Netrin 1 en zijn receptor Unc5b als markers van parodontitis

In totaal waren 60 personen, waaronder 20 patiënten met parodontitis (P-groep), 20 patiënten met gingivitis (G-groep) en 20 parodontaal gezonde controles (H-groep), bij het onderzoek betrokken. De patiënten werden gediagnosticeerd volgens het nieuwe classificatieschema. Stadium en omvang van parodontitis werden ook bepaald.

De klinische parodontale criteria voor de diagnose van de groepen waren als volgt: de parodontitisgroep had interdentaal klinisch aanhechtingsverlies (CAL) ≥ 5 mm op de plaats met het grootste verlies en parodontale sonderingsdiepte (PD) ≥ 6 mm op een of meer plaatsen van de 2 niet-aangrenzende tanden in ten minste twee kwadranten van de mond. Dienovereenkomstig werden stadium III-patiënten met gegeneraliseerde parodontitis in de studie opgenomen. Patiënten werden gediagnosticeerd als gingivitis met bloeding bij sonderen ≥ 50 %, PD ≤ 3 mm, en geen radiografisch botverlies of CAL. Parodontaal gezonde individuen hadden geen voorgeschiedenis van parodontale problemen, met PD ≤3 mm, geen radiografisch botverlies, goede mondhygiëne, geen tandvleesontsteking.

Inclusiecriteria waren als volgt: (1) ouder dan 18 jaar, (2) met ten minste 16 natuurlijke tanden (exclusief derde kies), (3) niet-rokers zonder voorgeschiedenis van roken, (4) geen gediagnosticeerde medische ziekte of drugs inname die van invloed kan zijn op de parodontale conditie. De patiënten die (1) in de afgelopen 3 maanden antibiotica, niet-steroïde anti-inflammatoire middelen of andere geneesmiddelen hadden gebruikt, (2) een niet-chirurgische of chirurgische parodontale behandeling hadden ondergaan, (3) een restauratieve en endodontische therapie nodig hadden, (4) een uitneembare gedeeltelijke prothese en /of met orthodontische therapie werden uitgesloten van de studie. Huidige zwangerschap of borstvoeding en serum C-reactief proteïne (CRP) > 3 mg/L waren ook de uitsluitingscriteria.

Alle personen werden bij aanvang en vier weken na niet-chirurgische parodontale behandeling onderzocht, waaronder sonderingsdiepte (PD), CAL, aanwezigheid van bloeding bij sondering (BOP), papillaire bloedingsindex (PBI), gingivale index (GI) en plaque index (PI) behalve de derde molaren. PD en CAL werden gemeten op zes locaties per tand met behulp van een handmatige parodontale sonde.

De niet-chirurgische parodontale behandeling van parodontitis omvatte supra- en subgingivale schilfering, wortelplanering en instructies voor mondhygiëne. Subgingivale scaling en rootplaning werden uitgevoerd onder lokale anesthesie in twee sessies binnen 48-72 uur. Gingivitis-groep had instructies voor supra- en subgingivale schilfering, polijsten en mondhygiëne. De behandeling van gingivitis- en parodontitispatiënten werd uitgevoerd door een parodontoloog (BM) met behulp van hand- en ultrasone instrumenten. Alle metingen werden uitgevoerd door dezelfde gekalibreerde examinator (SG).

Speeksel bemonstering

Hele ongestimuleerde speekselmonsters werden verzameld. Elke deelnemer werd eerst gevraagd om de mond gedurende 1 minuut volledig met kraanwater te spoelen, 10 minuten te wachten en vervolgens gedurende 5 minuten in een steriele polypropyleen buis op te spuwen.

Gingivale creviculaire vloeistof (GCF) bemonstering

GCF-monsters werden verkregen van twee niet-aangrenzende interproximale plaatsen in één tand met één wortel en één tand met meerdere wortels door middel van gestandaardiseerde stroken filtreerpapier. GCF werd bemonsterd op twee locaties met GI < 1, PD ≤ 3 mm en zonder BOP in de gezonde groep; twee locaties met GI ≥ 2, PD ≤ 3 mm en positieve BOP (zichtbare tekenen van ontsteking) in de gingivitisgroep; en twee diepste pocket (≥ 5 mm) met GI ≥ 2 en positieve BOP in parodontitisgroep.

Serumbemonstering

Serummonsters werden genomen na speeksel- en GCF-monsters vóór de parodontale behandeling. Zes milliliter veneus bloed werd verkregen door middel van een standaard aderpunctiemethode en het serum werd van het bloed gescheiden door centrifugatie bij 1500 g gedurende 20 minuten.

Meting van Netrin 1- en Unc5b-niveaus in GCF-, speeksel- en serummonsters

Netrin 1- en Unc5b-niveaus in GCF-, speeksel- en serummonsters werden gemeten met de enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA) met behulp van commerciële kits volgens de richtlijnen van de fabrikant.

Statistische analyse

Alle gegevensanalyses werden uitgevoerd met behulp van een statistisch softwarepakket. Vergelijkingen van klinische en biochemische parameters tussen de onderzoeksgroepen werden uitgevoerd met behulp van de Kruskal-Wallis met Mann Whitney U-test met Bonferroni-correctiemethode. De intragroepsvergelijkingen (bij aanvang en eerste maand) werden uitgevoerd met behulp van de Wilcoxon-test voor gepaarde monsters. Associaties tussen niveaus van de GCF-, speeksel- en serumbiomarkers en klinische parameters werden ook onderzocht met behulp van de Spearman-rangcorrelatieanalyse.