Badanie akarbozy w długowieczności (SAIL)

Inny: Najpierw akarboza

Uczestnicy będą przyjmować akarbozę trzy razy dziennie przez 10 tygodni (miareczkowanie przez 4 tygodnie, leczenie podtrzymujące przez 6 tygodni). Po dwutygodniowym wymyciu uczestnicy będą przyjmować placebo trzy razy dziennie przez łącznie 10 tygodni (miareczkowanie przez 4 tygodnie, leczenie podtrzymujące przez 6 tygodni).

Lek: Akarboza

patrz opis ramienia

Inne nazwy:

• Prez

Inny: Placebo

Zobacz opis ramienia

Inny: Najpierw placebo

Uczestnicy będą przyjmować placebo trzy razy dziennie przez 10 tygodni (miareczkowanie przez 4 tygodnie, leczenie podtrzymujące przez 6 tygodni). Po dwutygodniowym wypłukaniu uczestnicy będą przyjmować akarbozę trzy razy dziennie przez łącznie 10 tygodni (miareczkowanie przez 4 tygodnie, leczenie podtrzymujące przez 6 tygodni).

Lek: Akarboza

patrz opis ramienia

Inne nazwy:

• Prez

Inny: Placebo

Zobacz opis ramienia

Ekspresja genu tkankowego za pomocą sekwencjonowania RNA (RNA-Seq)

Różnica w ekspresji genów w tkance tłuszczowej mięśni i brzusznej za pomocą RNA-Seq miała zostać oceniona w celu oceny wpływu absorbowanych metabolitów na tkanki. Mięsień i tłuszcz są kluczowymi tkankami metabolicznymi, które ulegają znacznym zmianom związanym z wiekiem i odgrywają aktywną rolę w patogenezie starzenia. Próbki tkanki tłuszczowej mięśni i brzusznej uzyskano i homogenizowano za pomocą homogenizatora tkankowego. Późniejszą ekstrakcję mRNA i analizę ekspresji genów (RNA SEQ) przeprowadzono przy użyciu multipleksowanego sekwencjonowania pojedynczego końca 100BP. Różnicowa ekspresja między próbkami i po akarbozie i po placebo miała zostać określona przy użyciu ujemnego modelu dwumianowego zaimplementowanego w pakiecie DESEQ. Wyniki miały zostać podsumowane za pomocą ramienia badawczego, a następnie przeanalizowane.

Serum MicroRNA (miRNA)

Oceniono różnice w ekspresji miRNA między ramionami akarbozy i placebo. Do sekwencjonowania miRNA zostanie wykorzystany 1 mililitr (ml) surowicy ze zebranych z przetwarzania próbek krwi. MiRNA ekstrahowano z próbek surowicy przy użyciu zestawu miRneasy zgodnie z protokołem producenta i przygotowano biblioteki miRNA. Do każdej próbki dodano do każdej próbki CEL-MIR-39 MIMIC do normalizacji i zsekwencjonowano przy użyciu multipleksowanego sekwencjonowania pojedynczego końca na Illumina Hiseq2500. miRNA są małymi, niekodującymi RNA, które regulują ekspresję genów na poziomie potranskrypcyjnym. Ze względu na ich stabilność we krwi zmiany ekspresji krążącego miRNA mogą służyć jako markery dla patologii związanych z wiekiem, a badacze skorelowali profile mifocytów limfocytów B w osoczu związanym z wyjątkową długowiecznością. Liczba odczytu miała zostać podsumowana przez badanie ARM i statystycznie analizowane przy użyciu testu Wilcoxona w celu porównania poziomów ekspresji miRNA.

Mikrobiom kałowy dla sekwencjonowania genu 16S Rybosomalnego (RDNA)

Poziomy ekspresji sekwencji sekwencji genu 16S RDNA miały zostać ocenione po pobraniu próbek kału. Zestaw zbiórki stołka mikrobiomu został przekazany uczestnikom do samodzielnego gromadzenia próbek i zwrócony do leczenia i analizy. Sekwencjonowanie 16S RDNA miało zostać przeprowadzone w celu oceny grupowania gatunków bakteryjnych. DNA drobnoustrojów kałowych ekstrahowano z próbek i eluowano DNA podzielone na 1 podwielokrotności centymetra sześciennego (CC) i wysłano do sekwencjonowania 16S RDNA. Dane sekwencji RAW 16S zostały przekonwertowane na profile taksonomiczne, grupując sekwencje 16S na operacyjne jednostki taksonomiczne (OTU) oparte na podobieństwie sekwencji, a także przez generowanie generacji De-Novo OTU przy użyciu narzędzia do pobierania OTU de novo. Podstawowe lokalne narzędzie wyszukiwania wyrównania (BLAST) miało zostać wykorzystane do analizy przedstawiciela każdego OTU pod kątem bazy danych. Względne wykresy obfitości do wzrokowego porównywania obfitości drobnoustrojów miały zostać wygenerowane, streszczone i zgłoszone przez Study Arm.