Alteração nos níveis de anticorpos após vacinas SARS-CoV-2 (Covid-19) (Covid-19-Abs)

Assuntos:

Este protocolo de estudo será registrado no ClinicalTrails.gov e aprovação por um comitê de ética independente. Todos os indivíduos receberão informações detalhadas por escrito sobre o estudo e serão obrigados a dar consentimento por escrito para participar do estudo. Os investigadores coletarão amostras de sangue de residentes associados a mais de 300 lares de idosos, instalações de cuidados prolongados e mais de 55 comunidades que concordaram em participar do estudo na linha de base (quando disponível) e em pontos de tempo de 3, 6, 9 e 12 meses após -vacinação com uma das três vacinas SARS-CoV-2 autorizadas. As amostras de plasma serão analisadas pela Southlake Diagnostics.

O estudo incluirá até 10.000 residentes masculinos e femininos de lares de idosos, instalações de cuidados prolongados e comunidades com mais de 55 anos, bem como funcionários associados a essas instalações. Serão coletados dados demográficos dos sujeitos, incluindo características e históricos médicos, incluindo medicamentos concomitantes e estados/condições de doenças.

Coleta de Amostras de Sangue:

Um procedimento operacional padrão (SOP) foi desenvolvido pela Southlake Diagnostics para estabelecer um procedimento padronizado para estabelecer um local e método seguro e apropriado para a obtenção de amostras de sangue humano. Este SOP incorpora regulamentos e recomendações da Lei de Segurança e Prevenção de Perfuração com Agulha (29 CFR 1910.1030) da Occupational Safety and Health Administration (OSHA). As coletas de sangue conduzidas pelo pessoal da Southlake Diagnostics obedecerão a este SOP.

O Padrão de Patógenos de Sangue da OSHA, (29 CFR 1910.1030) define o uso necessário de dispositivos cortantes de engenharia de segurança para qualquer pesquisa clínica (incluindo coleta de sangue e injeções). Todo o pessoal que realiza coletas de sangue humano é obrigado a usar dispositivos cortantes de engenharia de segurança.

O pessoal que conduz as coletas de sangue é obrigado a usar o equipamento de proteção individual (EPI) apropriado. A equipe de Operações Clínicas é responsável por verificar se o pessoal do laboratório que realiza coletas de sangue possui treinamento e experiência adequados na condução de amostras de sangue humano.

Amostras de sangue serão coletadas de uma veia apropriada como a veia cubital mediana. Amostras de sangue de 3,0 ml serão coletadas em tubos de coleta de sangue BD Vacutainer contendo lítio-heparina usando agulhas de calibre 21-23. As amostras de sangue serão acondicionadas em sacos plásticos de risco biológico à prova de vazamentos e transportadas em recipientes isolados com bolsas frias para garantir a integridade das amostras, conforme necessário. O plasma será preparado por centrifugação. As amostras de plasma serão armazenadas a 2-8°C se não forem testadas em 8 horas e congeladas se não forem testadas em 14 dias.

Métodos analíticos:

Os anticorpos IgG para SARS-CoV-2 no plasma humano (heparina-lítio) serão determinados usando o ensaio Siemens Atellica® IM SARS-CoV-2 IgG (sCOVG) (número EUA: EUA202669), que é um imunoensaio quimioluminescente destinado a análises qualitativas e detecção semi-quantitativa de anticorpos IgG usando o Atellica® IM Analyzer [1]. Este ensaio SARS-CoV-2 IgG detecta especificamente anticorpos IgG para o antígeno S1 do domínio de ligação ao receptor (RBD). Os anticorpos IgG para SARS-CoV-2 são geralmente detectáveis ​​no sangue vários dias após a infecção inicial ou vacinação. A duração do tempo em que os anticorpos estão presentes após a vacinação não está bem caracterizada. O teste dará uma indicação do nível de imunidade fornecido por uma vacina para o vírus SARS-CoV-2, que causa o COVID-19.

