Antibiotipificación y prevalencia de genotipos virulentos entre Helicobacter Pylori y su impacto en la respuesta a la terapia
- Detección de la susceptibilidad y resistencia antimicrobiana primaria de la infección por Helicobacter Pylori.
- Detección de genes de resistencia y virulencia de la infección por Helicobacter Pylori.
- Evaluación del gen de carcinogenicidad de H pylori.
- En nuestra investigación se utilizará la evaluación del resultado y la eficacia del régimen de antibióticos.
- Evaluación del efecto de otros factores como la dieta (comida grasosa y picante), medicamentos como el uso de AINE, antibióticos por cualquier causa sobre la respuesta de H. pylori al régimen de antibióticos.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
- Genético: Detección de citotoxina A vacuolizante (Vac A) y genotipos virulentos de H. Pylori asociados a citotoxina A (Cag A) mediante amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en biopsias gástricas:
- Prueba de diagnóstico: Cultivo y sensibilidad de biopsias gástricas endoscópicas:
- Otro: Examen histopatológico biopsias gástricas endoscópicas:
- Procedimiento: Endoscopia superior
- Droga: regímenes empíricos de H. pylori
- Prueba de diagnóstico: H.Pylori Ag en heces
Descripción detallada
Helicobacter pylori (H. pylori) es una de las infecciones más comunes en humanos y afecta a más de la mitad de la población mundial. Se cree que las nuevas infecciones ocurren como consecuencia de la transmisión directa de persona a persona o de la contaminación ambiental.
La prevalencia de la infección varía ampliamente en las áreas rurales en desarrollo (más del 80 %) en comparación con las urbanas desarrolladas (menos del 40 %), como consecuencia de las diferentes condiciones socioeconómicas e higiénicas .
El modo vertical es la transmisión de la infección de ascendiente a descendiente dentro de la misma familia, mientras que la transmisión horizontal implica el contacto con personas ajenas a la familia o la contaminación ambiental.
La mayoría de las personas se infectan con Helicobacter pylori durante la primera infancia; países en desarrollo. La erradicación exitosa es importante para prevenir el desarrollo de resistencia a los antibióticos, así como para reducir el número de tratamientos y procedimientos. Por lo tanto, los datos de resistencia a los antibióticos nacionales/regionales podrían usarse para guiar los regímenes de tratamiento para la infección por H. pylori.
Varios factores clínicos asociados con mayores tasas de H. pylori resistente a los antibióticos, incluidos los antecedentes de exposición previa a los antibióticos, el aumento de la edad, el sexo femenino, el origen étnico/raza, el grado de consumo de alcohol y la dispepsia no ulcerosa.
La resistencia primaria a los antibióticos de H. pylori está aumentando en todo el mundo. Se encontró que la tasa de resistencia general era del 4,55 % para la amoxicilina; 27,22% para claritromicina; 39,66% para metronidazol; y 22,48% para levofloxacino.
Por lo tanto, el resultado de la susceptibilidad a los fármacos de estos antibióticos es necesario para seleccionar el fármaco apropiado para la erradicación exitosa de la infección.
Helicobacter pylori exhibe distribuciones geográficas específicas que están relacionadas con los resultados clínicos. A pesar de la alta tasa de infección por H. pylori en todo el mundo, la vigilancia epidemiológica genética de H. pylori aún debe mejorarse.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Asyut, Egipto
- Nariman Zaghloul Bekhiet
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios de inclusión:
- Cualquier paciente mayor de 18 años con infección sintomática por H pylori diagnosticada por Ag H pylori positivo en heces (tratamiento naïve).
Criterio de exclusión:
- Pacientes que no son elegibles para la endoscopia.
- Los pacientes son menores de 18 años.
- negativa del paciente
- antecedentes de uso de antibióticos o inhibidores de la bomba de protones durante el último mes.
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Tratamiento
- Asignación: N / A
- Modelo Intervencionista: Asignación de un solo grupo
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Otro: Un grupo de infección ingenua por H. Pylori se someterá a una endoscopia digestiva alta.
