Parâmetros transcricionais e imínicos de resposta ao belinumabe

O excesso de fator ativador de células B (BAFF) causa doença lúpica exercendo efeitos coestimulatórios no compartimento de células B, mas também em uma variedade de subconjuntos de células não B, como células T auxiliares e monócitos/células dendríticas. As recomendações atualizadas de 2019 da European League Against Rheumatism (EULAR) para LES recomendam o uso de belimumabe (anti-BAFF mAb) na doença persistentemente ativa ou em surtos com base em evidências de eficácia, redução de surtos e aumento de danos aos órgãos sem aumentar o risco de infecções. Ainda assim, o belimumabe é geralmente reservado para casos refratários estabelecidos. É concebível que o uso precoce possa interromper a progressão da doença, especialmente prevenir crises e disfunções nos principais órgãos. Os investigadores concluíram uma análise genética e transcriptômica combinada no sangue periférico de pacientes com LES e caracterizaram assinaturas genéticas distintas para a atividade/crise e gravidade da doença. Usando técnicas de aprendizado de máquina, os investigadores podem prever pacientes com LES com probabilidade de desenvolver envolvimento de órgãos importantes. Estudos in vitro e de perfil genético em monócitos lúpicos purificados indicam que essas células existem - sob o efeito do interferon tipo I - em um estado autorreativo e metabólico de "alerta máximo" (reminiscente de "imunidade treinada"), o que pode contribuir para o risco de surtos , lesão tecidual, mas também comorbidades importantes observadas no LES, particularmente aterosclerose acelerada e infecções. Com base na experiência clínica acumulada até agora, é provável que o belimumabe possa neutralizar essas assinaturas moleculares para surtos e progressão da doença sem interferir nas vias imunes de defesa do hospedeiro.

Os investigadores propõem realizar o sequenciamento de RNA do sangue total inicialmente, em uma coorte de 80 pacientes com LES que receberão belimumabe como parte da prática clínica padrão, a fim de avaliar longitudinalmente o paciente (linha de base, 1, 3 e 6 meses) alterações do transcriptoma e examinar se o tratamento pode melhorar a atividade/exacerbação identificada, a gravidade e as principais características de doenças de órgãos. Os investigadores também obterão informações preliminares sobre assinaturas moleculares que preveem respostas clínicas e o impacto do belimumabe nas assinaturas gênicas de defesa do hospedeiro contra patógenos virais e bacterianos (incluindo micobactérias). Usando módulos de genes específicos do tipo de célula e redes de genes de co-expressão, os investigadores irão deconvoluir nossos dados para definir alterações moleculares pertinentes em tipos específicos de células imunes. Os resultados serão validados e funcionalmente caracterizados por citometria de massa de célula única (realizada nos pontos de tempo mencionados acima), que permite a investigação da identidade celular (incluindo subconjuntos de células B e células mielóides de particular relevância para a doença) e estado de ativação em nível de proteína (ex. fosforilação) por meio de citometria de fluxo de alta dimensão de próxima geração. Por meio de uma análise focada do RNA-seq deconvoluído e dados de citometria de massa seguidos de expressão gênica direcionada e estudos de função em monócitos purificados, os investigadores determinarão se o belimumabe pode restaurar monócitos "preparados para LES", aliviando seu fenótipo inflamatório e pró-aterogênico e aumentando sua atividade bactericida. Coletivamente, esses estudos fornecerão novos insights mecanísticos sobre a relação eficácia/toxicidade benéfica da terapia com belimumabe no LES, enquanto apoiam o uso precoce da droga.