O ensaio Atellica IM sCOVG é um imunoensaio em sanduíche de 2 etapas totalmente automatizado que utiliza tecnologia quimioluminescente indireta. Existe uma relação direta entre a quantidade de anticorpo SARS-CoV-2 IgG presente em uma amostra de plasma do paciente e a quantidade relativa de unidades de luz quimioluminescentes (RLUs) detectadas pelo sistema. A preparação das curvas mestre e a realização das calibrações do sistema serão realizadas de acordo com as instruções de fabricação.

Os resultados do teste de anticorpos IgG são expressos como valores de índice com um intervalo de medição analítica de 0,50-150,00 Unidades de índice. Amostras de plasma com valores de índice >150 serão diluídas e testadas novamente. Valores de índice <1,00 serão considerados negativos (não reativos) enquanto valores >1,00 serão considerados positivos (reativos) [1].

Os anticorpos totais (IgM + IgG) para SARS-CoV-2 no plasma humano (lítio-heparina) serão determinados usando o ensaio Atellica® IM SARS-CoV-2 Total (COV2T) da Siemens, que é um imunoensaio quimioluminescente destinado à detecção qualitativa de anticorpos totais usando o Atellica® IM Analyzer[1].

O ensaio Atellica IM COV2T é um imunoensaio automatizado que utiliza tecnologia quimioluminescente indireta [1]. Os resultados do teste de anticorpos totais (IgM + IgG) são expressos como valores de índice com um intervalo de medição analítica de 0,05-10,00 Unidades de índice. Valores de índice <1,00 serão considerados negativos (não reativos) enquanto valores >1,00 serão considerados positivos (reativos) [1]

[1]. https://www.siemens-healthineers.com/en-us/laboratory-diagnostics/assays-by-diseases-conditions/infectious-disease-assays/sars-cov-2-igg-assay

Gestão de dados:

Os dados demográficos dos indivíduos, incluindo características e históricos médicos, incluindo medicamentos concomitantes e estados/condições de doenças, serão fornecidos para cada indivíduo pela respectiva residência e inseridos na plataforma de nuvem REDCap (descrita abaixo) por especialistas em entrada de dados empregados pela Southlake Diagnostics. A entrada de dados será verificada por um segundo especialista quanto à precisão da entrada. A terminologia padronizada e aprovada será usada para todos os parâmetros de entrada, como altura, peso, idade, nomes de drogas e estados de doença para garantir a consistência da entrada de dados. A entrada de dados será revisada quanto à precisão da entrada e validação pelo co-investigador principal (Dr. Robert Newton) que é responsável por esta função, e o Investigador Principal.

Métodos estatísticos:

O laboratório fornecerá ao estatístico certificado uma planilha com os dados que serão classificados e analisados ​​como um todo e de acordo com vários parâmetros como gênero, faixas etárias, doenças conhecidas e imunocompetências, características físicas e tempo após a vacinação usando um REDCap Cloud plataforma (www.redcapcloud.com/). Esta plataforma é um software avançado e compatível para o gerenciamento de todos os tipos de dados associados a estudos clínicos. O sistema é certificado pela terminologia do Medical Dictionary for Regulatory Activities (MEdDRA), compatível com o Clinical Data Interchange Standards Consortium (CDISC) e certificado pela International Standards Organization (ISO) 27001. Os dados serão classificados e analisados ​​quanto à significância estatística e tendências usando vários programas de computador associados à plataforma.

Serão determinadas informações sobre a duração geral e a taxa de declínio dos níveis de anticorpos em função do tempo pós-vacinação, bem como os efeitos de fatores de confusão nos níveis de anticorpos em função do tempo. Também serão obtidas informações sobre os níveis de anticorpos (IgG e total) e infecção ou reinfecção por Covid-19 e o tempo aproximado em que uma injeção de reforço pode ser necessária em relação aos níveis de anticorpos. O grande número de indivíduos no estudo geral deve permitir que associações estatísticas sejam feitas entre os níveis de anticorpos e vários fatores potencialmente confusos e influentes. Os dados serão revisados ​​pelo Investigador Principal e pelos Co-PIs.