Nanoplataforma baseada em exossomos para entrega de mRNA Ldlr em FH (ENDFH)

A hipercolesterolemia familiar (HF) é uma doença genética autossômica dominante caracterizada por colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL) (LDL-C) gravemente elevado no plasma e doença cardíaca coronária prematura. A maioria dos pacientes com HF (cerca de 95% dos casos) é atribuída à mutação de perda funcional do gene do receptor de LDL (LDLR). A prevalência das mutações heterozigóticas no LDLR foi estimada em 1 em 200 a 1 em 500 na população, e a forma homozigótica em 1 em 100.000 indivíduos. Como um receptor de lipoproteína chave na superfície do hepatócito, o LDLR é crítico para a eliminação do LDL-C da circulação pelo fígado. Por endocitose e posterior processamento do LDL-C, o LDLR é responsável pela remoção da maior parte do excesso de LDL-C do soro, e não há substitutos in vivo. Esses heterozigotos (HeFH) normalmente têm o dobro dos níveis plasmáticos normais de LDL e doenças cardiovasculares em idade precoce. Indivíduos homozigotos (HoFH) enfrentam níveis de LDL-C muito mais altos e geralmente morrem antes dos 20 anos de idade se não forem tratados. Embora as terapêuticas existentes, como estatinas, ezetimiba e inibidores de PCSK9, tenham alguns efeitos benéficos na HFHe, poucas drogas têm efeitos terapêuticos na HFHo mesmo em altas doses. A aférese lipídica e o transplante de fígado são os tratamentos clínicos atuais para reduzir o nível de LDL-C, enquanto a terapia gênica é promissora.

Os exossomos são pequenas vesículas intracelulares que variam em tamanho de 30-150 nm e têm um papel importante na comunicação célula-célula. Muitos estudos mostram que o exossomo pode entregar eficientemente cargas, como mRNA, miRNA e até mesmo DNA plasmidial, para células-alvo, emergindo como um promissor veículo terapêutico para terapia gênica. Em comparação com o vírus, os exossomos, como "nanopartículas naturais", são fáceis de manusear, não citotóxicos e não imunogênicos. Portanto, é promissor desenvolver uma estratégia de entrega do gene LDLR baseada em exossomos e explorar os efeitos terapêuticos na HFHo.

Neste estudo, um vetor de vírus expressando Ldlr será construído para gerar exossomos enriquecidos com mRNA de Ldlr. Para atender aos padrões dos ensaios clínicos, usaremos as MSCs derivadas de medula óssea de doadores normais compatíveis com GMP para produzir exossomos. Os exossomos serão enriquecidos por filtração e ultracentrifugação, e então normalizados por Nanosight, microscopia eletrônica e biomarcadores de exossomos chave. Para garantir a segurança dos pacientes, planejamos injetar exossomos por meio de punção abdominal guiada por ultrassom e adquirir seguro médico para os pacientes. Este primeiro estudo em humanos tem como objetivo avaliar a segurança deste produto de exossomo para terapia genética e evidência preliminar de eficácia usando níveis plasmáticos de LDL-C como um biomarcador substituto. O estudo é promissor para fornecer uma nova abordagem terapêutica para o tratamento de pacientes com Hipercolesterolemia Familiar Homozigótica.