Netrin 1 ja sen reseptori Unc5b periodontaalisen sairauden merkkiaineina

Tutkimukseen osallistui yhteensä 60 henkilöä, joista 20 oli parodontiittipotilasta (P-ryhmä), 20 ientulehduspotilasta (G-ryhmä) ja 20 parodontaalista tervettä kontrollia (H-ryhmä). Potilaat diagnosoitiin uuden luokitusjärjestelmän mukaan. Myös parodontiitin vaihe ja laajuus määritettiin.

Kliiniset periodontaaliset kriteerit ryhmien diagnosoimiseksi olivat seuraavat: parodontiittiryhmässä hampaiden välisen kliinisen kiinnittymisen menetys (CAL) oli ≥5 mm suurimman menetyksen kohdassa ja parodontaalisen koetussyvyys (PD) ≥ 6 mm yhdessä tai useammassa hampaiden kohdassa. 2 ei vierekkäistä hammasta vähintään kahdessa suun neljänneksessä. Sen mukaisesti tutkimukseen otettiin mukaan III-vaiheen yleistynyt parodontiittipotilaat. Potilailla diagnosoitiin ientulehdus ja verenvuoto koetuksella ≥ 50 %, PD ≤ 3 mm, eikä röntgenkuvaus tai CAL. Periodontaalisilla terveillä henkilöillä ei ollut kirjattuja parodontaalisia ongelmia, PD ≤3 mm, ei röntgenkuvaa, hyvä suuhygienia, ei ientulehdusta.

Osallistumiskriteerit olivat seuraavat: (1) yli 18-vuotiaat, (2) joilla on vähintään 16 luonnollista hammasta (pois lukien kolmas poskihammas), (3) tupakoimattomat, jotka eivät ole tupakoineet, (4) joilla ei ole diagnosoitua lääketieteellistä sairautta tai lääkettä saanti, joka voi vaikuttaa parodontaaliin. Potilaat, jotka olivat (1) käyttäneet antibiootteja, ei-steroidisia tulehduskipulääkkeitä tai muita lääkkeitä viimeisten 3 kuukauden aikana, (2) saivat ei-kirurgista tai kirurgista parodontaalihoitoa, (3) korjaus- ja endodonttisen hoidon tarve, (4) irrotettavan osittaisen hammasproteesin ja /tai oikomishoitoa saaneet suljettiin pois tutkimuksesta. Nykyinen raskaus tai imetys ja seerumin C-reaktiivinen proteiini (CRP) > 3 mg/l olivat myös poissulkemiskriteerit.

Kaikki yksilöt tutkittiin lähtötilanteessa ja neljä viikkoa ei-kirurgisen parodontaalihoidon jälkeen, mukaan lukien koko suun mittaussyvyys (PD), CAL, verenvuoto koetuksella (BOP), papillaariverenvuotoindeksi (PBI), ienindeksi (GI) ja plakki. indeksi (PI) kolmatta hampaat lukuun ottamatta. PD ja CAL mitattiin kuudesta kohdasta hammasta kohti käyttämällä manuaalista parodontaalianturia.

Parodontiittiryhmän ei-kirurginen parodontaalihoito sisälsi supra- ja subgingivaalisen hilseilyn, juurien höyläyksen ja suun hygieniaohjeet. Subgingivaalinen hilseily ja juurien höyläys tehtiin paikallispuudutuksessa kahdessa istunnossa 48-72 tunnin sisällä. Ientulehdusryhmällä oli supra- ja subgingivaaliset hilseily-, kiillotus- ja suuhygieniaohjeet. Ientulehdus- ja parodontiittipotilaiden hoidon suoritti parodontologi (BM) käsi- ja ultraääniinstrumenteilla. Kaikki mittaukset suoritti sama kalibroitu tutkija (SG).

Sylkinäytteenotto

Kokonaiset stimuloimattomat sylkinäytteet kerättiin. Jokaista osallistujaa pyydettiin ensin huuhtelemaan suu kokonaan vesijohtovedellä 1 minuutin ajan, odottamaan 10 minuuttia ja sitten yskämään steriiliin polypropeeniputkeen 5 minuutiksi.

Gingival crevicular nesteen (GCF) näytteenotto

GCF-näytteet saatiin kahdesta vierekkäisestä interproksimaalisesta kohdasta yhdestä yksijuurisesta ja yhdestä monijuurisesta hampaasta standardoiduilla suodatinpaperinauhoilla. GCF otettiin kahdesta kohdasta, joissa GI < 1, PD ≤ 3 mm ja ilman BOP:ta terveessä ryhmässä; kaksi kohtaa, joissa GI ≥ 2, PD ≤ 3 mm ja positiivinen BOP (näkyviä tulehduksen merkkejä) ientulehdusryhmässä; ja kaksi syvintä taskua (≥ 5 mm), joiden GI ≥ 2 ja positiivinen BOP parodontiittiryhmässä.

Seeruminäytteenotto

Seeruminäytteet otettiin sylki- ja GCF-näytteenoton jälkeen ennen parodontaalihoitoa. Kuusi millilitraa laskimoverta saatiin tavanomaisella laskimopunktiomenetelmällä ja seerumi erotettiin verestä sentrifugoimalla 1500 g:ssä 20 minuutin ajan.

Netrin 1- ja Unc5b-tasojen mittaus GCF-, sylki- ja seeruminäytteistä

Netrin 1- ja Unc5b-tasot GCF-, sylki- ja seeruminäytteissä mitattiin entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä (ELISA) käyttämällä kaupallisia sarjoja valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Tilastollinen analyysi

Kaikki data-analyysit suoritettiin käyttämällä tilastollista ohjelmistopakettia. Kliinisten ja biokemiallisten parametrien vertailut tutkimusryhmien välillä suoritettiin Kruskal-Wallis ja Mann Whitney U -testillä Bonferroni-korjausmenetelmällä. Ryhmän sisäiset vertailut (lähtötilanteessa ja ensimmäisen kuukauden aikana) suoritettiin Wilcoxon-testillä parinäytteille. GCF-tasojen, syljen ja seerumin biomarkkerien ja kliinisten parametrien välisiä assosiaatioita tutkittiin myös käyttämällä Spearmanin rankkorrelaatioanalyysiä.