Parámetros transcripcionales e inmunológicos de respuesta a belinumab

El exceso del factor activador de células B (BAFF) causa la enfermedad del lupus al ejercer efectos coestimuladores en el compartimento de las células B, pero también en una variedad de subconjuntos que no son células B, como las células T colaboradoras y los monocitos/células dendríticas. Las recomendaciones de la European League Against Rheumatism (EULAR) actualizadas de 2019 para el LES recomiendan el uso de belimumab (anti-BAFF mAb) en la enfermedad persistentemente activa o con brotes en función de la evidencia de eficacia, reducción de los brotes y acumulación de daños en los órganos sin aumentar el riesgo de infecciones. Aún así, belimumab generalmente se reserva para casos refractarios establecidos. Es concebible que un uso más temprano pueda detener la progresión de la enfermedad, especialmente prevenir brotes y disfunciones en los órganos principales. Los investigadores han completado un análisis genético y transcriptómico combinado en la sangre periférica de pacientes con LES y han caracterizado distintas firmas genéticas para actividad/exacerbación y gravedad de la enfermedad. Usando técnicas de aprendizaje automático, los investigadores pueden predecir que los pacientes con LES probablemente desarrollarán una afectación de órganos importantes. Los estudios de perfiles genéticos e in vitro en monocitos de lupus purificados indican que estas células existen, bajo el efecto del interferón tipo I, en un estado metabólico y autorreactivo de "alerta máxima" (que recuerda a la "inmunidad entrenada"), lo que puede contribuir al riesgo de brotes , lesiones tisulares pero también comorbilidades importantes observadas en el LES, en particular aterosclerosis acelerada e infecciones. Sobre la base de la experiencia clínica acumulada hasta el momento, es probable que belimumab pueda neutralizar estas firmas moleculares de los brotes y la progresión de la enfermedad sin interferir con las vías inmunitarias de defensa del huésped.

Los investigadores proponen realizar inicialmente la secuenciación del ARN de la sangre completa, en una cohorte de 80 pacientes con LES que recibirán belimumab como parte de la práctica clínica estándar, para evaluar la evolución intrapaciente (basal, 1, 3 y 6 meses) cambios en el transcriptoma y examinar si el tratamiento puede mejorar la actividad/exacerbación identificada, la gravedad y las principales firmas de enfermedad de órganos. Los investigadores también obtendrán información preliminar sobre las firmas moleculares que predicen las respuestas clínicas y el impacto de belimumab en las firmas genéticas de la defensa del huésped contra los patógenos virales y bacterianos (incluidas las micobacterias). Usando módulos de genes específicos del tipo de célula y redes de genes de coexpresión, los investigadores descifrarán nuestros datos para definir las alteraciones moleculares pertinentes en tipos específicos de células inmunitarias. Los resultados se validarán y caracterizarán funcionalmente mediante citometría de masas de una sola célula (realizada en los puntos de tiempo antes mencionados), que permite la investigación de la identidad celular (incluidos los subconjuntos de células B y células mieloides de particular relevancia para la enfermedad) y el estado de activación en nivel de proteína (por ej. fosforilación) a través de citometría de flujo de alta dimensión de última generación. A través de un análisis enfocado de los datos de citometría de masa y RNA-seq desconvolucionados, seguido de estudios de función y expresión génica específicos en monocitos purificados, los investigadores determinarán si belimumab puede restaurar los monocitos "preparados para SLE", aliviando así su fenotipo inflamatorio y proaterogénico. y potenciando su actividad bactericida. En conjunto, estos estudios proporcionarán nuevos conocimientos sobre el mecanismo beneficioso de la relación eficacia/toxicidad de la terapia con belimumab en el LES, al tiempo que respaldan el uso temprano del fármaco.