Veränderung der Antikörperspiegel nach SARS-CoV-2 (Covid-19)-Impfungen (Covid-19-Abs)

Fächer:

Dieses Studienprotokoll wird bei ClinicalTrails.gov registriert und Genehmigung durch eine unabhängige Ethikkommission. Alle Probanden erhalten detaillierte schriftliche Informationen über die Studie und müssen ihr schriftliches Einverständnis zur Teilnahme an der Studie erteilen. Die Ermittler werden Blutproben von Bewohnern von über 300 Pflegeheimen, Einrichtungen der erweiterten Pflege und über 55-Gemeinschaften sammeln, die sich bereit erklärt haben, an der Studie zu Studienbeginn (sofern verfügbar) und nach 3, 6, 9 und 12 Monaten nach der Studie teilzunehmen -Impfung mit einem der drei zugelassenen SARS-CoV-2-Impfstoffe. Die Plasmaproben werden von Southlake Diagnostics analysiert.

An der Studie werden bis zu 10.000 männliche und weibliche Bewohner von Pflegeheimen, erweiterten Pflegeeinrichtungen und Gemeinschaften über 55 sowie mit diesen Einrichtungen verbundenes Personal teilnehmen. Es werden demografische Daten der Probanden einschließlich Merkmalen und Krankengeschichten einschließlich Begleitmedikationen und Krankheitszuständen/Zuständen erhoben.

Blutprobenentnahme:

Eine Standardarbeitsanweisung (SOP) wurde von Southlake Diagnostics entwickelt, um ein standardisiertes Verfahren zur Festlegung eines sicheren und geeigneten Ortes und einer Methode zur Gewinnung menschlicher Blutproben festzulegen. Diese SOP enthält Vorschriften und Empfehlungen aus dem Needlestick Safety and Prevention Act (29 CFR 1910.1030) der Occupational Safety and Health Administration (OSHA). Blutentnahmen, die von Mitarbeitern von Southlake Diagnostics durchgeführt werden, unterliegen dieser SOP.

Der OSHA Bloodborne Pathogen Standard (29 CFR 1910.1030) definiert die erforderliche Verwendung von sicherheitstechnisch hergestellten scharfen Gegenständen für jegliche klinische Forschung (einschließlich Blutabnahmen und Injektionen). Alle Mitarbeiter, die menschliche Blutentnahmen durchführen, müssen sicherheitstechnisch entwickelte scharfe Gegenstände verwenden.

Personal, das Blutentnahmen durchführt, muss die entsprechende persönliche Schutzausrüstung (PSA) tragen. Das Clinical Operations Team ist dafür verantwortlich, zu überprüfen, ob das Laborpersonal, das Blutentnahmen durchführt, über eine angemessene Ausbildung und Erfahrung in der Durchführung von menschlichen Blutentnahmen verfügt.

Blutproben werden aus einer geeigneten Vene wie der medianen Kubitalvene entnommen. Blutproben von 3,0 ml werden in BD Vacutainer-Blutentnahmeröhrchen mit Lithium-Heparin unter Verwendung von 21–23-Gage-Nadeln entnommen. Die Blutproben werden in auslaufsicheren Kunststoffbeuteln für biologische Gefahrenstoffe verpackt und in isolierten Behältern mit Kühlakkus transportiert, um die Unversehrtheit der Proben bei Bedarf zu gewährleisten. Plasma wird durch Zentrifugation hergestellt. Plasmaproben werden bei 2-8 °C gelagert, wenn sie nicht innerhalb von 8 Stunden getestet werden, und eingefroren, wenn sie nicht innerhalb von 14 Tagen getestet werden.

Analytische Methoden:

IgG-Antikörper gegen SARS-CoV-2 in Humanplasma (Lithium-Heparin) werden mit dem Atellica® IM SARS-CoV-2-IgG (sCOVG)-Assay von Siemens (EUA-Nummer: EUA202669) bestimmt, einem Chemilumineszenz-Immunoassay, der für qualitative und semiquantitativer Nachweis von IgG-Antikörpern mit dem Atellica® IM Analyzer [1]. Dieser SARS-CoV-2-IgG-Assay weist spezifisch IgG-Antikörper gegen das Antigen der S1-Rezeptorbindungsdomäne (RBD) nach. IgG-Antikörper gegen SARS-CoV-2 sind in der Regel mehrere Tage nach Erstinfektion oder Impfung im Blut nachweisbar. Die Dauer des Vorhandenseins von Antikörpern nach der Impfung ist nicht gut charakterisiert. Der Test gibt einen Hinweis auf das Immunitätsniveau, das ein Impfstoff gegen das SARS-CoV-2-Virus bietet, das COVID-19 verursacht.

