Tecnología de secuencia unicelular utilizada para revelar la heterogeneidad del hiperparatiroidismo secundario

Este proyecto pretende seleccionar casos que cumplan con los requisitos de la investigación, tomar hiperparatiroidismo secundario, hiperparatiroidismo primario y tejido paratiroideo humano normal, en total tres grupos, 4 casos en cada grupo, mediante el método de transcripción y secuenciación unicelular, construir un mapa. de los tipos de función paratiroidea humana, revelar la estructura genética y el estado de expresión genética de las células, y visualizar las características de expresión, la heterogeneidad intercelular y la heterogeneidad de los subconjuntos de células de las células hiperparatiroideas secundarias de manera jerárquica, dibujar un mapa unicelular y comparar los diferencias entre grupos. Explorar la patogénesis del hiperparatiroidismo secundario.

Se recogieron, congelaron y conservaron hiperparatiroidismo secundario, tejido paratiroideo de hiperparatiroidismo primario y tejido paratiroideo normal obtenidos por accidente, se descongeló el tejido congelado, se preparó una suspensión unicelular y cada célula se marcó específicamente mediante el sistema Mozhuo Genomics, después de romper el aceite, la cadena de polimerasa. Se construyó amplificación por reacción, transcripción inversa para obtener ADN complementario y una biblioteca de ADN complementario que pasó la inspección de calidad para obtener datos de alta calidad de células paratiroideas. Se utilizaron Cell Ranger, el paquete R Seurat y el diagrama de reducción de dimensionalidad t-SNE para reducir la dimensionalidad, agrupar y visualizar los datos.

Para construir un atlas unicelular de glándulas paratiroides, los investigadores realizaron un análisis de grupos de células similares según el perfil de expresión genética y luego visualizaron los datos mediante t-SNE. Según los resultados del agrupamiento de células, se identificaron los genes específicos y altamente expresados ​​en cada grupo de células. Se identificaron poblaciones de células según la expresión de genes emblemáticos y se compararon las diferencias en los tipos de células y las proporciones entre los grupos.