Variazione dei livelli di anticorpi dopo le vaccinazioni SARS-CoV-2 (Covid-19). (Covid-19-Abs)

Soggetti:

Questo protocollo di studio sarà registrato con ClinicalTrails.gov e l'approvazione da parte di un comitato etico indipendente. A tutti i soggetti verranno fornite informazioni scritte dettagliate relative allo studio e sarà richiesto di dare il consenso scritto per partecipare allo studio. Gli investigatori raccoglieranno campioni di sangue dai residenti associati a oltre 300 case di cura, strutture di assistenza estesa e comunità over-55 che hanno accettato di partecipare allo studio al basale (se disponibile) e a 3, 6, 9 e 12 mesi dopo -vaccinazione con uno dei tre vaccini SARS-CoV-2 autorizzati. I campioni di plasma saranno analizzati da Southlake Diagnostics.

Lo studio includerà fino a 10.000 residenti maschi e femmine di case di cura, strutture di assistenza estesa e comunità di età superiore ai 55 anni, nonché il personale associato a queste strutture. Saranno raccolti i dati demografici dei soggetti, comprese le caratteristiche e le storie mediche, inclusi i farmaci concomitanti e gli stati/condizioni di malattia.

Raccolta di campioni di sangue:

Una procedura operativa standard (SOP) è stata sviluppata da Southlake Diagnostics per stabilire una procedura standardizzata per stabilire un luogo e un metodo sicuri e appropriati per ottenere campioni di sangue umano. Questa SOP incorpora i regolamenti e le raccomandazioni dell'Occupational Safety and Health Administration (OSHA) Needlestick Safety and Prevention Act (29 CFR 1910.1030). I prelievi di sangue condotti dal personale di Southlake Diagnostics si atterranno a questa SOP.

Lo standard OSHA sui patogeni a trasmissione ematica, (29 CFR 1910.1030) definisce l'uso richiesto di dispositivi taglienti ingegnerizzati per la sicurezza per qualsiasi ricerca clinica (inclusi prelievi di sangue e iniezioni). Tutto il personale che esegue prelievi di sangue umano è tenuto a utilizzare dispositivi taglienti ingegnerizzati per la sicurezza.

Il personale che esegue i prelievi è tenuto a indossare gli adeguati dispositivi di protezione individuale (DPI). Il team delle operazioni cliniche è responsabile di verificare che il personale di laboratorio che esegue i prelievi di sangue abbia una formazione ed esperienza adeguate nella conduzione del prelievo di sangue umano.

I campioni di sangue verranno prelevati da una vena appropriata come la vena cubitale mediana. I campioni di sangue di 3,0 ml saranno raccolti in provette per la raccolta del sangue BD Vacutainer contenenti litio-eparina utilizzando aghi di calibro 21-23. I campioni di sangue saranno confezionati in sacchetti di plastica a prova di perdite a rischio biologico e trasportati in contenitori isolati con impacchi freddi per garantire l'integrità dei campioni, se necessario. Il plasma sarà preparato mediante centrifugazione. I campioni di plasma verranno conservati a 2-8°C se non testati entro 8 ore e congelati se non testati entro 14 giorni.

Metodi analitici:

Gli anticorpi IgG contro SARS-CoV-2 nel plasma umano (litio-eparina) saranno determinati utilizzando il test Siemen's Atellica® IM SARS-CoV-2 IgG (sCOVG) (numero EUA: EUA202669) che è un test immunologico chemiluminescente destinato a test qualitativi e rilevazione semi-quantitativa degli anticorpi IgG utilizzando Atellica® IM Analyzer [1]. Questo test IgG SARS-CoV-2 rileva in modo specifico gli anticorpi IgG contro l'antigene del dominio di legame del recettore S1 (RBD). Gli anticorpi IgG contro SARS-CoV-2 sono generalmente rilevabili nel sangue diversi giorni dopo l'infezione iniziale o la vaccinazione. La durata del tempo in cui gli anticorpi sono presenti dopo la vaccinazione non è ben caratterizzata. Il test fornirà un'indicazione del livello di immunità fornito da un vaccino per il virus SARS-CoV-2 che causa COVID-19.