Der Atellica IM sCOVG-Assay ist ein vollautomatischer 2-Schritt-Sandwich-Immunoassay mit indirekter Chemilumineszenz-Technologie. Es besteht eine direkte Beziehung zwischen der Menge an SARS-CoV-2-IgG-Antikörpern, die in einer Plasmaprobe eines Patienten vorhanden ist, und der Menge an relativen chemilumineszenten Lichteinheiten (RLUs), die vom System erkannt werden. Das Erstellen von Masterkurven und das Durchführen von Kalibrierungen des Systems werden gemäß den Herstellungsanweisungen durchgeführt.

Die Ergebnisse des IgG-Antikörpertests werden als Indexwerte mit einem analytischen Messintervall von 0,50–150,00 ausgedrückt Indexeinheiten. Plasmaproben mit Indexwerten >150 werden verdünnt und erneut getestet. Indexwerte <1,00 gelten als negativ (nicht reaktiv), während Werte >1,00 als positiv (reaktiv) betrachtet werden [1].

Die Gesamtantikörper (IgM + IgG) gegen SARS-CoV-2 in Humanplasma (Lithium-Heparin) werden mit dem Atellica® IM SARS-CoV-2-Gesamttest (COV2T) von Siemen bestimmt, einem Chemilumineszenz-Immunoassay zum qualitativen Nachweis von Gesamtantikörper mit dem Atellica® IM Analyzer[1].

Der Atellica IM COV2T-Assay ist ein automatisierter Immunoassay mit indirekter Chemilumineszenz-Technologie [1]. Die Ergebnisse des Gesamtantikörpertests (IgM + IgG) werden als Indexwerte mit einem analytischen Messintervall von 0,05–10,00 ausgedrückt Indexeinheiten. Indexwerte <1,00 gelten als negativ (nicht reaktiv), während Werte >1,00 als positiv (reaktiv) betrachtet werden [1]

[1]. https://www.siemens-healthineers.com/en-us/laboratory-diagnostics/assays-by-diseases-conditions/infectious-disease-assays/sars-cov-2-igg-assay

Datenmanagement:

Demografische Daten der Probanden, einschließlich Merkmale, und Krankengeschichten, einschließlich Begleitmedikationen und Krankheitszustände/Zustände, werden für jeden Probanden vom jeweiligen Wohnsitz bereitgestellt und von Dateneingabespezialisten von Southlake Diagnostics in die REDCap-Cloud-Plattform (unten beschrieben) eingegeben. Die Dateneingabe wird von einem zweiten Spezialisten auf Richtigkeit der Eingabe überprüft. Für alle Eingabeparameter wie Größe, Gewicht, Alter, Medikamentennamen und Krankheitszustände wird standardisierte und genehmigte Terminologie verwendet, um eine einheitliche Dateneingabe zu gewährleisten. Die Dateneingabe wird vom Co-Principal Investigator (Dr. Robert Newton), der für diese Funktion verantwortlich ist, und dem leitenden Prüfarzt.

Statistische Methoden:

Das Labor stellt dem zertifizierten Statistiker eine Tabelle mit den Daten zur Verfügung, die als Ganzes und nach verschiedenen Parametern wie Geschlecht, Altersgruppen, bekannten Krankheitszuständen und Immunkompetenzen, körperlichen Merkmalen und Zeit nach der Impfung mit einer REDCap Cloud sortiert und analysiert werden Plattform (www.redcapcloud.com/). Diese Plattform ist eine fortschrittliche, konforme Software für die Verwaltung aller Arten von Daten im Zusammenhang mit klinischen Studien. Das System ist nach dem Medical Dictionary for Regulatory Activities (MEdDRA) Terminologie-zertifiziert, Clinical Data Interchange Standards Consortium (CDISC)-konform und nach ISO 27001 (International Standards Organization) zertifiziert. Die Daten werden mithilfe verschiedener Computerprogramme, die mit der Plattform verbunden sind, sortiert und auf statistische Signifikanz und Trends analysiert.

Informationen zur Gesamtdauer und Geschwindigkeit des Abfalls der Antikörperspiegel als Funktion der Zeit nach der Impfung sowie die Auswirkungen von Störfaktoren auf die Antikörperspiegel als Funktion der Zeit werden bestimmt. Informationen zu Antikörperspiegeln (IgG und gesamt) und Covid-19-Infektion oder -Reinfektion sowie zu dem ungefähren Zeitpunkt, zu dem möglicherweise eine Auffrischimpfung erforderlich ist, werden auch in Bezug auf die Antikörperspiegel eingeholt. Die große Anzahl an Probanden in der Gesamtstudie sollte statistische Zuordnungen zwischen Antikörperspiegeln und verschiedenen potenziellen Stör- und Einflussfaktoren ermöglichen. Die Daten werden vom Hauptprüfarzt und den Co-PIs überprüft.