhandensein von Blutungen bei Sondierung (BOP), Papillenblutungsindex (PBI), Gingivaindex (GI) und Plaque Index (PI) mit Ausnahme der dritten Molaren. PD und CAL wurden an sechs Stellen pro Zahn unter Verwendung einer manuellen Parodontalsonde gemessen.

Die nicht-chirurgische Parodontalbehandlung für die Parodontitis-Gruppe umfasste supra- und subgingivales Scaling, Wurzelglättung und Anweisungen zur Mundhygiene. Subgingivales Scaling und Wurzelglättung wurden unter örtlicher Betäubung in zwei Sitzungen innerhalb von 48-72 h durchgeführt. Die Gingivitis-Gruppe hatte Anweisungen zum supra- und subgingivalen Scaling, Polieren und zur Mundhygiene. Die Behandlung von Gingivitis- und Parodontitispatienten erfolgte durch einen Parodontologen (BM) mit Hand- und Ultraschallinstrumenten. Alle Messungen wurden von demselben kalibrierten Prüfer (SG) durchgeführt.

Speichelproben

Ganze unstimulierte Speichelproben wurden gesammelt. Jeder Teilnehmer wurde gebeten, zuerst den Mund 1 Minute lang vollständig mit Leitungswasser zu spülen, 10 Minuten zu warten und dann 5 Minuten lang in ein steriles Polypropylenröhrchen zu spucken.

Probenahme von Gingiva-Crevicular-Flüssigkeit (GCF).

GCF-Proben wurden von zwei nicht benachbarten interproximalen Stellen in einem einwurzeligen und einem mehrwurzeligen Zahn durch standardisierte Filterpapierstreifen erhalten. GCF wurde von zwei Stellen mit GI < 1, PD ≤ 3 mm und ohne BOP in der gesunden Gruppe entnommen; zwei Stellen mit GI ≥ 2, PD ≤ 3 mm und positivem BOP (sichtbare Entzündungszeichen) in der Gingivitis-Gruppe; und zwei tiefste Taschen (≥ 5 mm) mit GI ≥ 2 und positivem BOP in der Parodontitis-Gruppe.

Serumprobenahme

Serumproben wurden nach der Speichel- und GCF-Probenahme vor der Parodontalbehandlung entnommen. Sechs Milliliter venöses Blut wurden durch ein Standard-Venenpunktionsverfahren erhalten, und das Serum wurde durch Zentrifugation bei 1.500 g für 20 Minuten vom Blut getrennt.

Messung der Netrin 1- und Unc5b-Spiegel in GCF-, Speichel- und Serumproben

Die Netrin 1- und Unc5b-Spiegel in GCF-, Speichel- und Serumproben wurden mit dem enzymgebundenen Immunadsorptionstest (ELISA) unter Verwendung handelsüblicher Kits gemäß den Richtlinien des Herstellers gemessen.

Statistische Analyse

Alle Datenanalysen wurden mit einem statistischen Softwarepaket durchgeführt. Vergleiche klinischer und biochemischer Parameter zwischen den Studiengruppen wurden unter Verwendung des Kruskal-Wallis-mit-Mann-Whitney-U-Tests mit Bonferroni-Korrekturmethode durchgeführt. Die Vergleiche innerhalb der Gruppe (zu Studienbeginn und im ersten Monat) wurden unter Verwendung des Wilcoxon-Tests für gepaarte Proben durchgeführt. Assoziationen zwischen den Konzentrationen von GCF, Speichel- und Serumbiomarkern und klinischen Parametern wurden ebenfalls unter Verwendung der Spearman-Rangkorrelationsanalyse untersucht.