Il test Atellica IM sCOVG è un test immunologico sandwich a 2 fasi completamente automatizzato che utilizza la tecnologia della chemiluminescenza indiretta. Esiste una relazione diretta tra la quantità di anticorpo IgG SARS-CoV-2 presente in un campione di plasma del paziente e la quantità di relative unità di luce chemiluminescente (RLU) rilevate dal sistema. La preparazione delle curve master e l'esecuzione delle calibrazioni del sistema saranno eseguite secondo le istruzioni di produzione.

I risultati del test degli anticorpi IgG sono espressi come valori indice con un intervallo di misurazione analitico di 0,50-150,00 Unità indice. I campioni di plasma con valori di indice >150 saranno diluiti e testati nuovamente. I valori dell'indice <1.00 saranno considerati negativi (non reattivi) mentre i valori >1.00 saranno considerati positivi (reattivi) [1].

Gli anticorpi totali (IgM + IgG) contro SARS-CoV-2 nel plasma umano (litio-eparina) saranno determinati utilizzando il test Siemen's Atellica® IM SARS-CoV-2 Total (COV2T), che è un test immunologico chemiluminescente destinato alla rilevazione qualitativa di anticorpi totali utilizzando l'Atellica® IM Analyzer[1].

Il test Atellica IM COV2T è un test immunologico automatizzato che utilizza la tecnologia della chemiluminescenza indiretta [1]. I risultati del test degli anticorpi totali (IgM + IgG) sono espressi come valori indice con un intervallo di misurazione analitica di 0,05-10,00 Unità indice. I valori dell'indice <1.00 saranno considerati negativi (non reattivi) mentre i valori >1.00 saranno considerati positivi (reattivi) [1]

[1]. https://www.siemens-healthineers.com/en-us/laboratory-diagnostics/assays-by-diseases-conditions/infectious-disease-assays/sars-cov-2-igg-assay

Gestione dati:

I dati demografici dei soggetti, comprese le caratteristiche e le anamnesi, inclusi i farmaci concomitanti e gli stati/condizioni di malattia, saranno forniti per ciascun soggetto dalla rispettiva residenza e inseriti nella piattaforma cloud REDCap (descritta di seguito) dagli specialisti dell'inserimento dei dati impiegati da Southlake Diagnostics. L'inserimento dei dati sarà controllato da un secondo specialista per verificarne l'esattezza. Verrà utilizzata una terminologia standardizzata e approvata per tutti i parametri di inserimento come altezza, peso, età, nomi di farmaci e stati di malattia per garantire la coerenza dell'inserimento dei dati. L'inserimento dei dati sarà rivisto per verificarne l'accuratezza e la convalida da parte del Co-Principal Investigator (Dr. Robert Newton) che è responsabile di questa funzione, e il Principal Investigator.

Metodi statistici:

Il laboratorio fornirà allo statistico certificato un foglio di calcolo dei dati che saranno ordinati e analizzati nel loro insieme e secondo vari parametri come sesso, gruppi di età, stati patologici noti e immunocompetenze, caratteristiche fisiche e tempo dopo la vaccinazione utilizzando un REDCap Cloud piattaforma (www.redcapcloud.com/). Questa piattaforma è un software avanzato e conforme per la gestione di tutti i tipi di dati associati agli studi clinici. Il sistema è certificato terminologico Medical Dictionary for Regulatory Activities (MEDDRA), conforme al Clinical Data Interchange Standards Consortium (CDISC) e certificato International Standards Organization (ISO) 27001. I dati saranno ordinati e analizzati per significatività statistica e tendenze utilizzando vari programmi per computer associati alla piattaforma.

Saranno determinate informazioni riguardanti la durata complessiva e il tasso di declino dei livelli anticorpali in funzione del tempo post-vaccinazione, nonché gli effetti dei fattori confondenti sui livelli anticorpali in funzione del tempo. Verranno inoltre ottenute informazioni relative ai livelli di anticorpi (IgG e totali) e all'infezione o reinfezione da Covid-19 e all'ora approssimativa in cui potrebbe essere necessaria una dose di richiamo relativa ai livelli di anticorpi. L'elevato numero di soggetti nello studio complessivo dovrebbe consentire di effettuare associazioni statistiche tra i livelli anticorpali e vari fattori potenzialmente confondenti e influenzanti. I dati saranno esaminati dal Principal Investigator e dai Co-PI.