Nanoplataforma basada en exosomas para la entrega de ARNm de Ldlr en FH (ENDFH)

La hipercolesterolemia familiar (HF) es una enfermedad genética autosómica dominante caracterizada por colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL) plasmático (LDL-C) severamente elevado y enfermedad coronaria prematura. La mayoría de los pacientes con HF (alrededor del 95 % de los casos) se atribuyen a una mutación de pérdida funcional del gen del receptor de LDL (LDLR). La prevalencia de las mutaciones heterocigotas en LDLR se ha estimado en 1 en 200 a 1 en 500 en la población, y la forma homocigota en 1 en 100000 individuos. Como receptor clave de lipoproteínas en la superficie de los hepatocitos, el LDLR es fundamental para que el hígado elimine el LDL-C de la circulación. Por endocitosis y posterior procesamiento de LDL-C, LDLR es responsable de eliminar la mayor parte del exceso de LDL-C del suero, y no existen sustitutos in vivo. Estos heterocigotos (HeFH) suelen tener el doble de los niveles normales de LDL en plasma y enfermedades cardiovasculares a una edad más temprana. Los individuos homocigotos (HoFH) enfrentan niveles mucho más altos de LDL-C y, a menudo, mueren antes de los 20 años si no reciben tratamiento. Aunque las terapias existentes, como las estatinas, la ezetimiba y los inhibidores de PCSK9, tienen algunos efectos beneficiosos sobre la HFHe, pocos medicamentos tienen efectos terapéuticos sobre la HFHo incluso en dosis altas. La aféresis de lípidos y el trasplante de hígado son los manejos clínicos actuales para reducir el nivel de LDL-C, mientras que la terapia génica es prometedora.

Los exosomas son pequeñas vesículas intracelulares que varían en tamaño entre 30 y 150 nm y tienen un papel importante en la comunicación célula-célula. Muchos estudios muestran que el exosoma puede entregar eficientemente cargas, como ARNm, miARN e incluso ADN plasmídico, a las células diana, emergiendo como un vehículo terapéutico prometedor para la terapia génica. En comparación con los virus, los exosomas, como "nanopartículas naturales", son fáciles de manejar, no citotóxicos ni inmunogénicos. Por lo tanto, es prometedor desarrollar una estrategia de administración de genes LDLR basada en exosomas y explorar los efectos terapéuticos en HoFH.

En este estudio, se construirá un vector de virus que expresa Ldlr para generar exosomas enriquecidos con ARNm de Ldlr. Para cumplir con los estándares de los ensayos clínicos, utilizaremos MSC derivadas de médula ósea de donantes normales que cumplen con el grado GMP para producir exosomas. Los exosomas se enriquecerán mediante filtración y ultracentrifugación, y luego se normalizarán mediante Nanosight, microscopía electrónica y biomarcadores clave de exosomas. Para garantizar la seguridad de los pacientes, planeamos inyectar exosomas a través de una punción abdominal bajo guía de ultrasonido y comprar un seguro médico para los pacientes. Este primer estudio en humanos tiene como objetivo evaluar la seguridad de este producto de exosomas para la terapia génica y la evidencia preliminar de eficacia utilizando los niveles de LDL-C en plasma como biomarcador sustituto. El estudio promete proporcionar un nuevo enfoque terapéutico para el tratamiento de pacientes con hipercolesterolemia familiar homocigota.