Estudio de Acarbosa en Longevidad (SAIL)

Otro: Acarbosa primero

Los participantes tomarán acarbosa tres veces al día durante 10 semanas (titulación durante 4 semanas, mantenimiento 6 semanas). Después de un lavado de dos semanas, los participantes tomarán placebo tres veces al día durante un total de 10 semanas (titulación durante 4 semanas, mantenimiento 6 semanas).

Droga: Acarbosa

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Otros nombres:

• Precosa

Otro: Placebo

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Otro: Placebo primero

Los participantes tomarán placebo tres veces al día durante 10 semanas (titulación durante 4 semanas, mantenimiento 6 semanas). Después de un lavado de dos semanas, los participantes tomarán acarbosa tres veces al día durante un total de 10 semanas (titulación durante 4 semanas, mantenimiento 6 semanas).

Droga: Acarbosa

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Otros nombres:

• Precosa

Otro: Placebo

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Expresión del gen tisular usando secuenciación de ARN (ARN-seq)

La diferencia en la expresión génica en el tejido adiposo muscular y abdominal usando ARN-seq debía ser evaluado para evaluar los efectos de los metabolitos absorbidos en los tejidos. El músculo y el adiposo son tejidos metabólicos clave que sufren cambios significativos relacionados con la edad y juegan un papel activo en la patogénesis del envejecimiento. Se obtuvieron muestras de tejido adiposo muscular y abdominal y se homogeneizaron con homogeneizador de tejido. La posterior extracción de ARNm y el análisis de la expresión génica (ARN SEQ) se realizó utilizando secuenciación de extremo único multiplexado de 100 pb. La expresión diferencial entre muestras y después de acarbose y después de placebo debía haberse determinado utilizando un enfoque de modelo binomial negativo implementado en el paquete DESEQ. Los resultados debían haber sido resumidos por el brazo de estudio y posteriormente analizados.

MicroARN de suero (miRNA)

Deberían evaluar las diferencias en la expresión de miARN entre los brazos de acarbosa y placebo. Se utilizará 1 mililitro (ml) de sueros recolectados del procesamiento de muestras de sangre para la secuenciación de miARN. Se extrajo miRNA de las muestras de suero usando el kit Mirneasy de acuerdo con el protocolo del fabricante y las bibliotecas de miRNA. Se añadió MIMIC CEL-MIR-39 a cada muestra antes de la extracción, para la normalización, y secuenciado utilizando secuenciación de un solo extremo multiplexado en un Illumina HISEQ2500. Los miRNA son ARN pequeños y no codificantes que regulan la expresión génica a un nivel postranscripcional. Debido a su estabilidad en la sangre, los cambios en la expresión de miARN circulante pueden servir como marcadores para patologías relacionadas con la edad y los investigadores tienen perfiles de miARN de linfocitos B correlacionados en el plasma asociados con una longevidad excepcional. Los recuentos de lectura debían haber sido resumidos por el brazo de estudio y analizar estadísticamente utilizando una prueba de Wilcoxon para comparar los niveles de expresión de miARN.

Microbioma fecal para secuenciación génica de ADN ribosómico 16S (ARDN)

Los niveles de expresión de secuencia del gen 16S RDNA se habían evaluado después de la recolección de muestras de heces. Se proporcionó un kit de recolección de heces de microbioma fecal a los participantes para la autocolección de muestras y se devolvió para recibir tratamiento y análisis. La secuenciación de ADNr 16S se había realizado para evaluar la agrupación de especies bacterianas. El ADN microbiano fecal se extrajo de las muestras y se eluyó al ADN dividido en 1 alícuotas de centímetro cúbico (CC) y se envió para la secuenciación de ADNc 16S. Los datos de secuencia RAW 16S se convirtieron en perfiles taxonómicos agrupando secuencias 16S en unidades taxonómicas operativas (OTU) basadas en la similitud de secuencia, así como al generar la generación de novo otu utilizando una herramienta de picking de novo otu. Se había utilizado una herramienta básica de búsqueda de alineación local (BLAST) para analizar el representante de cada OTU en una base de datos. Los gráficos de abundancia relativos para la comparación visual de las abundancias microbianas debían haber sido generadas, resumidas e informadas por el brazo de estudio.