Estudo da Acarbose na Longevidade (SAIL)

Outro: Acarbose primeiro

Os participantes tomarão acarbose três vezes ao dia durante 10 semanas (titulação durante 4 semanas, manutenção 6 semanas). Após uma lavagem de duas semanas, os participantes tomarão placebo três vezes ao dia por um total de 10 semanas (titulação durante 4 semanas, manutenção 6 semanas).

Medicamento: Acarbose

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Outros nomes:

• Precose

Outro: Placebo

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Outro: Placebo primeiro

Os participantes tomarão placebo três vezes ao dia durante 10 semanas (titulação durante 4 semanas, manutenção 6 semanas). Após uma lavagem de duas semanas, os participantes tomarão acarbose três vezes ao dia por um total de 10 semanas (titulação durante 4 semanas, manutenção 6 semanas).

Medicamento: Acarbose

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Outros nomes:

• Precose

Outro: Placebo

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Expressão do gene do tecido usando sequenciamento de RNA (RNA-seq)

A diferença na expressão gênica no tecido adiposo muscular e abdominal usando RNA-seq foi avaliado para avaliar os efeitos dos metabólitos absorvidos nos tecidos. Músculos e adiposos são tecidos metabólicos-chave que sofrem mudanças significativas relacionadas à idade e desempenham um papel ativo na patogênese do envelhecimento. As amostras de tecido adiposo muscular e abdominal foram obtidas e homogeneizadas com homogeneizador de tecido. A extração subsequente de mRNA e análise da expressão gênica (RNA seq) foi realizada usando sequenciamento de ponta de 100 pbp multiplexada. A expressão diferencial entre amostras e após acarbose e após o placebo deveria ter sido determinada usando uma abordagem de modelo binomial negativo implementado no pacote DESEQ. Os resultados deveriam ter sido resumidos pelo braço de estudo e subsequentemente analisados.

MicroRNA sérico (miRNA)

As diferenças na expressão do miRNA entre os braços de acarbose e placebo deveriam ter sido avaliados. 1 mililitro (ML) de soros coletados do processamento de amostras de sangue será usado para o sequenciamento de miRNA. O miRNA foi extraído das amostras de soro usando o kit Mirneasy, de acordo com o protocolo do fabricante e as bibliotecas de miRNA foram preparadas. O MIMIC CEL-MIR-39 foi adicionado a cada amostra antes da extração, para normalização e sequenciada usando sequenciação de extremidade única multiplexada em um Illumina Hiseq2500. O miRNA são RNAs pequenos e não codificadores que regulam a expressão gênica em um nível pós-transcricional. Devido à sua estabilidade no sangue, as mudanças na expressão do miRNA circulante podem servir como marcadores de patologias e investigadores relacionados à idade, correlacionaram perfis de miRNA de linfócitos B no plasma associado à longevidade excepcional. As contagens de leitura deveriam ter sido resumidas pelo braço de estudo e analisadas estatisticamente usando um teste de Wilcoxon para comparar os níveis de expressão de miRNA.

Microbioma fecal para sequenciamento de genes de DNA ribossômico 16S (rDNA)

Os níveis de expressão de sequência do gene 16S rDNA foram avaliados após a coleta de amostras de fezes. Um kit de coleta de fezes de microbioma fecal foi fornecido aos participantes da auto-coleta de amostras e devolvido para tratamento e análise. O seqüenciamento de 16S rDNA deveria ter sido realizado para avaliar o agrupamento de espécies bacterianas. O DNA microbiano fecal foi extraído das amostras e o DNA eluído dividido em alíquotas de 1 centímetro cúbico (CC) e enviado para o sequenciamento 16S rDNA. Os dados de sequência 16S RAW foram convertidos em perfis taxonômicos, agrupando sequências 16S em unidades taxonômicas operacionais (OTUs) com base na similaridade de sequência, bem como na geração de geração de-Novo usando uma ferramenta de picagem de novo otu. Uma ferramenta básica de pesquisa de alinhamento local (BLAST) deveria ter sido usada para analisar o representante de cada OTU em um banco de dados. Gráficos de abundância relativa para comparação visual de abundância microbiana deveriam ter sido gerados, resumidos e relatados pelo braço de estudo.