Confronto tra il dosaggio Quantiferon®-TB GOLD (in provetta) e il test cutaneo alla tubercolina per il rilevamento di un'infezione tubercolare latente in pazienti con malattia epatica cronica valutati per o in attesa di trapianto di fegato

• Rivedere e registrare i risultati dei test/procedure (radiografie, scansioni TC, ecc.) che fanno parte dell'assistenza clinica del soggetto ei risultati diventeranno parte della documentazione della ricerca. Inoltre, i risultati di laboratorio (test di funzionalità epatica, chimica, CBC con diff, PT e INR o PTT) saranno raccolti dalla cartella clinica.
• Registrare l'elenco dei farmaci che il soggetto sta assumendo. Raccogli informazioni sui dati demografici (indirizzo, numero di telefono, ecc.) inclusi sesso, razza ed etnia.
• Rivedere e registrare la storia medica e sociale passata

Le procedure di screening richiederanno un totale di circa 15-30 minuti e tutti i soggetti saranno visti nella Clinica del trapianto di fegato. Lo sperimentatore e i coordinatori della ricerca esamineranno la cartella clinica del soggetto per raccogliere le informazioni richieste sulla storia medica del soggetto. Chiederemo al soggetto, se non può essere trovato nella cartella clinica, l'esposizione e il trattamento passato della tubercolosi, i viaggi all'estero e lo stato di residente attuale (struttura di assistenza a lungo termine, casa, ospedale, ecc.)

Se il soggetto si qualifica per lo studio di ricerca, il soggetto sarà sottoposto alle procedure sperimentali elencate di seguito. Queste procedure si svolgeranno durante la visita nella Clinica del Trapianto di Fegato.

Come parte della valutazione del trapianto di fegato, ai soggetti verrà prelevato il sangue per diversi tipi di test. Quando il sangue sarà ottenuto, raccoglieremo circa 3 cc di sangue per il nuovo test della tubercolosi. Questa raccolta del campione di sangue avverrà mentre il soggetto sta ricevendo le necessarie analisi del sangue pre-trapianto in modo che non debbano rimanere incastrati due volte con un ago. I risultati di questo test di ricerca non saranno disponibili al soggetto o ai medici ma saranno confrontati.

Il sistema QuantiFERON®-TB Gold IT utilizza speciali provette per la raccolta del sangue, utilizzate per la raccolta del sangue intero. L'incubazione del sangue avviene nelle provette per 16-24 ore, dopodiché il plasma viene raccolto e testato per la presenza di IFN-g prodotto in risposta agli antigeni peptidici.

Il test QFT-G (IT) verrà eseguito secondo le istruzioni del produttore (Cellestis Ltd.). Un mL di sangue intero viene posto in tre provette separate, una contenente nessun antigene (controllo nullo), una con antigeni TB (ESAT-6, CFP-10 e TB7.7) e una con fitoemagglutinina (mitogeno o controllo positivo). Le tre provette saranno incubate appena possibile dopo la raccolta (entro 16 ore) e incuberanno per 16-24 ore a 37°C. Dopo questo periodo di incubazione, le provette saranno centrifugate. Il plasma verrà rimosso dalla provetta e posto in un contenitore per la conservazione del plasma. Questi contenitori verranno quindi congelati per la futura misurazione dell'IFN-γ mediante ELISA. Ogni istituzione eseguirà i test fino a questo punto del processo. Ogni mese, i campioni di plasma verranno inviati sul ghiaccio all'ospedale di Edmonton in Alberta, in Canada. I campioni verranno suddivisi in lotti e quindi sottoposti al processo di test ELISA secondo le istruzioni del produttore.

Un risultato di ≥0,35 IU/mL nella provetta dell'antigene TB sarà considerato un risultato positivo. Se il livello è inferiore a questo valore e il controllo del mitogeno è positivo (≥ 0,5 IU/mL), verrà registrato un risultato negativo. Se il livello sia nell'antigene TB che nella provetta del mitogeno è inferiore alla soglia per il positivo, verrà registrato un risultato indeterminato (anergico). La provetta dell'antigene zero si adatta ai livelli di IFN-γ di fondo e viene sottratta dal livello di IFN-γ per l'antigene della tubercolosi e la provetta del mitogeno.

Una volta raccolto il campione di sangue, il soggetto avrà completato lo studio.