La endoscopia superior se realizará en condiciones sépticas completas y se tomarán múltiples biopsias gástricas del cuerpo y el antro para:
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La extracción de ADN, utilizando el Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega-USA), se realizará siguiendo las instrucciones del fabricante.
Para la detección de la citotoxina A vacuolizante y el gen A asociado a la citotoxina, la amplificación de la reacción en cadena de la polimerasa se realizará con una desnaturalización inicial de 9 minutos a 94 ˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94 ˚C, 45 segundos a 60 ˚ C y 45 segundos a 72˚C.
La extensión final se realizará durante 5 minutos a 72˚C.
Para la detección de vacuolización de citotoxina A (S1/S2, m1, m2), se realizará una PCR con una desnaturalización inicial de 9 minutos a 94 ˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94 ˚C, 45 segundos a 56 ˚C , y 45 segundos a 72˚C.
La extensión final se realizará durante 5 minutos a 72˚C.
El ADN amplificado se analizará mediante electroforesis en gel de agarosa.
Una muestra positiva dará bandas en el fragmento de ADN de 138 pb para el gen A asociado a la citotoxina, en 259/286 pb para la vacuolización de la citotoxina A s1/s2, y en 290 pb y 352 pb para m1 y m2, respectivamente.
Durante la endoscopia, se tomarán tres biopsias del antro y/o del cuerpo y se examinarán mediante la prueba rápida de ureasa, también conocida como prueba de organismos similares a Campylobacter (Kimberly-Clark, EE. UU.).
Cultivo de la bacteria en agar Columbia más 5-7% de sangre desfibrinada de caballo o de oveja y suplemento selectivo de Dent en condiciones microaerófilas a 37 grados Celsius durante 3-5 días.
Las secciones histológicas del antro y las regiones del cuerpo se tiñerán con tinción de Giemsa.
La solución de trabajo de tinción de Giemsa se preparó de la siguiente manera: 40 ml de solución madre de Giemsa con 60 ml de agua destilada.
La solución madre de Giemsa se preparará de la siguiente manera: polvo de Giemsa 4 g, glicerol 250 ml y metanol 250 ml.
Las secciones histológicas serán examinadas por un patólogo gastrointestinal para estandarizar la clasificación de la gastritis.
La clasificación histopatológica se registrará de la siguiente manera (gastritis aguda, gastritis crónica leve-moderada-grave, atrofia glandular o metaplasia intestinal).
se hará al paciente antes de iniciar la terapia empírica y se tomarán múltiples biopsias de antro y/o cuerpo.
El paciente estará en ayunas de al menos 8 horas. Superior y los hallazgos se registrarán en el informe como presencia de enfermedad por reflujo gastroesofágico, enrojecimiento gástrico y/o duodenal difuso o localizado, inflamación de la mucosa, atrofia de la mucosa, nodularidad, metaplasia intestinal, erosiones o úlceras. .
Iniciar esquemas de antibióticos empíricos paciente triple terapia ((levofloxacino 400 mg una vez, amoxicilina 1000 mg dos veces por 2 semanas) y (inhibidor de la bomba de protones dos veces por 1 mes)).
Seguimiento después de 2 semanas después de terminar el régimen por Stool Ag en heces
Se incluirán todos los pacientes sintomáticos mayores de 18 años con infección por H pylori diagnosticados con Ag H pylori positivo en heces. evaluación de la respuesta de laboratorio, 2 semanas después de terminar la terapia empírica. |
¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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detección de cultivo antibiótico previo al tratamiento y prueba de sensibilidad
Periodo de tiempo: hasta 12 meses
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Durante la endoscopia, se tomarán tres biopsias del antro y/o del cuerpo del estómago. Las biopsias se examinarán para identificar H. pylori mediante la prueba rápida de ureasa, también conocida como prueba de organismos similares a Campylobacter (Kimberly-Clark, EE. UU.).
Cultivo de la bacteria en agar Columbia (Oxoid-UK) más sangre de caballo o de oveja desfibrinada al 5-7 % y suplemento selectivo Dent (Oxoid-UK) en condiciones microaerófilas a 37 grados Celsius durante 3-5 días.
