Una validación de un pronóstico basado en la genómica en trauma severo

Objetivo Específico: Validar prospectivamente un test genómico rápido obtenido a partir de subpoblaciones de leucocitos en sangre de pacientes gravemente traumatizados en las primeras 24 horas tras el ingreso, que pueda ser utilizado para discriminar aquellos pacientes que tendrán una trayectoria clínica complicada y, por tanto, serían buenos candidatos. para terapias intervencionistas e inmunomoduladoras.

Después de una lesión traumática contusa grave y durante la recuperación, se producen alteraciones en el transcriptoma leucocitario. Por lo tanto, proponemos que una señal de transcriptoma de leucocitos basada en la expresión de los 63 leucocitos totales validados o los genes 181 PMN se puede usar para identificar a los pacientes que están en riesgo de un resultado clínico complicado, ya sea solo o cuando se combina con predictores anatómicos o fisiológicos. El objetivo de este ensayo clínico es validar la capacidad predictiva de este pronóstico basado en transcriptomas.

Este es un estudio observacional no intervencionista de 200 pacientes gravemente heridos con trauma cerrado y 40 voluntarios sanos. Los criterios de entrada serán los mismos que se han utilizado durante los últimos ocho años con la Beca Glue. Los pacientes con lesiones contusas graves que cumplan con los criterios de inclusión se someterán a un examen genómico rápido de leucocitos al ingreso y a la mañana siguiente (~24 horas). Se tomarán muestras de sangre adicionales a los 4, 7, 14, 21 y 28 días, o mientras los pacientes estén en la unidad de cuidados intensivos quirúrgicos o de trauma, para el banco.

Durante un período de cuatro años, ingresaremos 240 sujetos de la Universidad de Florida y de la Universidad de Washington en Harborview Medical Center. En los sujetos traumatizados, se recogerán muestras de sangre al ingreso, los días 1, 4, 7, 14, 21 y 28, o hasta el alta de UCI o fallecimiento. Se recolectará un total de 4 a 5 ml de sangre en cada punto de tiempo. En los voluntarios sanos, se recogerá una muestra de sangre de una sola vez.

Evaluación y consentimiento: el personal del estudio identificará a los pacientes con traumatismos después de su presentación en la sala de emergencias. Se contactará al sujeto o al pariente legal más cercano para obtener su consentimiento dentro de las 96 horas si el paciente cumple con los criterios de ingreso. Solicitamos un consentimiento demorado en esta población de pacientes durante 96 horas debido a la gravedad de las lesiones, la naturaleza vulnerable del paciente en este momento temprano y el desafío de comunicarse con los representantes legales del paciente. Si no se obtiene el consentimiento informado dentro de las 96 horas, todas las muestras de sangre y los datos recolectados serán descartados.

Los sujetos voluntarios sanos se identificarán entre la población general por medio de folletos publicitarios colocados en las respectivas universidades. Los volantes proporcionarán información de contacto de los laboratorios. Los sujetos sanos serán evaluados a través de criterios de inclusión/exclusión al momento del contacto. Si es apropiado para la participación, se consultará al sujeto para obtener su consentimiento.

La sangre se recolectará del acceso existente o por punción venosa, si es necesario. La sangre se colocará rápidamente en hielo y se transferirá al laboratorio donde se procesará para lisados ​​celulares y plasma.

Todos los demás datos clínicos relevantes y mediciones hemodinámicas se recopilarán diariamente mientras el paciente esté hospitalizado.

• Información demográfica.
• Registros médicos pasados ​​y presentes.
• Laboratorio, microbiología y todos los demás resultados de las pruebas
• Rayos X, tomografía computarizada, resonancia magnética, ecografía y todos los demás resultados de pruebas de imágenes
• Registros sobre cualquier medicamento recibido durante la admisión
• Registros de examen físico durante la admisión
• Registros de todos los signos vitales y monitorización hemodinámica durante el ingreso
• Registros de cualquier procedimiento o intervención durante el ingreso
• Registros de cualquier procedimiento o intervención durante el ingreso hospitalario
• Condición en la instalación de descarga y descarga.

