Antibiotipagem e prevalência de genótipos virulentos entre Helicobacter Pylori e seu impacto na resposta à terapia
- Detecção da suscetibilidade e resistência antimicrobiana primária da infecção por Helicobacter Pylori.
- Detecção de genes de resistência e virulência da infecção por Helicobacter Pylori.
- Avaliação do gene de carcinogenicidade do H pylori.
- A avaliação do resultado e eficácia do regime de antibióticos será utilizada em nossa pesquisa.
- Avaliação do efeito de outros fatores como dieta (refeições gordurosas e condimentadas), drogas como uso de AINEs, antibióticos por qualquer causa na resposta de H. pylori ao regime de antibióticos.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Intervenção / Tratamento
- Genético: detecção de citotoxina A vacuolizante (Vac A) e gene A associado à citotoxina (Cag A) genótipos virulentos de H.Pylori por amplificação da reação em cadeia da polimerase (PCR) em biópsias gástricas:
- Teste de diagnostico: Cultura e sensibilidade de biópsias gástricas endoscópicas:
- Outro: Exame histopatológico biópsias gástricas endoscópicas:
- Procedimento: Endoscopia alta
- Medicamento: regimes empíricos de H.pylori
- Teste de diagnostico: H.Pylori Ag nas fezes
Descrição detalhada
Helicobacter pylori (H. pylori) é uma das infecções mais comuns em humanos, afetando mais da metade da população mundial. Acredita-se que novas infecções ocorram como consequência da transmissão direta entre humanos ou contaminação ambiental.
A prevalência da infecção varia amplamente nas áreas rurais em desenvolvimento (mais de 80%) em comparação com as urbanas desenvolvidas (menos de 40%), como consequência de diferentes condições socioeconômicas e higiênicas.
O modo vertical é a transmissão da infecção de ascendente para descendente dentro da mesma família, enquanto a transmissão horizontal envolve contato com indivíduos fora da família ou contaminação ambiental.
A maioria dos indivíduos é infectada pelo Helicobacter pylori durante a primeira infância; nos países em desenvolvimento. A erradicação bem-sucedida é importante para prevenir o desenvolvimento de resistência aos antibióticos, bem como para reduzir o número de tratamentos e procedimentos. Assim, dados nacionais/regionais de resistência a antibióticos podem ser usados para orientar regimes de tratamento para infecção por H. pylori.
Vários fatores clínicos associados ao aumento das taxas de H. pylori resistente a antibióticos, incluindo história de exposição prévia a antibióticos, aumento da idade, sexo feminino, etnia/raça, extensão do uso de álcool e dispepsia não ulcerosa.
A resistência primária de H. pylori aos antibióticos está aumentando em todo o mundo. A taxa de resistência geral encontrada foi de 4,55% para amoxicilina; 27,22% para claritromicina; 39,66% para metronidazol; e 22,48% para levofloxacino.
Portanto, o resultado da suscetibilidade a esses antibióticos é necessário para selecionar o medicamento apropriado para a erradicação bem-sucedida da infecção.
Helicobacter pylori exibe distribuições geográficas específicas que estão relacionadas a resultados clínicos. Apesar da alta taxa de infecção de H. pylori em todo o mundo, a vigilância epidemiológica genética de H. pylori ainda precisa ser aprimorada.
Tipo de estudo
Inscrição (Real)
Estágio
- Não aplicável
Contactos e Locais
Locais de estudo
-
-
-
Asyut, Egito
- Nariman Zaghloul Bekhiet
-
-
Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Descrição
Critério de inclusão:
- Qualquer paciente com mais de 18 anos de idade com infecção sintomática por H pylori, diagnosticado por Ag H pylori positivo nas fezes (tratamento naïve).
Critério de exclusão:
- Pacientes que não são elegíveis para endoscopia.
- Os pacientes têm menos de 18 anos
- recusa do paciente
- história de uso de antibióticos ou inibidores da bomba de prótons durante o último mês.
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: Tratamento
- Alocação: N / D
- Modelo Intervencional: Atribuição de grupo único
- Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
|---|---|
|
Outro: Um grupo de infecção virgem por H. Pylori será submetido a endoscopia digestiva alta.
