Enkeltcellet sekvensteknologi brugt til at afsløre heterogenitet af sekundær hyperparathyroidisme

Dette projekt har til hensigt at udvælge cases, der opfylder forskningskravene, tage sekundær hyperparathyroidisme, primær hyperparathyroidisme og normalt humant parathyroidvæv, i alt tre grupper, 4 cases i hver gruppe, gennem metoden til enkeltcellet transkription og sekventering, konstruere et kort af humane biskjoldbruskkirtelfunktionstyper, afsløre cellernes genstruktur og genekspressionsstatus og visualisere ekspressionskarakteristika, intercellulær heterogenitet og heterogenitet af celleundergrupper af sekundære hyperparathyroidceller på en hierarkisk måde, tegne et enkeltcellekort og sammenligne forskelle mellem grupper. At udforske patogenesen af ​​sekundær hyperparathyroidisme.

Sekundær hyperparathyroidisme, parathyreoideavæv af primær hyperparathyroidisme og normalt parathyroidvæv opnået ved et uheld blev opsamlet, frosset og konserveret, frosset væv optøet, enkeltcellesuspension blev fremstillet, og hver celle blev specifikt mærket af Mozhuo Genomics-systemet, efter oliebrydning, polymerasekæde reaktionsforstærkning, revers transkription for at opnå komplementært DNA, og et bibliotek af komplementært DNA, der bestod kvalitetsinspektion, blev konstrueret for at opnå højkvalitetsdata for parathyreoideaceller. Cell Ranger, R Seurat-pakken og t-SNE dimensionsreduktionsdiagram blev brugt til at reducere dimensionaliteten, klynge og visualisere dataene.

For at konstruere et enkeltcellet atlas af biskjoldbruskkirtler udførte efterforskere klyngeanalyse af lignende celler i henhold til genekspressionsprofilen og visualiserede derefter dataene ved t-SNE. Ifølge resultaterne af celleklynge blev de specifikke og højt udtrykte gener i hver celleklynge identificeret. Cellepopulationer blev identificeret i henhold til ekspressionen af ​​skelsættende gener, og forskellene i celletyper og proportioner mellem grupper blev sammenlignet.