Comparación del ensayo Quantiferon®-TB GOLD (en tubo) con la prueba cutánea de tuberculina para detectar la infección tuberculosa latente en pacientes con enfermedad hepática crónica evaluados para un trasplante de hígado o en espera

• Revisar y registrar los resultados de las pruebas/procedimientos (radiografías, tomografías computarizadas, etc.) que forman parte de la atención clínica del sujeto y los resultados pasarán a formar parte del registro de investigación. Además, los resultados de laboratorio (pruebas de función hepática, química, CBC con diff, PT e INR o PTT) se recopilarán de la historia clínica.
• Registre la lista de medicamentos que el sujeto está tomando. Recopile información sobre datos demográficos (dirección, número de teléfono, etc.), incluido el género, la raza y el origen étnico.
• Revisar y registrar el historial médico y social pasado

Los procedimientos de selección tomarán un total de aproximadamente 15 a 30 minutos y todos los sujetos serán vistos en la Clínica de Trasplante de Hígado. El investigador y los coordinadores de investigación revisarán el registro médico del sujeto para recopilar la información requerida sobre el historial médico del sujeto. Le preguntaremos al sujeto, si no se puede encontrar en el registro médico, sobre la exposición y el tratamiento de la TB en el pasado, los viajes al extranjero y el estado actual de residente (centro de atención a largo plazo, hogar, hospital, etc.)

Si el sujeto califica para el estudio de investigación, se someterá a los procedimientos experimentales que se enumeran a continuación. Estos procedimientos se realizarán durante la visita en la Clínica de Trasplante de Hígado.

Como parte de la evaluación del trasplante de hígado, a los sujetos se les extraerá sangre para diferentes tipos de pruebas. Cuando se obtenga la sangre, recolectaremos alrededor de 3 cc de sangre para la nueva prueba de TB. Esta recolección de la muestra de sangre ocurrirá mientras el sujeto se hace el análisis de sangre requerido antes del trasplante para que no tenga que pincharse dos veces con una aguja. Los resultados de las pruebas de esta investigación no estarán disponibles para el sujeto ni para los médicos, pero se compararán.

El sistema QuantiFERON®-TB Gold IT utiliza tubos de recolección de sangre especializados, que se utilizan para recolectar sangre total. La incubación de la sangre se produce en los tubos durante 16 a 24 horas, después de lo cual se recoge el plasma y se analiza la presencia de IFN-g producido en respuesta a los antígenos peptídicos.

El ensayo QFT-G (IT) se realizará de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Cellestis Ltd.). Se coloca un ml de sangre completa en tres tubos de ensayo separados, uno sin antígeno (control nulo), uno con antígenos de TB (ESAT-6, CFP-10 y TB7.7) y uno con fitohemaglutinina (mitógeno o control positivo). Los tres tubos se incubarán lo antes posible después de la recolección (dentro de las 16 horas) y se incubarán durante 16 a 24 horas a 37 °C. Después de este período de incubación, los tubos se centrifugarán. El plasma se retirará del tubo y se colocará en un recipiente de almacenamiento de plasma. Estos contenedores luego se congelarán para futuras mediciones de IFN-γ por ELISA. Cada institución realizará pruebas hasta este punto del proceso. Cada mes, las muestras de plasma se enviarán en hielo al Hospital de Edmonton en Alberta, Canadá. Las muestras se agruparán en lotes y luego se someterán al proceso de prueba ELISA de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Un resultado de ≥0,35 UI/mL en el tubo de antígeno de TB se considerará un resultado positivo. Si el nivel es inferior a este y el control de mitógeno es positivo (≥ 0,5 UI/mL), se registrará un resultado negativo. Si el nivel tanto en el antígeno de TB como en el tubo de mitógeno es inferior al umbral de positivo, se registrará un resultado indeterminado (anérgico). El tubo de antígeno nulo se ajusta a los niveles de fondo de IFN-γ y se resta del nivel de IFN-γ para el tubo de antígeno de TB y mitógeno.

Una vez hayamos recogido la muestra de sangre el sujeto habrá finalizado el estudio.