Estandarización y Aplicación del Plasma Rico en Plaquetas Puro en la Mejora de la Función Espermática

Fase 1: Estandarizar y validar el protocolo de plasma rico en plaquetas puro (P-PRP)

Objetivos:

Validar un protocolo estandarizado de doble centrifugación para preparar plasma rico en plaquetas puro (P-PRP) en un entorno de laboratorio de FIV evaluando su rendimiento plaquetario, pureza y reproducibilidad.

Resultados

Resultado principal Concentración de plaquetas en PRP Recuento absoluto de plaquetas en P-PRP y aumento en comparación con la sangre total Resultado secundario Recuperación de plaquetas (%): (Recuento de plaquetas en P-PRP × volumen de P-PRP) / (Recuento de plaquetas en sangre total × volumen de sangre) × 100 Pureza: Concentración de leucocitos (WBC) en P-PRP Factores de crecimiento :p. ej. concentraciones de VEGF, PDGF-AB, TGF-β, IGF-1… en plasma de preparaciones de PPP y P-PRP Métricas de reproducibilidad: Coeficiente de variación (CV%), coeficiente de correlación intraclase (CCI) y límites de acuerdo de Bland-Altman para duplicados técnicos y biológicos.

Fase 2: Examinar el efecto del plasma rico en plaquetas puro (P-PRP) en los parámetros espermáticos Hipótesis y objetivos Hipótesis El investigador plantea la hipótesis de que el cocultivo de semen con plasma rico en plaquetas puro (P-PRP) mejora la calidad espermática al aumentar la motilidad en comparación con el medio de cultivo estándar sin P-PRP (grupo de control).

Resultado principal

- Comparar la motilidad espermática total después de 24 horas de cocultivo entre muestras de semen cocultivadas con P-PRP y un grupo de control (sin P-PRP).

Resultado secundario

• Comparar los parámetros espermáticos después de otros intervalos de cocultivo entre muestras de semen cocultivadas con P-PRP y un grupo de control (sin P-PRP).
• Comparar la morfología y el Índice de Fragmentación del ADN (DFI) en muestras de semen después de 24 horas de cocultivo con P-PRP frente al control.