Наноплатформа на основе экзосом для доставки мРНК Ldlr при СГ (ENDFH)

Семейная гиперхолестеринемия (СГ) является аутосомно-доминантным генетическим заболеванием, характеризующимся резко повышенным уровнем холестерина липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) в плазме (ХС-ЛПНП) и преждевременной ишемической болезнью сердца. Большинство пациентов с СГ (около 95% случаев) связаны с функциональной потерей мутации гена рецептора ЛПНП (LDLR). Распространенность гетерозиготных мутаций LDLR оценивается от 1 на 200 до 1 на 500 в популяции, а гомозиготных форм — на 1 на 100 000 человек. Являясь ключевым рецептором липопротеинов на поверхности гепатоцитов, LDLR имеет решающее значение для выведения печенью LDL-C из кровотока. Путем эндоцитоза и дальнейшего процессинга LDL-C, LDLR отвечает за удаление большей части избыточного LDL-C из сыворотки, и in vivo нет заменителей. Эти гетерозиготы (HeFH) обычно имеют в два раза более высокие уровни ЛПНП в плазме и сердечно-сосудистые заболевания в более раннем возрасте. Гомозиготные люди (HoFH) сталкиваются с гораздо более высокими уровнями Х-ЛПНП и часто умирают в возрасте до 20 лет, если их не лечить. Хотя существующие терапевтические средства, такие как статины, эзетимиб и ингибиторы PCSK9, оказывают некоторое благотворное влияние на ГеСГ, лишь немногие препараты оказывают терапевтическое действие на ГоСГ даже в высоких дозах. Липидный аферез и трансплантация печени в настоящее время являются клиническими методами снижения уровня холестерина ЛПНП, в то время как генная терапия обещает быть многообещающей.

Экзосомы представляют собой небольшие внутриклеточные везикулы размером 30-150 нм и играют важную роль в межклеточных коммуникациях. Многие исследования показывают, что экзосомы могут эффективно доставлять грузы, такие как мРНК, микроРНК и даже плазмидная ДНК, в клетки-мишени, что становится многообещающим терапевтическим носителем для генной терапии. По сравнению с вирусом экзосомы, как «природные наночастицы», просты в обращении, нецитотоксичны и неиммуногенны. Таким образом, перспективно разработать стратегию доставки генов LDLR на основе экзосом и изучить терапевтические эффекты при HoFH.

В этом исследовании будет сконструирован вирусный вектор, экспрессирующий Ldlr, для создания экзосом, обогащенных мРНК Ldlr. Чтобы соответствовать стандартам клинических испытаний, мы будем использовать MSC, полученные из костного мозга нормального донора, соответствующие требованиям GMP, для производства экзосом. Экзосомы будут обогащены фильтрацией и ультрацентрифугированием, а затем нормализованы с помощью Nanosight, электронной микроскопии и ключевых биомаркеров экзосом. В целях обеспечения безопасности пациентов мы планируем вводить экзосомы через брюшную пункцию под контролем УЗИ, а также приобретать для пациентов медицинскую страховку. Это первое исследование на людях направлено на оценку безопасности этого экзосомного продукта для генной терапии и предварительные доказательства эффективности с использованием уровней LDL-C в плазме в качестве суррогатного биомаркера. Исследование обещает предоставить новый терапевтический подход к лечению пациентов с гомозиготной семейной гиперхолестеринемией.