A endoscopia digestiva alta será realizada sob condição séptica completa e múltiplas biópsias gástricas do corpo e do antro serão realizadas para:
|
A extração do DNA, utilizando o Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega-USA), será feita seguindo as instruções do fabricante.
Para a detecção da citotoxina A vacuolizante e do gene A associado à citotoxina, a amplificação por reação em cadeia da polimerase será realizada com uma desnaturação inicial de 9 minutos a 94˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94˚C, 45 segundos a 60˚ C e 45 segundos a 72˚C.
A extensão final será realizada por 5 minutos a 72˚C.
Para detecção de citotoxina A vacuolizante (S1/S2, m1, m2), a PCR será realizada com desnaturação inicial de 9 minutos a 94˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94˚C, 45 segundos a 56˚C , e 45 segundos a 72˚C.
A extensão final será realizada por 5 minutos a 72˚C.
O DNA amplificado será analisado por eletroforese em gel de agarose.
Uma amostra positiva dará bandas no fragmento de DNA de 138 pb para o gene A associado à citotoxina, em 259/286 pb para citotoxina A vacuolizante s1/s2 e 290 pb e 352 pb para m1 e m2, respectivamente
Durante a endoscopia, três biópsias serão feitas do antro e/ou corpo e serão examinadas pelo teste rápido da urease, também conhecido como teste de organismo semelhante a Campylobacter (Kimberly-Clark, EUA).
Cultura da bactéria em ágar Columbia mais 5-7% de sangue desfibrinado de cavalo ou ovelha e suplemento Dent seletivo sob condições microaerófilas a 37 graus Celsius por 3-5 dias.
Cortes histológicos das regiões do antro e do corpo serão corados com corante Giemsa.
A solução de trabalho de coloração Giemsa foi preparada da seguinte forma: 40 ml de solução estoque de Giemsa com 60 ml de água destilada.
A solução estoque de Giemsa será preparada da seguinte forma: pó de Giemsa 4 g, glicerol 250 ml e metanol 250 ml.
Os cortes histológicos serão examinados por um patologista gastrointestinal para padronizar a classificação da gastrite.
A classificação histopatológica será registrada da seguinte forma (gastrite aguda, gastrite crônica leve-moderada-grave, atrofia glandular ou metaplasia intestinal).
será feito paciente antes de iniciar a terapia empírica e múltiplas biópsias de antro e/ou corpo serão feitas.
O paciente estará em jejum de pelo menos 8 horas. Os achados superiores e serão registrados no laudo como presença de doença do refluxo gastroesofágico, vermelhidão gástrica e/ou duodenal difusa ou localizada, edema da mucosa, atrofia da mucosa, nodularidade, metaplasia intestinal, erosões ou úlceras .
Iniciar regimes de antibióticos empíricos terapia tripla do paciente ((levofloxacina 400 mg uma vez, amoxicilina 1000 mg duas vezes por 2 semanas) e (inibidor da bomba de prótons duas vezes por 1 mês)).
Acompanhamento após 2 semanas após o término do regime de Stool Ag nas fezes
Qualquer paciente sintomático acima de 18 anos com infecção por H pylori, pacientes diagnosticados com Ag positivo para H pylori nas fezes serão incluídos. avaliação da resposta laboratorial, 2 semanas após o término da terapia empírica. |
O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
|
detecção de cultura antibiótica pré-tratamento e teste de sensibilidade
Prazo: até 12 meses
|
Durante a endoscopia, três biópsias serão feitas do antro e/ou corpo do estômago. As biópsias serão examinadas para identificação de H. pylori pelo teste rápido da urease também conhecido como teste de organismo semelhante a Campylobacter (Kimberly-Clark, EUA).
Cultura da bactéria em ágar Columbia (Oxoid-UK) mais 5-7% de sangue desfibrinado de cavalo ou ovelha e suplemento Dent seletivo (Oxoid-UK) sob condições microaerófilas a 37 graus Celsius por 3-5 dias.
Assim, os investigadores detectarão a prevalência e os tipos de resistência do H.Pylori aos antibióticos em biópsias.
|
até 12 meses
|
|
detecção de citotoxina A vacuolizante e gene A associado a citotoxina virulenta Helicobacter Pylori genótipos por amplificação da reação em cadeia da polimerase (PCR)
Prazo: até 12 meses
|
A extração do DNA, utilizando o Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega-USA), será feita seguindo as instruções do fabricante.