Entonces, los investigadores detectarán la prevalencia y los tipos de resistencia a los antibióticos H. Pylori en las biopsias.
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hasta 12 meses
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Detección de citotoxina A vacuolizante y genotipos virulentos de Helicobacter Pylori del gen A asociado a la citotoxina mediante amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Periodo de tiempo: hasta 12 meses
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La extracción de ADN, utilizando el Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega-USA), se realizará siguiendo las instrucciones del fabricante.
Para la detección de la citotoxina A vacuolizante y el gen A asociado a la citotoxina, la amplificación de la reacción en cadena de la polimerasa se realizará con una desnaturalización inicial de 9 minutos a 94 ˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94 ˚C, 45 segundos a 60 ˚ C y 45 segundos a 72˚C.
La extensión final se realizará durante 5 minutos a 72˚C.
Para la detección de vacuolización de citotoxina A (S1/S2, m1, m2), se realizará una PCR con una desnaturalización inicial de 9 minutos a 94 ˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94 ˚C, 45 segundos a 56 ˚C , y 45 segundos a 72˚C.
La extensión final se realizará durante 5 minutos a 72˚C.
El ADN amplificado se analizará mediante electroforesis en gel de agarosa.
Una muestra positiva dará bandas en el fragmento de ADN de 138 pb para el gen A asociado a la citotoxina, en 259/286 pb para la vacuolización de la citotoxina A s1/s2, y en 290 pb y 352 pb para m1 y m2, respectivamente.
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hasta 12 meses
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Relación del examen histopatológico (clasificación de gastritis) con la presentación clínica y la resistencia.
Periodo de tiempo: hasta 12 meses
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Examen histopatológico de biopsias endoscópicas y detección de inflamación aguda o crónica inducida por la bacteria H.pylori.
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hasta 12 meses
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Detección del efecto de la dieta y los fármacos sobre la respuesta al tratamiento
Periodo de tiempo: hasta 12 meses
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Detecte la ingesta de dieta (comida grasosa y picante), el uso de medicamentos (como AINE, antibióticos, inhibidores de la bomba de protones en el último mes) mediante el Cuestionario.
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hasta 12 meses
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Colaboradores e Investigadores
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Publicaciones y enlaces útiles
Publicaciones Generales
- Liu Y, Wang S, Yang F, Chi W, Ding L, Liu T, Zhu F, Ji D, Zhou J, Fang Y, Zhang J, Xiang P, Zhang Y, Zhao H. Antimicrobial resistance patterns and genetic elements associated with the antibiotic resistance of Helicobacter pylori strains from Shanghai. Gut Pathog. 2022 Mar 30;14(1):14. doi: 10.1186/s13099-022-00488-y.
- Deng L, He XY, Tang B, Xiang Y, Yue JJ. An improved quantitative real-time polymerase chain reaction technology for Helicobacter pylori detection in stomach tissue and its application value in clinical precision testing. BMC Biotechnol. 2020 Jun 22;20(1):33. doi: 10.1186/s12896-020-00624-z.
- Pokhrel N, Khanal B, Rai K, Subedi M, Bhattarai NR. Application of PCR and Microscopy to Detect Helicobacter pylori in Gastric Biopsy Specimen among Acid Peptic Disorders at Tertiary Care Centre in Eastern Nepal. Can J Infect Dis Med Microbiol. 2019 Feb 5;2019:3695307. doi: 10.1155/2019/3695307. eCollection 2019.
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- Infecciones
- Técnicas y procedimientos de diagnóstico
- Diagnóstico
- Procedimientos quirúrgicos, operativo
- Procedimientos quirúrgicos mínimamente invasivos
- Técnicas de diagnóstico, quirúrgico
- Endoscopia, gastrointestinal
- Endoscopia, sistema digestivo
- Técnicas de diagnóstico, sistema digestivo
- Endoscopia
- Procedimientos quirúrgicos del sistema digestivo
- Sistema digestivo Fenómenos fisiológicos
- Sistema digestivo y fenómenos fisiológicos orales
- Defecación
- Gastroscopia
Otros números de identificación del estudio
- APVGHP
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
producto fabricado y exportado desde los EE. UU.
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