Cada uno de los dos sitios clínicos mantendrá la responsabilidad de la recopilación y el almacenamiento de datos clínicos. Se utilizará REDCap (Research Electronic Data Capture) para la recopilación de datos clínicos. Es una aplicación segura basada en la Web diseñada para respaldar la captura de datos de formularios de informes de casos tradicionales. Los lisados ​​celulares obtenidos en el Centro Médico de la Universidad de Washington-Harborview se enviarán a la Universidad de Florida para análisis genómicos, mientras que las muestras de plasma recolectadas en el Hospital Shands de la Universidad de Florida se enviarán a la Universidad de Washington para análisis de citoquinas por Luminex™ . A intervalos anuales, se realizarán transferencias electrónicas de datos de la Universidad de Florida a la Universidad de Washington tanto de datos clínicos codificados no identificables como de datos genómicos y de citoquinas.

Las extracciones de sangre relacionadas con el estudio se realizarán junto a la cama de manera compatible con el estándar de atención clínica o en nuestros laboratorios para voluntarios sanos. Los tubos utilizados para las extracciones de sangre relacionadas con el estudio se etiquetarán con el número de estudio único y no llevarán ningún identificador de paciente. La clave que vincula el número único del paciente y los identificadores personales de los pacientes se almacenará en un archivo cifrado y protegido con contraseña y solo será accesible para el IP y el equipo de investigación. Todos los datos clínicos recopilados por los pacientes se almacenarán en un gabinete ubicado en la oficina del IP o del equipo de investigación. El ordenador utilizado para el almacenamiento de datos estará ubicado en la oficina del PI o personal investigador que siempre estará bajo llave. La computadora estará protegida con contraseña y encriptada.

Hemos basado nuestra evaluación del número de sujetos en nuestro conjunto de datos preliminares de 1637 sujetos con trauma severo. En ese estudio, de los 1637 sujetos, el 31 % o 507 pacientes tuvieron un tiempo de recuperación de menos de cinco días y se pudo identificar que tuvieron un resultado sin complicaciones. Por el contrario, 442 pacientes o el 27 % tuvieron un resultado complicado, definido por muerte tardía o MOF que duró más de 14 días. Suponiendo una frecuencia similar de pacientes complicados y no complicados en los 200 sujetos, esperaríamos que 62 de estos sujetos fueran dados de alta dentro de los 5 días sin lesión orgánica y 54 sujetos con insuficiencia orgánica prolongada y/o muerte tardía. Estos números están dentro de los rangos requeridos para la validación estadística de estos diferentes modelos.

Anticipamos que nuestra tasa de consentimiento general para este estudio observacional con riesgo mínimo será del 75 %, lo que significa que para lograr una tasa de acumulación de 25 sujetos de trauma por año en cada institución, tendremos que tener 34 sujetos por año que cumplan con los criterios de ingreso. No esperamos ninguna dificultad para acumular estos 200 sujetos durante un período de cuatro años en los sitios participantes. Ambos son centros de trauma de Nivel 1 que tienen exceso de capacidad para completar los estudios propuestos.

En este protocolo, la única intervención específica del estudio será la extracción de sangre. Los riesgos de extraer sangre de una vena incluyen molestias en el lugar de la punción; posible hematoma e hinchazón alrededor del sitio de punción; rara vez una infección; y, con poca frecuencia, desmayo por el procedimiento. La invasión de la privacidad se anulará con el uso de codificación para todos los datos y especímenes recolectados.

No hay beneficios directos para los sujetos de estudio por su participación. Esta investigación puede beneficiar a la sociedad en el futuro. Este estudio puede algún día resultar en nuevas pruebas o tratamientos, o puede ayudar a prevenir o curar enfermedades. No existe ningún conflicto de intereses para el PI o sub-investigador.