Detección Fenotípica y Genotípica de la Formación de Biopelículas y la Actividad de Bombas de Expulsión en Klebsiella Pneumoniae Multirresistente (Klebsiella)

K. pneumoniae es un miembro de la familia Enterobacteriaceae Gram negativa. Es una bacteria con forma de bastón, encapsulada, no móvil, no formadora de esporas, caracterizada por un aspecto mucoide único en placas de agar.

Klebsiella pneumoniae es un patógeno oportunista responsable de una amplia gama de infecciones adquiridas en la comunidad y asociadas a la atención sanitaria, incluidas infecciones del tracto urinario, infecciones de heridas, bacteriemia y neumonía.

1. Muestra: muestras de orina, pus y esputo.
2. Cultivo: las muestras se inocularán en agar MacConkey y se subcultivarán en agar eosina azul de metileno.

3. La identificación de los aislados se realizará mediante:

   • Morfología de colonias.
   • Tinción de Gram.
   • Reacciones bioquímicas: incluidas las pruebas de Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y utilización de Citrato (IMViC).
4. La prueba de susceptibilidad antimicrobiana de los aislados se realizará utilizando el método de Kirby-Bauer (método de difusión en disco) con agar Muller Hinton, de acuerdo con las directrices del Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI 2025) para grupos seleccionados de antibióticos.
5. Detección fenotípica de la formación de biopelícula mediante el método de placa de microtitulación.
6. Detección fenotípica de la actividad de la bomba de eflujo mediante el método de agar de bromuro de etidio en forma de rueda de carro.
7. Detección de genes de biopelícula (fimH-1, mrkA y mrkD) mediante PCR convencional.
8. Detección de genes de bomba de eflujo (acrAB, tolC y mdtk) mediante PCR convencional.