Histamiinin farmakodynamiikan in vivo -arviointi

Tämän tutkimuksen yleisenä tavoitteena on kehittää ja validoida ei-invasiivisia lähestymistapoja, jotka soveltuvat käytettäväksi pediatriassa ja jotka riittävät suoraan arvioimaan genotyyppi-fenotyyppi-assosiaatioita mikrovaskulaarista toimintaa muuttavien lääkkeiden pitoisuus-vaikutusprofiilin määrittäjinä. Tämän projektin erityistavoitteena on arvioida, voidaanko aiemmin validoidulla laser-Doppler-tekniikalla määritettyä mikrovaskulaarista verenvirtausta käyttää luotettavana korvikepäätepisteenä, joka pystyy toiminnallisesti erottamaan polymorfismien vaikutukset geeneissä, jotka ovat kvantitatiivisesti tärkeitä histamiinin biotransformaatiolle. Tutkijat olettavat, että mikrovaskulaarista verenvirtausnopeutta voidaan käyttää pätevänä korvikemarkkerina, jotta voidaan erottaa alleelisten varianttien toiminnalliset seuraukset entsyymeissä, jotka ovat ensisijaisesti vastuussa histamiinin biotransformaatiosta.

Projekti sisältää kaksi osaa:

1. Histamiini-iontoforeesin validointi (mikrovaskulaarisen verenvirtauksen mittaaminen laser-Doppler-virtausmittauksella) lasten kohortissa farmakologisena provokaatiotestinä, joka pystyy luonnehtimaan luotettavasti ihon mikroverisuoniston normaalia fysiologista vastetta tälle ksenobiootille. Tutkimukseen osallistui 50 lasta, joilla oli diagnoosi. allergisista sairauksista tai muista "allergisista" tiloista, joissa hoito antihistamiineilla edustaa lääketieteellistä "hoidon standardia". Koehenkilöt saavat samanaikaisesti (kontralateraalisiin raajoihin) histamiinialtistusta "kultaisen standardin" ihopistokokeella (aikariippuvainen vaste, joka on arvioitu wheal- ja flare-reaktioiden sarjaarvioinnilla) ja aiemmin kuvatulla iontoforeesitekniikalla (aikariippuvainen vaste mikrovaskulaarisen sarjan arvioinnilla) verenkierto validoitua laser-Doppler-tekniikkaa käyttäen). Lisäksi DNA eristetään näistä koehenkilöistä genotyypitystä varten osassa 2 kuvatulla tavalla).
2. Mikrovaskulaarisen vasteen arviointi histamiinialtistusta korvikemarkkerina, joka kykenee toiminnallisesti erottamaan genotyyppi-fenotyyppi-assosiaatiot polymorfisesti ilmentyneiden geenien suhteen, jotka ovat kvantitatiivisesti tärkeitä histamiinin biotransformaation ja farmakologisen inaktivaation säätelyssä. Ensin suoritettiin genotyypitys 150 lisäkohdetta, joilla on vahvistettu allerginen diagnoosi. sairaus, jossa hoito antihistamiineilla edustaa lääketieteellistä "hoidon standardia". Genotyyppitiedot ensisijaisesti kiinnostavista ehdokasgeeneistä, histamiini-N-metyylitransferaasi (HNMT) ja diamiinioksidaasista (DAO), ovat siten saatavilla yhteensä 200 koehenkilöltä. HNMT:n (pääasiassa histamiinin biotransformaatiosta vastaavan entsyymin) tunnettujen genotyyppi-fenotyyppi-assosiaatioiden perusteella valitaan kaksi kohorttia kohorttia niistä, joita tutkitaan käyttämällä äärimmäisen ristiriitaista fenotyyppilähestymistapaa: kohortteja, joilla ennustetaan genotyypin perusteella olevan alentunut HMNT-aktiivisuus (ts. , joilla on 1 tai 0 toiminnallista alleelia) ja koehenkilöillä, joilla ennustetaan olevan normaali entsyymiaktiivisuus (eli niillä, joilla on kaksi toiminnallista alleelia). Nämä tutkimuksen osallistujat saavat sitten transkutaanisen histamiinialtistuksen iontoforeesilla, mitä seuraa toistuva mikrovaskulaarisen reaktiivisuuden arviointi, joka heijastuu veren virtausnopeuden aikakeskiarvon mittauksella vakiintuneen laser-Doppler-tekniikan avulla. Laser-Doppler-arvioinnin veren virtausnopeuden ja muiden parametrien tilastollista analyysiä käytetään ensisijaisena tulosmittauksena kahden tutkimuskohortin vertailussa HNMT:n ja DAO:n ilmentymisen ja niiden toiminnallisten seurausten suhteen käyttämällä histamiinivastetta korvikearvioinnissa. fenotyypistä.