Propiedades anabólicas de la canola (ALPACA)

Evaluación y evaluación previa Para evaluar si los voluntarios son elegibles para participar en este estudio, los invitaremos a la Universidad para una evaluación. Al comienzo de la sesión de selección, se explicará todo el ensayo experimental y se responderán las posibles preguntas. A partir de entonces, se pide a los voluntarios que lean, completen y firmen el formulario de consentimiento informado. Después de firmar el formulario de consentimiento informado, se evaluará la elegibilidad del participante en función de los criterios de admisión y exclusión. Para evaluar aún más su elegibilidad, se les pedirá a los participantes que completen un cuestionario médico para evaluar su salud general, el uso de medicamentos, la ingesta habitual de alimentos y la actividad física (Apéndice F1.1). A continuación, se evaluará la presión arterial. Se determinará la masa corporal (con una precisión de 0,1 kg) y la altura (con una precisión de 0,01 m), y la composición corporal se evaluará mediante una exploración de absorciometría de rayos X de energía dual (DEXA). Una exploración DEXA es un procedimiento simple y no invasivo. Al comienzo del procedimiento, se les pedirá a los sujetos que se acuesten en una mesa de exploración en ropa interior y deben permanecer inmóviles durante las mediciones. A medida que el escáner se mueve, un haz de energía dual pasa a través de la sección del músculo esquelético objetivo y es medido por un detector. Este procedimiento se repite hasta escanear todo el cuerpo y toma aproximadamente 3 minutos.

Las sesiones de detección se llevarán a cabo por la mañana y se indica a los participantes que no desayunen por la mañana para evitar perturbaciones en la exploración DEXA.

En caso de un hallazgo médico inesperado durante la selección, siempre se notificará a los sujetos. Si un sujeto no desea recibir esta notificación, no puede participar en el estudio.

A continuación, los sujetos se familiarizarán y evaluarán la fuerza bilateral en las máquinas de ejercicios. Primero, los participantes calentarán en una bicicleta ergométrica durante 5 minutos a 100W. Los sujetos recibirán instrucciones sobre la técnica adecuada de levantamiento de pesas en cada máquina de ejercicios (prensa de piernas y extensión de piernas) y completarán un protocolo de prueba estandarizado para determinar una medida de fuerza máxima (1RM) para cada máquina de ejercicios. En resumen, los sujetos estarán sentados en una máquina de prensa y extensión de piernas y comenzarán con un calentamiento de 2 series de 10 repeticiones con pesos elegidos por ellos mismos. Entonces la carga se incrementará por encima del peso de calentamiento. La carga se incrementará después de cada levantamiento exitoso, hasta el fallo, para determinar la fuerza máxima. Una repetición se clasifica como "válida" si el participante es capaz de completar todo el levantamiento de forma controlada, sin ayuda.

Cuando la evaluación se realice con éxito, se programará el día de la prueba. Para evitar un mayor impacto del ciclo menstrual en las mediciones del metabolismo de las proteínas, el día de la prueba se programará para los primeros 10 días de la fase folicular.

Cada sujeto participará en un ensayo experimental con una duración de ~9h. Se indicará a los sujetos que lleguen a la universidad a las 7:45 a. m. en ayunas y descansados ​​durante la noche, lo que significa que los participantes no pueden comer ni beber (excepto agua) a partir de las 22:00 a. m. de la noche anterior al ensayo experimental. Se les indicará que vengan a la universidad en automóvil o transporte público. Después de que los sujetos lleguen a la Universidad, les pediremos que se pongan los pantalones cortos, determinen su masa corporal y los asignen a una cama. Los sujetos descansarán en posición supina y se insertará un catéter de teflón en una vena dorsal de la mano calentada y se colocará en una caja caliente (60 °C) para la toma de muestras de sangre arterializada. Se recolectará una muestra de sangre de referencia (suero + plasma = 20 ml) en t = -210 min para determinar el nivel de enriquecimiento de aminoácidos antes de la intervención. Después de la recolección de la muestra de sangre basal, se insertará un segundo catéter de teflón en una vena antecubital del brazo contralateral para la infusión de isótopos estables con los aminoácidos 13C6-fenilalanina y 2H2-tirosina. Al comienzo de la infusión de isótopos, las mezclas plasmáticas de fenilalanina y tirosina se cebarán con una dosis única de la solución marcadora, inmediatamente después comenzará la infusión continua del marcador.

Durante todo el día de prueba experimental, la mano con el catéter de mano dorsal se precalentará durante 10 minutos antes de cada extracción de sangre en una caja caliente a 60 °C para aumentar el flujo sanguíneo. Esto facilita la recolección de sangre y minimiza el intercambio de nutrientes de la sangre a otros tejidos. Por lo tanto, nos permite recolectar sangre rica en nutrientes (arterializada) de una vena. Se recolectarán muestras de sangre arterializada (10 ml) en t = -180, -120, -60 y 0 min para evaluar los enriquecimientos del trazador en plasma durante la infusión del trazador en el período posabsorción de la noche en reposo. Después de un período previo a la infusión de 30 minutos (t = -180), durante el cual la infusión del trazador alcanza el estado estacionario, se tomará una primera biopsia muscular del m. vastus lateralis para determinar el enriquecimiento de fondo. En t=-45 min, se realizará una sesión de ejercicio de resistencia (40 minutos). Posteriormente, en t= 0 min se tomará una segunda biopsia de la misma pierna para evaluar la tasa de síntesis de proteína muscular basal. Inmediatamente después de la segunda biopsia, los sujetos ingerirán la bebida asignada (20 g de canola o proteína de suero o un placebo sin calorías). Se indicará a los sujetos que consuman la bebida dentro de ~ 5 min.

Al ingerir la bebida, el cronómetro se reiniciará (t = 0 min) y se recolectarán muestras de sangre arterializada (10 ml) en t = 30, 60, 90, 120, 180, 240 y 300 min durante el período posprandial. período para evaluar los perfiles y enriquecimientos de aminoácidos en plasma. Para determinar la síntesis de proteína muscular posprandial (MPS), se tomará otra biopsia en t = 300 min después de la ingestión de comida de la pierna contralateral. La biopsia muscular en t = 300 min nos permite obtener información fisiológica relevante con respecto a la duración de la respuesta anabólica a la ingesta de proteínas durante un período posprandial de 5 horas comúnmente utilizado. Colectivamente, con las biopsias obtenidas podemos medir la síntesis de proteínas musculares en estado de reposo (-180 - 0 min) y en todo el período posprandial (0 - 300 min; resultado principal).

Durante el día de la prueba, se tomarán un total de 3 biopsias musculares a través de 3 incisiones separadas, 2 biopsias de una pierna y 1 biopsia de la otra pierna. En total, se tomarán muestras de sangre 12 veces durante el día de la prueba, la primera muestra que se recolectará será de 20 ml y las muestras posteriores de 10 ml, para un total de 130 ml. Además, los síntomas gastrointestinales (GI) se evaluarán en t = -60, 30 y 180 minutos y la palatabilidad en t = 15 min mediante cuestionarios.