Studie akarbózy v dlouhověkosti (SAIL)

Jiný: Nejprve akarbóza

Účastníci budou užívat akarbózu třikrát denně po dobu 10 týdnů (titrace po dobu 4 týdnů, udržovací 6 týdnů). Po dvoutýdenním vymývání budou účastníci užívat placebo třikrát denně po dobu celkem 10 týdnů (titrace po dobu 4 týdnů, udržovací 6 týdnů).

Lék: Akarbóza

viz popis ramene

Ostatní jména:

• Precose

Jiný: Placebo

Viz popis ramene

Jiný: Nejprve placebo

Účastníci budou užívat placebo třikrát denně po dobu 10 týdnů (titrace po dobu 4 týdnů, udržovací léčba po dobu 6 týdnů). Po dvoutýdenním vymývání budou účastníci užívat akarbózu třikrát denně po dobu celkem 10 týdnů (titrace po dobu 4 týdnů, udržovací 6 týdnů).

Lék: Akarbóza

viz popis ramene

Ostatní jména:

• Precose

Jiný: Placebo

Viz popis ramene

Exprese tkáňového genu pomocí sekvenování RNA (RNA-seq)

Rozdíl v genové expresi ve svalové a břišní tukové tkáni pomocí RNA-seq měl být vyhodnocen, aby se posoudily účinky absorbovaných metabolitů na tkáně. Svalové a tukové jsou klíčové metabolické tkáně, které podléhají významným změnám souvisejícím s věkem a hrají aktivní roli v patogenezi stárnutí. Byly získány a homogenizovány vzorky tkáně s tkáňovým homogenizátorem tkáně. Následná extrakce mRNA a analýza genové exprese (RNA SEQ) byla provedena pomocí multiplexovaného sekvenování 100BP jednokomového sekvenování. Diferenciální exprese mezi vzorky a po acarbose a po placebu by měla být stanovena pomocí negativního binomického modelového přístupu implementovaného v balíčku DESEQ. Výsledky měly být shrnuty studijní ramenem a následně analyzovány.

Sérové ​​mikroRNA (miRNA)

Měly být vyhodnoceny rozdíly v expresi miRNA mezi acarbose a placebo rameny. Pro sekvenování miRNA se použije 1 mililitr (ml) séra odebraných ze zpracování vzorků krve. MiRNA byla extrahována ze vzorků séra pomocí miRneasy soupravy v souladu s protokolem výrobce a byly připraveny miRNA knihovny. Mimic CEL-MIR-39 byl přidán do každého vzorku před extrakcí, pro normalizaci a sekvenován pomocí multiplexovaného jednokomového sekvenování na Illumina HiSeq2500. MiRNA jsou malé, nekódující RNA, které regulují genovou expresi na post-transkripční úrovni. Vzhledem k jejich stabilitě v krvi mohou změny v expresi cirkulující miRNA sloužit jako markery pro patologie související s věkem a vyšetřovatelé korelovaly profily miRNA B-lymfocytů v plazmě spojené s výjimečnou dlouhověkostí. Počty čtení měly být shrnuty studiem ARM a statisticky analyzovány pomocí Wilcoxonského testu k porovnání hladin exprese miRNA.

Fekální mikrobiom pro 16S ribozomální DNA (RDNA) genové sekvenování genu

Hladiny exprese genové sekvence 16S RDNA měly být hodnoceny po sběru vzorků stolice. Účastníkům byla poskytnuta souprava pro sběr stolice stolice fekálních mikrobiomů pro samosprávu vzorků a vráceno pro léčbu a analýzu. Sekvenování RDNA 16S mělo být provedeno za účelem posouzení shlukování bakteriálních druhů. Fekální mikrobiální DNA byla extrahována ze vzorků a eluovaná DNA rozdělena do 1 kubických centimetrů (CC) alikvotů a odeslána pro sekvenování 16S RDNA. Sekvenční data RAW 16S byla převedena na taxonomické profily seskupením 16S sekvencí do operačních taxonomických jednotek (OTUS) na základě podobnosti sekvence a také generováním generování de-novo otu pomocí nástroje pro výběr otu. Základní nástroj pro vyhledávání lokálního zarovnání (BLAST) měl být použit k analýze zástupce každého OTU proti databázi. Relativní grafy hojnosti pro vizuální srovnání mikrobiálních hojnosti měly být vytvořeny, shrnuty a hlášeny studie ARM.