Tecnologia de sequência unicelular usada para revelar a heterogeneidade do hiperparatireoidismo secundário

Este projeto pretende selecionar casos que atendam aos requisitos de pesquisa, tomar hiperparatireoidismo secundário, hiperparatireoidismo primário e tecido de paratireoide humano normal, um total de três grupos, 4 casos em cada grupo, através do método de transcrição e sequenciamento unicelular, construir um mapa dos tipos de função da paratireoide humana, revelar a estrutura genética e o status de expressão gênica das células e visualizar as características de expressão, heterogeneidade intercelular e heterogeneidade de subconjuntos de células de células hiperparatireoidianas secundárias de maneira hierárquica, desenhar um mapa unicelular e comparar o diferenças entre grupos. Explorar a patogênese do hiperparatireoidismo secundário.

Hiperparatireoidismo secundário, tecido paratireoidiano de hiperparatireoidismo primário e tecido paratireoidiano normal obtido por acidente foram coletados, congelados e preservados, tecido congelado descongelado, suspensão unicelular foi preparada e cada célula foi especificamente marcada pelo sistema Mozhuo Genomics, após quebra do óleo, cadeia de polimerase amplificação da reação, transcrição reversa para obter DNA complementar e uma biblioteca de DNA complementar que passou na inspeção de qualidade foi construída para obter dados de alta qualidade de células da paratireoide. Cell Ranger, pacote R Seurat e diagrama de redução de dimensionalidade t-SNE foram usados ​​para reduzir a dimensionalidade, agrupar e visualizar os dados.

Para construir um atlas unicelular das glândulas paratireoides, os investigadores realizaram análises de agrupamento de células semelhantes de acordo com o perfil de expressão gênica e, em seguida, visualizaram os dados por t-SNE. De acordo com os resultados do agrupamento celular, foram identificados os genes específicos e altamente expressos em cada agrupamento celular. As populações celulares foram identificadas de acordo com a expressão de genes de referência, e as diferenças nos tipos de células e proporções entre os grupos foram comparadas.