Comparação do ensaio Quantiferon®-TB GOLD (em tubo) com o teste cutâneo de tuberculina para detecção de infecção latente por tuberculose em pacientes com doença hepática crônica em avaliação ou aguardando transplante hepático

• Revise e registre os resultados dos exames/procedimentos (radiografias, tomografias computadorizadas, etc.) que fazem parte do atendimento clínico do sujeito e os resultados passarão a fazer parte do registro da pesquisa. Além disso, os resultados laboratoriais (testes de função hepática, química, hemograma completo com diferença, PT e INR ou PTT) serão coletados do prontuário médico.
• Registre a lista de medicamentos que o sujeito está tomando. Colete informações sobre dados demográficos (endereço, número de telefone, etc.), incluindo gênero, raça e etnia.
• Revise e registre o histórico médico e social passado

Os procedimentos de triagem levarão um total de cerca de 15 a 30 minutos e todos os participantes serão vistos na Clínica de Transplante de Fígado. O investigador e os coordenadores da pesquisa revisarão o prontuário médico do sujeito para coletar as informações necessárias sobre o histórico médico do sujeito. Perguntaremos ao sujeito, se não puder ser encontrado no prontuário médico, sobre exposição e tratamento anteriores à tuberculose, viagens ao exterior e status de residente atual (instalação de cuidados de longo prazo, casa, hospital, etc.)

Se o sujeito se qualificar para o estudo de pesquisa, o sujeito será submetido aos procedimentos experimentais listados abaixo. Esses procedimentos serão realizados durante a visita na Clínica de Transplante de Fígado.

Como parte da avaliação do transplante de fígado, os indivíduos terão sangue retirado para diferentes tipos de testes. Quando o sangue for obtido, coletaremos cerca de 3cc de sangue para o novo teste de TB. Essa coleta da amostra de sangue ocorrerá enquanto o sujeito estiver fazendo o exame de sangue pré-transplante necessário, para que não precise ficar preso duas vezes com uma agulha. Os resultados deste teste de pesquisa não estarão disponíveis para o sujeito ou para os médicos, mas serão comparados.

O sistema QuantiFERON®-TB Gold IT usa tubos de coleta de sangue especializados, que são usados ​​para coletar sangue total. A incubação do sangue ocorre nos tubos por 16 a 24 horas, após o que o plasma é colhido e testado quanto à presença de IFN-g produzido em resposta aos antígenos peptídicos.

O ensaio QFT-G (IT) será realizado de acordo com as instruções do fabricante (Cellestis Ltd.). Um mL de sangue total é colocado em três tubos de ensaio separados, um sem antígeno (controle nulo), um com antígenos TB (ESAT-6, CFP-10 e TB7.7) e um com fitohemaglutinina (mitógeno ou controle positivo). Os três tubos serão incubados o mais rápido possível após a coleta (dentro de 16 horas) e incubados por 16 a 24 horas a 37°C. Após esse período de incubação, os tubos serão centrifugados. O plasma será removido do tubo e colocado em um recipiente de armazenamento de plasma. Esses recipientes serão então congelados para futura medição de IFN-γ por ELISA. Cada instituição realizará testes até este ponto do processo. A cada mês, amostras de plasma serão enviadas em gelo para o Edmonton Hospital em Alberta, Canadá. As amostras serão agrupadas e, em seguida, submetidas ao processo de teste ELISA de acordo com as instruções do fabricante.

Um resultado ≥0,35 UI/mL no tubo de antígeno TB será considerado um resultado positivo. Se o nível for menor que isso e o controle de mitógeno for positivo (≥ 0,5 UI/mL), um resultado negativo será registrado. Se o nível no antígeno da TB e no tubo do mitógeno for menor que o limite para positivo, um resultado indeterminado (anérgico) será registrado. O tubo de antígeno nulo ajusta-se aos níveis de fundo de IFN-γ e é subtraído do nível de IFN-γ para o antígeno de TB e o tubo de mitógeno.

Depois de coletarmos a amostra de sangue, o sujeito terá concluído o estudo.