CD64 Neutrófilo Temprano y Tardío y HLA-DR Monocitario como Biomarcadores para el Shock Séptico

Protocolo detallado del estudio

1. Título: CD64 de neutrófilos temprano y tardío y HLA-DR de monocitos como biomarcadores para el shock séptico.

2. Diseño del estudio

   • Tipo: Estudio de cohorte observacional, prospectivo, de un solo centro.
   • Entorno: UCI médica de un hospital universitario de atención terciaria en el norte de la India.
   • Duración: Enero de 2019 - Diciembre de 2019.
   • Aprobación ética: Comité de Ética e Investigación Biomédica (BREC/18/194).
   • Directrices: Realizado de acuerdo con los estándares de notificación STROBE.

3. Objetivos

   - Objetivo principal: Evaluar el CD64 de neutrófilos (nCD64), el HLA-DR de monocitos (mHLA-DR) y el Índice de Sepsis como marcadores pronósticos en el shock séptico.

   • Objetivos secundarios:
   • Comparar los niveles de biomarcadores entre supervivientes y no supervivientes.
   • Evaluar la precisión predictiva de estos marcadores para la mortalidad a 28 días mediante análisis ROC.

4. Población del estudio

   • Criterios de inclusión:
   • Edad ≥18 años.
   • Diagnóstico de shock séptico según los criterios de Sepsis-3 vigentes.
   • Consentimiento informado por escrito del paciente o familiar más cercano.
   • Criterios de exclusión:
   • Mujeres embarazadas.
   • Neoplasia maligna activa.
   • Enfermedad hepática crónica grave.
   • Enfermedad renal crónica que requiera hemodiálisis de mantenimiento.
   • Pacientes inmunodeprimidos o aquellos en terapia inmunomoduladora antes del inicio de la sepsis.
   • Sepsis no bacteriana (viral, fúngica, tuberculosa).

5. Inscripción y tamaño de la muestra

   • Evaluados: 80 pacientes.
   • Excluidos: 24 (según criterios de exclusión).
   • Cohorte final: 56 pacientes (37 supervivientes, 19 no supervivientes).
   • Controles: 20 voluntarios sanos para valores basales de biomarcadores.

6. Recopilación de datos

   • Datos demográficos: Edad, sexo, residencia, IMC, estado de tabaquismo.
   • Variables clínicas: Diagnóstico primario, comorbilidades, puntuaciones de gravedad (qSOFA, SIRS, APACHE II), signos vitales, parámetros de disfunción orgánica (PaO₂/FiO₂, soporte inotrópico, terapia de reemplazo renal, GCS).
   • Parámetros de laboratorio: Hemograma completo, pruebas de función renal/hepática, gasometría arterial, detalles del diagnóstico primario.
   • Medidas de resultado: Estancia en UCI, días de ventilador, mortalidad a 28 días.

7. Evaluación de biomarcadores

   • Marcadores:
   • CD64 de neutrófilos (nCD64).
   • HLA-DR de monocitos (mHLA-DR).
   • Índice de Sepsis = nCD64 ÷ mHLA-DR.
   • Método: Citometría de flujo (FACS Canto II de 8 colores, BD Biosciences).
   • Unidades: Intensidad media de fluorescencia (MFI).
   • Puntos temporales:
   • Día 1 (ingreso).
   • Día 8 (seguimiento).

8. Análisis estadístico

   • Software: SPSS v24 (IBM).
   • Estadística descriptiva: Media ± DE para datos normales; mediana (RIQ) para datos sesgados.
   • Comparaciones:
   • Prueba t independiente para distribución normal.
   • Prueba U de Mann-Whitney para datos sesgados.
   • Análisis predictivo: Curvas ROC para nCD64, HLA-DR e Índice de Sepsis.
   • Umbral de significación: p < 0,05 (bilateral).

9. Resultados

   • Resultado principal: Mortalidad a 28 días.
   • Resultados secundarios: Duración de la estancia en UCI, días de ventilador, gravedad de la disfunción orgánica.

10. Seguridad y cumplimiento

    • Residuos biomédicos: Gestionados según las Normas de Gestión y Manipulación de Residuos Biomédicos.
    • Seguridad del paciente: Seguidos protocolos estándar de UCI; ninguna intervención más allá de la atención rutinaria.