Netrin 1 och dess receptor Unc5b som markörer för parodontit sjukdom

Totalt 60 individer, omfattande 20 patienter med parodontit (P-grupp), 20 patienter med gingivit (G-grupp) och 20 parodontalt friska kontroller (H-grupp) var involverade i studien. Patienterna diagnostiserades enligt det nya klassificeringsschemat. Stadium och omfattning av parodontit bestämdes också.

De kliniska parodontala kriterierna för diagnosen av grupperna var följande: parodontitgruppen hade interdental klinisk anknytningsförlust (CAL) ≥5 mm vid platsen för störst förlust och parodontalt sonderingsdjup (PD) ≥ 6 mm på ett eller flera ställen i 2 icke-intilliggande tänder i minst två kvadranter av munnen. Följaktligen inkluderades patienter med generaliserad parodontit i steg III i studien. Patienterna diagnostiserades som gingivit med blödning vid sondering ≥ 50 %, PD ≤3 mm och ingen radiografisk benförlust eller CAL. Periodontalt friska individer hade ingen registrerad historia av parodontala problem, med PD ≤3 mm, ingen radiografisk benförlust, god munhygien, ingen gingival inflammation.

Inklusionskriterierna var följande: (1) i åldern >18 år, (2) med minst 16 naturliga tänder (exklusive tredje molar), (3) icke-rökare utan att ha rökt, (4) som inte har någon diagnostiserad medicinsk sjukdom eller drog intag som kan påverka det parodontala tillståndet. De patienter som hade (1) tagit antibiotika, icke-steroida antiinflammatoriska eller andra läkemedel under de senaste 3 månaderna, (2) fått icke-kirurgisk eller kirurgisk parodontitbehandling, (3) ett krav på reparativ och endodontisk terapi, (4) en avtagbar delprotes och /eller genom att ha ortodontisk terapi exkluderades från studien. Aktuell graviditet eller amning och med serum C-reaktivt protein (CRP) > 3 mg/L var också uteslutningskriterierna.

Alla individer undersöktes vid baslinjen och fyra veckor efter icke-kirurgisk periodontal behandling, inklusive helmuns sonderingsdjup (PD), CAL, förekomst av blödning vid sondering (BOP), papillär blödningsindex (PBI), gingivalindex (GI) och plack index (PI) förutom de tredje molarerna. PD och CAL mättes vid sex ställen per tand med användning av en manuell parodontala sond.

Den icke-kirurgiska parodontala behandlingen för parodontitgruppen inkluderade supra- och subgingival fjällning, rothyvling och munhygieninstruktioner. Subgingival fjällning och rotplaning utfördes under lokalbedövning i två sessioner inom 48-72 timmar. Gingivitgruppen hade instruktioner för supra- och subgingival fjällning, polering och munhygien. Behandlingen av gingivit- och parodontitpatienter utfördes av en parodontolog (BM) med hjälp av hand- och ultraljudsinstrument. Alla mätningar utfördes av samma kalibrerade granskare (SG).

Salivprovtagning

Hela ostimulerade salivprover samlades in. Varje deltagare ombads först att skölja munnen helt med kranvatten i 1 minut, vänta i 10 minuter och sedan slemmas upp i ett sterilt polypropenrör i 5 minuter.

Gingival crevicular fluid (GCF) provtagning

GCF-prover erhölls från två icke-angränsande interproximala platser i en enkelrotad och en multirotad tand med standardiserade filterpappersremsor. GCF togs från två platser med GI < 1, PD ≤ 3 mm och utan BOP i den friska gruppen; två platser med GI ≥ 2, PD ≤ 3 mm och positiv BOP (synliga tecken på inflammation) i gingivitgruppen; och två djupaste fickorna (≥ 5 mm) med GI ≥ 2 och positiv BOP i parodontitgruppen.

Serumprovtagning

Serumprover togs efter provtagning av saliv och GCF före den parodontala behandlingen. Sex milliliter venöst blod erhölls genom en standard venpunktionsmetod och serumet separerades från blod genom centrifugering vid 1 500 g under 20 minuter.

Mätning av Netrin 1 och Unc5b nivåer i GCF, saliv och serumprover

Netrin 1- och Unc5b-nivåer i GCF, saliv och serumprover mättes med enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA) med användning av kommersiella kit enligt tillverkarens riktlinjer.

Statistisk analys

Alla dataanalyser utfördes med hjälp av ett statistiskt mjukvarupaket. Jämförelser av kliniska och biokemiska parametrar mellan studiegrupperna utfördes med användning av Kruskal-Wallis med Mann Whitney U-test med Bonferroni-korrigeringsmetod. Intragruppsjämförelserna (vid baslinjen och första månaden) utfördes med Wilcoxon-testet för parade prover. Samband mellan nivåer av GCF, saliv och serumbiomarkörer och kliniska parametrar undersöktes också med Spearman rank korrelationsanalys.