Para a detecção da citotoxina A vacuolizante e do gene A associado à citotoxina, a amplificação por reação em cadeia da polimerase será realizada com uma desnaturação inicial de 9 minutos a 94˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94˚C, 45 segundos a 60˚ C e 45 segundos a 72˚C.
A extensão final será realizada por 5 minutos a 72˚C.
Para detecção de citotoxina A vacuolizante (S1/S2, m1, m2), a PCR será realizada com desnaturação inicial de 9 minutos a 94˚C, seguida de 35 ciclos de 1 minuto a 94˚C, 45 segundos a 56˚C , e 45 segundos a 72˚C.
A extensão final será realizada por 5 minutos a 72˚C.
O DNA amplificado será analisado por eletroforese em gel de agarose.
Uma amostra positiva dará bandas no fragmento de DNA de 138 pb para o gene A associado à citotoxina, em 259/286 pb para citotoxina A vacuolizante s1/s2 e 290 pb e 352 pb para m1 e m2, respectivamente.
|
até 12 meses
|
|
Relação do exame histopatológico (classificação da gastrite) com a apresentação clínica e a resistência.
Prazo: até 12 meses
|
Exame histopatológico de biópsias endoscópicas e detecção de inflamação aguda ou crônica induzida pela bactéria H.pylori.
|
até 12 meses
|
Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
|
Detecção do efeito da dieta e das drogas na resposta ao tratamento
Prazo: até 12 meses
|
Detectar ingestão de dieta (refeição gordurosa e condimentada), uso de drogas (como AINEs, antibióticos, inibidores da bomba de prótons no último mês) por Questionário.
|
até 12 meses
|
Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Publicações e links úteis
Publicações Gerais
- Liu Y, Wang S, Yang F, Chi W, Ding L, Liu T, Zhu F, Ji D, Zhou J, Fang Y, Zhang J, Xiang P, Zhang Y, Zhao H. Antimicrobial resistance patterns and genetic elements associated with the antibiotic resistance of Helicobacter pylori strains from Shanghai. Gut Pathog. 2022 Mar 30;14(1):14. doi: 10.1186/s13099-022-00488-y.
- Deng L, He XY, Tang B, Xiang Y, Yue JJ. An improved quantitative real-time polymerase chain reaction technology for Helicobacter pylori detection in stomach tissue and its application value in clinical precision testing. BMC Biotechnol. 2020 Jun 22;20(1):33. doi: 10.1186/s12896-020-00624-z.
- Pokhrel N, Khanal B, Rai K, Subedi M, Bhattarai NR. Application of PCR and Microscopy to Detect Helicobacter pylori in Gastric Biopsy Specimen among Acid Peptic Disorders at Tertiary Care Centre in Eastern Nepal. Can J Infect Dis Med Microbiol. 2019 Feb 5;2019:3695307. doi: 10.1155/2019/3695307. eCollection 2019.
Links úteis
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Real)
Conclusão do estudo (Real)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
- Infecções
- Técnicas e procedimentos de diagnóstico
- Diagnóstico
- Procedimentos cirúrgicos, operatórios
- Procedimentos cirúrgicos minimamente invasivos
- Técnicas de diagnóstico, cirúrgico
- Endoscopia, gastrointestinal
- Endoscopia, sistema digestivo
- Técnicas de diagnóstico, sistema digestivo
- Endoscopia
- Procedimentos cirúrgicos do sistema digestivo
- Fenômenos fisiológicos do sistema digestivo
- Sistema digestivo e fenômenos fisiológicos orais
- Defecação
- Gastroscopia
Outros números de identificação do estudo
- APVGHP
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
produto fabricado e exportado dos EUA
Essas informações foram obtidas diretamente do site clinicaltrials.gov sem nenhuma alteração. Se você tiver alguma solicitação para alterar, remover ou atualizar os detalhes do seu estudo, entre em contato com register@clinicaltrials.gov. Assim que uma alteração for implementada em clinicaltrials.gov, ela também será atualizada automaticamente em nosso site .