Padronização e Aplicação de Plasma Rico em Plaquetas Puro na Melhoria da Função Espermática

Fase 1: Padronizar e validar o protocolo de plasma rico em plaquetas puro (P-PRP)

Objetivos:

Validar um protocolo padronizado de dupla centrifugação para preparar plasma rico em plaquetas puro (P-PRP) num laboratório de FIV, avaliando o rendimento de plaquetas, a pureza e a reprodutibilidade.

Resultados

Resultado primário Concentração de plaquetas no PRP Contagem absoluta de plaquetas no P-PRP e aumento em relação ao sangue total Resultado secundário Recuperação de plaquetas (%): (Contagem de plaquetas no P-PRP × volume de P-PRP) / (Contagem de plaquetas no sangue total × volume de sangue) × 100 Pureza: Concentração de glóbulos brancos (GB) no P-PRP Fatores de crescimento: p.ex., concentrações de VEGF, PDGF-AB, TGF-β, IGF-1… no plasma da preparação de PPP e P-PRP Métricas de reprodutibilidade: Coeficiente de variação (CV%), coeficiente de correlação intraclasse (CCI) e limites de concordância de Bland-Altman para duplicados técnicos e biológicos.

Fase 2: Examinar o efeito do plasma rico em plaquetas puro (P-PRP) nos parâmetros espermáticos Hipóteses e objetivos Hipóteses O investigador hipotetiza que a co-cultura de sémen com plasma rico em plaquetas puro (P-PRP) melhora a qualidade do esperma ao aumentar a motilidade em comparação com meio de cultura padrão sem P-PRP (grupo de controlo).

Resultado primário

- Comparar a motilidade espermática total após 24 horas de co-cultura entre amostras de sémen co-cultivadas com P-PRP e um grupo de controlo (sem P-PRP).

Resultado secundário

• Comparar os parâmetros espermáticos após outros tempos de co-cultura entre amostras de sémen co-cultivadas com P-PRP e um grupo de controlo (sem P-PRP).
• Comparar a morfologia e o Índice de Fragmentação do DNA (IFD) em amostras de sémen após 24 horas de co-cultura com P-PRP versus controlo.